九香虫脂肪油提取物的新用途的制作方法

本发明涉及九香虫脂肪油提取物的新用途，具体地，是从九香虫中提取的脂肪油治疗胃溃疡的新用途，属医药领域。
背景技术：
：胃溃疡是一种临床常见的具有反复发作倾向的消化系统疾病。胃溃疡是常见病、多发病之一。胃溃疡可以发生在任何年龄段，尤其好发于青壮年之间，由于其发病机制，目前尚不清楚，一般经药物治疗后，症状缓解或消失，但常反复发作，给患者身心健康带来了很大的危害。但目前的西医治疗，虽然溃疡愈合率较高，但是复发率高、副作用较多，中药治疗胃溃疡，不仅可以弥补西药治疗的不足，同时还具有整体调节的优势。九香虫（AspongopuschinensisDallas）属于蝽科动物，九香虫别名黑兜虫、瓜黑蝽、屁板虫、屁巴虫，收载于《中国药典》（2010年版），性味咸、温，归肝、脾、肾经，具有理气止痛、温中助阳之功。贵州、四川、湖北、湘西民间多用浸酒服壮阳，现代中医常用来治疗阳痿、尿频、遗精、胃痛、痛经等病症。未发现九香虫中提取的脂肪油作为胃溃疡治疗药物的用途，本发明在于提供治疗胃溃疡的一种新的手段或方法。九香虫的化学成分有蛋白质、脂肪油、甲壳质、维生素、微量元素、总磷脂、尿嘧啶、黄嘌呤、次黄嘌呤、黄酮类化合物等，其中含有44.3%粗蛋白质，由18种氨基酸组成，含量较多的是丝氨酸(20.40%和苏氨酸15.52%)；粗脂肪占53.0%，由豆蔻酸、十四碳－烯酸、软脂酸、软脂油酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、花生酸、二十二酸、芥酸、二十二碳－二烯酸、二十四酸等12种脂肪酸组成，6种不饱和脂肪酸含量占总油脂的57.1%。技术实现要素：本发明所要解决的技术问题是提供九香虫脂肪油提取物（即：九香虫中提取的脂肪油）的新用途，具体地，是九香虫脂肪油提取物在制备治疗胃溃疡药物中的用途。进一步地，超临界流CO2萃取法的操作步骤为中药九香虫粉末置于萃取釜中，仪器预热，调节压力和温度，稳定萃取，分离釜分离所得脂肪油。超临界CO2萃取条件为温度:萃取釜为45℃，分离柱为45℃，二解析为常温。压力:萃取釜为30MPa，分离柱为10MPa，二解析为6MPa。优选地，超临界CO2萃取中药九香虫脂肪油的最佳工艺条件为：温度45℃，压力30MPa，静态萃取10min，动态萃取1h。胃溃疡包括无水乙醇诱发的胃溃疡、大鼠应激性胃溃疡、幽门结扎型胃溃疡、醋酸涂抹型胃溃疡、消化性胃溃疡中的一种或多种。九香虫脂肪油提取物具有较强的镇痛和胃粘膜保护作用，用于治疗消化性胃溃疡时效果显著。本发明所要解决的另一技术问题是提供含有九香虫脂肪油提取物的药物组合物在制备治疗治疗胃溃疡的药物中的用途。该药物组合物含有有效量九香虫脂肪油提取物为活性成分，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而得的药剂。所述的辅料包括轻质氧化镁、淀粉、可溶性淀粉、大豆油、微晶纤维素、糊精、糖粉、矫味剂等药学上可接受的辅料。其中，药剂为口服制剂；进一步地，口服制剂为胶囊剂、软胶囊剂、丸剂、颗粒剂、片剂或口服液。优选口服制剂为胶囊剂。本发明药物组合物，每制剂单位含有九香虫中所提取的脂肪油0.01～0.5g,进一步地，每制剂单位含有九香虫中所提取的脂肪油0.05～0.1g。本发明所述制剂单位为口服制剂，所述口服制剂包括胶囊剂、软胶囊剂、丸剂、颗粒剂、片剂或口服液等，即每粒胶囊、每丸中含有九香虫中所提取的脂肪油0.01～0.5g。进一步地，所述口服制剂包括胶囊剂、软胶囊剂、丸剂、颗粒剂、片剂或口服液等，即每粒胶囊、每丸中含有九香虫中所提取的脂肪油0.05～0.1g。九香虫脂肪油提取物作为一种治疗胃溃疡的药物，同时还具有缓解疼痛和胃粘膜保护作用，是优于目前其他治疗胃溃炎的药物，且临床发现，中药治疗胃溃疡，不仅可以弥补西药治疗的不足，同时还具有整体调节的优势。