本发明涉及一种女性栓剂及其制备方法。
背景技术：
更年期是妇女从性成熟期逐渐进入老年期的过渡时期。由于卵巢功能逐渐衰退，神经—内分泌—免疫—代谢网络功能减退，而产生一系列临床症候群，称之为更年期综合症，症状如性器官萎缩，如分泌粘液减少，阴道变小变窄，阴道炎，宫颈糜烂，严重影响更年期妇女的生活质量；潮热、盗汗、心慌气短、四肢酸懒、失眠健忘等；且发生高血压、冠心病、骨质疏松引起骨折的危险性增大。在更年期阶段约有85％的妇女被这一系列症状困扰，而影响妇女的身心健康，而且影响工作、家庭生活与人际关系，严重者将发生悲观厌世等精神失常，使患者饱受精神上的痛苦，随着人类老龄化发展的趋势，对更年期综合症的防治成为全球的医学课题和社会问题。
使用雌激素治疗更年期综合征受到重视和肯定。但由于许多药物禁忌症的限制及子宫内膜癌和乳腺癌的潜在危险，影响雌激素的广泛应用，使病人难以接受。植物雌激素既具有雌激素作用，又可避免长期应用过强雌激素所导致某些器官和组织毒副作用，因此越来越受到重视，但口服由于首过效应，吸收等因素，效果不甚理想。
技术实现要素：
本发明提供了一种治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂及其制备方法，该药物为一种含有植物雌激素的栓剂，避免长期应用化学雌激素药物的致癌风险，同时因为采用栓剂剂型，药物直达病灶，安全高效。
本发明治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂包含槐角提取物。
上述栓剂的制备方法按以下步骤进行：
一、将槐角用浓度为70％～90％的乙醇提取2次，每次提取时间为2±0.2小时，乙醇体积为槐角的4～6倍；合并提取液浓缩至稠膏，然后向稠膏中加水，冷藏静置24小时再离心，收集沉淀物，用热水水洗、离心，之后向沉淀物中加浓度为70％～90％的乙醇，并用NaOH调节pH值至8～10，搅拌溶解沉淀物；然后过滤，滤液用盐酸调节pH值至5～7，再放置析出沉淀，沉淀用热水洗至中性、干燥，得到槐角提取物；
二、将槐角提取物过筛后加入基质中搅拌均匀，保温灌模，即得到治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂。
本发明治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂疗效显著、对更年期雌激素减少引起的外阴、前庭部及阴道环部的萎缩性病变效果显著，可避免现有雌激素药物使用过程中出现的不良反应，对阴道无刺激作用。具有标本兼治，作用迅速，毒性极低、可安全长期使用，质量可控。
本发明治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂的制备过程中仅使用水、酸碱及乙醇；对人体有害的氯仿、易燃易爆的乙醚、石油醚等都不使用，保证了安全性。本发明制备不使用微生物发酵技术，也没有使用大孔树脂吸附、硅胶柱层析、超临界CO2萃取等分离手段，即制得高纯度的槐角提取物(本发明槐角提取物主要成分为槐角苷和染料木素)，说明本发明方法绿色环保、工艺简单、成本低廉、安全高效，适合产业化大量制备槐角提取物。
具体实施方式
本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。
具体实施方式一：本实施方式治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂包含槐角提取物。
本实施方式栓剂中的活性成分——槐角提取物通过阴道粘膜直接发挥药效，避免肝脏的首过效应。
本实施方式治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂中不用氯仿、乙醚和石油醚脱脂，适合工业化，工艺安全环保，且提取物对阴道无刺激作用，可明显减缓阴道萎缩。
具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一的不同点是：该栓剂还包括聚乙二醇400(PEG400)、硬脂酸聚烃氧40酯(S-40)、壳聚糖、甘油和吐温80；其中槐角提取物与聚乙二醇400、硬脂酸聚烃氧40酯、壳聚糖、甘油、吐温80的重量比为(3～24)︰(5～20)︰(50～200)︰(0～20)︰(4～10)︰(0.5～4)。
具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式二的不同点是：该栓剂中槐角提取物、聚乙二醇400、硬脂酸聚烃氧40酯、壳聚糖、甘油、吐温80的重量比为14.4︰6︰105︰12︰6︰1。其它与实施方式一至二之一相同。
具体实施方式四：本实施方式治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂的制备方法按以下步骤进行：
一、将槐角用浓度为70％～90％的乙醇提取2次，每次提取时间为2±0.2小时，乙醇体积为槐角的4～6倍；合并提取液浓缩至稠膏，然后向稠膏中加水，冷藏静置24小时再离心，收集沉淀物，用热水水洗、离心，之后向沉淀物中加浓度为70％～90％的乙醇，并用NaOH调节pH值至8～10，搅拌溶解沉淀物；然后过滤，滤液用盐酸调节pH值至5～7，再放置析出沉淀，沉淀用热水洗至中性、干燥，得到槐角提取物；
二、将槐角提取物过筛后加入基质中搅拌均匀，保温灌模，即得到治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂。
本实施方式槐角提取物制备方法工艺简单、便于操作，不使用微生物发酵技术，大孔树脂吸附、硅胶柱层析、超临界CO2萃取等分离手段，对于设备要求低，投入少；溶剂温和无毒、无刺激性，对人体无害。
利用色谱检测本实施方式制备的槐角提取物中主要成分为槐角苷或染料木素；本实施方式槐角提取物的收率为0.3～3％，槐角苷含量为70～99％。
具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式四的不同点是：步骤二中基质是聚乙二醇400、硬脂酸聚烃氧40酯和壳聚糖采用热熔法70℃融解后，再加入甘油及吐温80制成。其它步骤及参数与实施方式六相同。
具体实施方式六：本实施方式与具体实施方式四或五的不同点是：步骤二中基质是聚乙二醇400和硬脂酸聚烃氧40酯采用热熔法70℃融解后，再加入甘油及吐温80制成。其它步骤及参数与实施方式四或五相同。
具体实施方式七：本实施方式与具体实施方式四或五的不同点是：步骤二中槐角提取物与聚乙二醇400、硬脂酸聚烃氧40酯、壳聚糖、甘油、吐温80的重量比为(3～24)︰(5～20)︰(50～200)︰(0～20)︰(4～10)︰(0.5～4)。其它步骤及参数与实施方式四或五相同。
具体实施方式八：本实施方式与具体实施方式四至七之一的不同点是：步骤一中滤液用盐酸调节pH值至5～7，再放置析出沉淀，之后沉淀干燥加入浓度为60％±5％的乙醇液中85℃回流，水解4小时，然后过滤、滤液冷藏放置24h，滤出结晶，结晶60℃以下干燥4±0.5小时，即得槐角提取物；其中，沉淀干燥后加入的乙醇液中含有6％的HCl。其它步骤及参数与实施方式四至七相同。
本实施方式沉淀干燥加入浓度为60％±5％的乙醇液中85℃回流，其中乙醇液的质量是沉淀的20倍。
具体实施方式九：本实施方式与具体实施方式四至八之一的不同点是：步骤一中将槐角粉碎成24～65目。其它步骤及参数与实施方式四至八之一相同。
具体实施方式十：本实施方式与具体实施方式四至九之一的不同点是：步骤一中冷藏温度为-20～20℃。其它步骤及参数与实施方式四至九之一相同。
具体实施方式十一：本实施方式与具体实施方式四至十之一的不同点是：步骤一中向稠膏中加入与稠膏等重量的水。其它步骤及参数与实施方式四至十之一相同。
具体实施方式十二：本实施方式与具体实施方式四至十一之一的不同点是：步骤一中热水温度为40～90℃。其它步骤及参数与实施方式四至十一之一相同。
具体实施方式十三：本实施方式与具体实施方式四至十二之一的不同点是：步骤二中保温灌模过程温度控制在60±2℃。其它步骤及参数与实施方式四至十二之一相同。
具体实施方式十四：本实施方式与具体实施方式四至十三之一的不同点是：步骤一中沉淀物用浓度为70％～90％的乙醇溶解，沉淀物与乙醇的重量比为(1～5︰1)。其它步骤及参数与实施方式四至十三之一相同。
具体实施方式十四：本实施方式与具体实施方式四至七之一的不同点是：步骤一中收集沉淀物并水洗之后沉淀物改用乙酸乙酯萃取脱脂，干燥，得到槐角提取物。其它步骤及参数与实施方式四至七之一相同。
具体实施方式十五：本实施方式与具体实施方式四至七之一的不同点是：步骤一中沉淀用热水洗至中性后再用乙酸乙酯萃取脱脂，干燥，得到槐角提取物。其它步骤及参数与实施方式四至七之一相同。
实施例1
治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂的制备方法按以下步骤进行：
一、将槐角用浓度为80％的乙醇提取2次，每次提取时间为2小时，乙醇体积为槐角的5倍；合并提取液浓缩至稠膏，然后向稠膏中加水，冷藏静置24小时再离心，收集沉淀物，用热水洗两次、离心，之后向沉淀物中加浓度为70％的乙醇，并用NaOH调节pH值至8，搅拌溶解沉淀物；然后过滤，滤液用盐酸调节pH值至5，再放置析出沉淀，沉淀用热水洗至中性、干燥，得到槐角提取物；
二、将槐角提取物过筛后加入基质中搅拌均匀，保温灌模，即得到治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂；
其中，步骤二中基质是聚乙二醇400和硬脂酸聚烃氧40酯采用热熔法70℃融解后，再加入甘油及吐温80制成；
步骤二中槐角提取物、聚乙二醇400、硬脂酸聚烃氧40酯、甘油、吐温80的重量分别是0.15kg、0.172kg、1.46kg、0.086kg和0.014kg。
本实施例治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂中槐角提取物的含量为120mg/支。
实施例2
治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂的制备方法按以下步骤进行：
一、将槐角用浓度为90％的乙醇提取2次，每次提取时间为2小时，乙醇体积为槐角的5倍；合并提取液浓缩至稠膏，然后向稠膏中加水，冷藏静置24小时再离心，收集沉淀物，用热水洗两次、离心，之后向沉淀物中加浓度为80％的乙醇，并用NaOH调节pH值至10，搅拌溶解沉淀物；然后过滤，滤液用盐酸调节pH值至7，再放置析出沉淀，沉淀用热水洗至中性、干燥，得到槐角提取物；
二、将槐角提取物过筛后加入基质中搅拌均匀，保温灌模，即得到治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂；
其中，步骤二中基质是聚乙二醇400、硬脂酸聚烃氧40酯和壳聚糖采用热熔法70℃融解后，再加入甘油及吐温80制成；
步骤二中槐角提取物、聚乙二醇400、硬脂酸聚烃氧40酯、壳聚糖、甘油、吐温80的重量分别是0.15kg、0.172kg、1.26kg、0.06kg、0.086kg和0.014kg。
本实施例治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂中槐角提取物的含量为120mg/支。
实施例3
治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂的制备方法按以下步骤进行：
一、将槐角用浓度为80％的乙醇提取2次，每次提取时间为2小时，乙醇体积为槐角的5倍；合并提取液浓缩至稠膏，然后向稠膏中加水，冷藏静置24小时再离心，收集沉淀物，用热水洗两次、离心，之后向沉淀物中加浓度为70％的乙醇，并用NaOH调节pH值至8，搅拌溶解沉淀物；然后过滤，滤液用盐酸调节pH值至5，再放置析出沉淀，之后沉淀干燥加入浓度为60％的乙醇液中85℃回流，水解4小时，然后过滤、滤液冷藏放置24h，滤出结晶，结晶60℃以下干燥4小时，即得槐角提取物；其中，沉淀干燥后加入的乙醇液中含有6％的HCl；
二、将槐角提取物过筛后加入基质中搅拌均匀，保温灌模，即得到治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂；
其中，步骤二中基质是聚乙二醇400和硬脂酸聚烃氧40酯采用热熔法70℃融解后，再加入甘油及吐温80制成；
步骤二中槐角提取物、聚乙二醇400、硬脂酸聚烃氧40酯、甘油、吐温80的重量分别是0.15kg、0.172kg、1.46kg、0.086kg和0.014kg。
本实施例治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂中槐角提取物的含量为120mg/支。
实施例4
治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂的制备方法按以下步骤进行：
一、将槐角用浓度为90％的乙醇提取2次，每次提取时间为2小时，乙醇体积为槐角的5倍；合并提取液浓缩至稠膏，然后向稠膏中加水，冷藏静置24小时再离心，收集沉淀物，用热水洗两次、离心，之后向沉淀物中加浓度为80％的乙醇，并用NaOH调节pH值至10，搅拌溶解沉淀物；然后过滤，滤液用盐酸调节pH值至7，再放置析出沉淀，之后沉淀干燥加入浓度为60％的乙醇液中85℃回流，水解4小时，然后过滤、滤液冷藏放置24h，滤出结晶，结晶60℃以下干燥4小时，即得槐角提取物；其中，沉淀干燥后加入的乙醇液中含有6％的HCl；
二、将槐角提取物过筛后加入基质中搅拌均匀，保温灌模，即得到治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂；
其中，步骤二中基质是聚乙二醇400、硬脂酸聚烃氧40酯和壳聚糖采用热熔法70℃融解后，再加入甘油及吐温80制成；
步骤二中槐角提取物、聚乙二醇400、硬脂酸聚烃氧40酯、壳聚糖、甘油、吐温80的重量分别是0.15kg、0.172kg、1.26kg、0.06kg、0.086kg和0.014kg。
本实施例治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂中槐角提取物的含量为120mg/支。
实施例5
本实施例与实施例1的不同在于步骤二中槐角提取物、聚乙二醇400、硬脂酸聚烃氧40酯、甘油、吐温80的重量分别是0.24kg、0.172kg、1.46kg、0.086kg和0.014kg。
本实施例治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂中槐角提取物的含量为180mg/支。
实施例6
本实施例与实施例1的不同在于步骤二中步骤二中槐角提取物、聚乙二醇400、硬脂酸聚烃氧40酯、甘油、吐温80的重量分别是0.1kg、0.172kg、1.46kg、0.086kg和0.014kg。
本实施例治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂中槐角提取物的含量为80mg/支。
实施例7
本实施例与实施例2的不同在于步骤二中步骤二中槐角提取物、聚乙二醇400、硬脂酸聚烃氧40酯、壳聚糖、甘油、吐温80的重量分别是0.24kg、0.172kg、1.46kg、0.10kg、0.086kg和0.014kg。
本实施例治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂中槐角提取物的含量为180mg/支。
实施例8
本实施例与实施例2的不同在于步骤二中槐角提取物、聚乙二醇400、硬脂酸聚烃氧40酯、壳聚糖、甘油、吐温80的重量分别是0.1kg、0.086kg、0.172kg、1.26kg、0.20kg、0.086kg和0.014kg。
本实施例治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂中槐角提取物的含量为80mg/支。
实施例9
本实施例与实施例3的不同在于步骤二中槐角提取物、聚乙二醇400、硬脂酸聚烃氧40酯、甘油、吐温80的重量分别是0.24kg、0.172kg、1.46kg、0.086kg和0.014kg。
本实施例治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂中槐角提取物的含量为180mg/支。
实施例10
本实施例与实施例3的不同在于步骤二中步骤二中槐角提取物、聚乙二醇400、硬脂酸聚烃氧40酯、甘油、吐温80的重量分别是0.1kg、0.172kg、1.46kg、0.086kg和0.014kg。
本实施例治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂中槐角提取物的含量为80mg/支。
实施例11
本实施例与实施例4的不同在于步骤二中步骤二中槐角提取物、聚乙二醇400、硬脂酸聚烃氧40酯、壳聚糖、甘油、吐温80的重量分别是0.24kg、0.172kg、1.46kg、0.10kg、0.086kg和0.014kg。
本实施例治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂中槐角提取物的含量为180mg/支。
实施例12
本实施例与实施例4的不同在于步骤二中槐角提取物、聚乙二醇400、硬脂酸聚烃氧40酯、壳聚糖、甘油、吐温80的重量分别是0.1kg、0.086kg、0.172kg、1.26kg、0.20kg、0.086kg和0.014kg。
本实施例治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂中槐角提取物的含量为80mg/支。
实施例13
本实施例与实施例2的不同在于步骤一、将槐角用浓度为80％的乙醇提取2次，每次提取时间为2小时，乙醇体积为槐角的5倍；合并提取液浓缩至稠膏，然后向稠膏中加水，冷藏静置24小时再离心，收集沉淀物，改用乙酸乙酯萃取脱脂，干燥，得到槐角提取物。
实施例14
本实施例与实施例2的不同在于步骤一、将槐角用浓度为90％的乙醇提取2次，每次提取时间为2小时，乙醇体积为槐角的5倍；合并提取液浓缩至稠膏，然后向稠膏中加水，冷藏静置24小时再离心，收集沉淀物，用热水洗两次、离心，之后向沉淀物中加浓度为80％的乙醇，并用NaOH调节pH值至10，搅拌溶解沉淀物；然后过滤，滤液用盐酸调节pH值至7，再放置析出沉淀，沉淀用热水洗至中性再用乙酸乙酯萃取脱脂，干燥，得到槐角提取物；
对比试验：
①大鼠去卵巢6周后，模型组阴道严重萎缩，只有假手术组的1/2左右，实验组(实施例1～14组和更宝芬组)大鼠经过2周和20周给药，末次给药后24h，脱颈椎处死各组大鼠，摘除大鼠子宫、阴道小心剥离周围脂肪后称重，计算子宫、阴道湿重指数。子宫湿重指数＝子宫湿重(mg)/大鼠体重(g)；阴道湿重指数＝阴道湿重(mg)/大鼠体重(g)，检测结果如表1。
表1
给药2周，实施例1～14组和更宝芬组每日给药1次实验大鼠阴道重量并接近于假手术组，治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂对维持阴道重量一定作用(p<0.05)。实施例1～14组每日早晚各给药1次验大鼠阴道重量接近于假手术组，而更宝芬组每日早晚各给药一次实验大鼠阴道重量增加，有显著性差异。
给药20周，实施例1～14组和更宝芬组每日给药1次实验大鼠阴道重量并接近于假手术组，治疗女性泌尿生殖道萎缩的栓剂对维持阴道重量一定作用(p<0.05)。实施例1～14组每日早晚各给药1次实验大鼠阴道重量增加至合理范围后保持稳定，而更宝芬组每日早晚各1粒实验大鼠阴道重量明显增加，有显著性差异。
阴道湿重指数：与假手术组比较，模型组的阴道湿重指数降低，有显著性差异(p<0.05)；与假手术组比较，实施例1～4组的阴道湿重指数增加，有显著性差异(p<0.05)；更宝芬组与实施例5～14组中阴道湿重指数略有增加，但无显著性差异；与模型组比较，更宝芬组、实施例1～14组阴道湿重指数增加，有显著性差异(p<0.05)。
子宫湿重指数：与假手术组比较，模型组的湿重指数降低，有显著性差异(p<0.05)，更宝芬组与实施例1～14组均无显著性差异；与模型组比较，更宝芬组子宫湿重指数增高，有显著性差异(p<0.05)，实施例1～14组无显著性差异，说明更宝芬有增加子宫重量的风险，不排除导致子宫癌的风险，而实施例1～14组对子宫重量无影响。
②大鼠假手术组阴道pH在术后迅速增加，给药2周和20周后，更宝芬组实验大鼠阴道pH值升高，实施例1～14组实验大鼠阴道pH值明显降低，阴道pH升高易导致阴道感染。结果见表2。
表2
实施例1～14栓剂及更宝芬阴道刺激试验：
将实施例1～14组(分为2批，一批每日1粒栓剂，另一批每日早晚各1粒栓剂)和更宝芬组(每日1粒)大鼠经过20周给药后处死，取阴道组织进行病理组织学检测。结果发现，各实施例组大鼠阴道肉眼观察和病理组织学检查均未发现粘膜有充血、水肿等现象，给药组与基质组、对照组相比无显著差异。更宝芬组在饲喂过程中发现有阴道不规则出血，消瘦，食欲下降，毛色晦暗的现象，而实施例1～14组实验大鼠未见此类现象，说明实施组1～14组安全性优于更宝芬组。
表3
②大鼠假手术组阴道pH在术后迅速增加，给药2周后，更宝芬组实验大鼠阴道pH值升高，实施例1～9组实验大鼠阴道pH值明显降低，阴道pH升高易导致阴道感染。结果见表2。
表4