解决了胃溃疡患者需要同时服用缓解疼痛和粘膜保护作用等多种药物的问题。显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其他多种形式的修改、替换和变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再做进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明的上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。附图说明图1醋酸涂抹型模型大鼠胃溃疡示例图；图2九香虫脂肪油低剂量组溃疡明显愈合。具体实施例实施例1本发明九香虫脂肪油提取物的制备方法药物与试剂：实验用九香虫购买于山西省太原市北京同仁堂药店（安徽盛海堂中药饮片有限公司，批号：20130201），经山西中医学院裴香萍副教授鉴定为昆虫纲半翅目蝽科九香虫(As-pongopusChinensisDallas)的干燥虫体。产地：湖北；生产加工地址:安徽盛海堂中药饮片有限公司；产品批号:20130701。无水乙醇为分析纯（天津市进丰化工有限公司，批号：20130102），石油醚为分析纯（沸程60℃～90℃，天津市柯密欧化学试剂有限公司，批号：20130323），CO2标准气（华元气体化工有限公司），空气（泰能气体化工有限公司）。仪器：高速多功能粉碎机（百炼BL-100型，浙江省永康市松青五金厂），电热恒温鼓风干燥箱（DHG-9075A型，上海－恒科技有限公司），JY/YP系列电子天平（6002，上海越平科学仪器有限公司），超临界CO2流体萃取仪（Polar，美国），数显恒温水浴锅（HH-2，江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司），超声仪（KQ3200E型，江苏省昆山市超声仪器有限公司），离心机（TDL-5型号，上海安亭科学仪器公司），气相色谱-质谱联用仪（美国Finnigan公司生产TＲACEGC-MS），氨基酸自动分析仪（日立835-50型）。九香虫脂肪油提取物样品的制备过程：超临界流体CO2萃取。九香虫粉末置于萃取釜中，仪器预热30min，调节压力和温度，稳定萃取，分离釜分离，所得即为九香虫脂肪油提取物。萃取压力30MPa，萃取温度45℃，静态萃取时间10min，动态萃取时间1h。在此条件下中药九香虫脂肪油的得率最高。实施例2本发明药物组合物的制备处方：九香虫脂肪油提取物50g、轻质氧化镁100g、淀粉150g制法：将九香虫提取物用轻质氧化镁混匀，再加入淀粉混匀，以90%乙醇为润湿剂，制备软材，通过14目筛制粒，干燥，整粒，填充胶囊，制成1000粒，即得。实施例3本发明药物组合物的制备处方：九香虫脂肪油提取物100g、大豆油300g制法：将九香虫提取物与大豆油混匀，备用；取明胶100份、甘油40份、水120份混合均匀，制备明胶液，备用；将药液与明胶液分别加入与压丸机的料槽中，压丸机转动并压制成胶丸，30-40℃下干燥20小时，制成1000粒，即得。实施例4本发明药物组合物的制备九香虫脂肪油提取物75g（1000粒胶囊）轻质氧化镁120g淀粉225g制法：将九香虫提取物用轻质氧化镁混匀，再加入淀粉混匀，以90%乙醇为润湿剂，制备软材，通过14目筛制粒，干燥，整粒，填充胶囊，制成1000粒，即得。实施例5本发明药物组合物的制备九香虫脂肪油提取物200g（1000粒胶囊）微晶纤维素5g淀粉200g制法：将九香虫脂肪油提取物与淀粉通过等量递增法混匀后，再与微晶纤维素混匀，制粒，装胶囊，即得胶囊剂。实施例6本发明药物组合物的制备九香虫脂肪油提取物10g（1000粒胶囊）轻质氧化镁50g淀粉150g制法：将九香虫脂肪油提取物用轻质氧化镁混匀，再加入淀粉混匀，以90%乙醇为润湿剂，制备软材，通过14目筛制粒，干燥，整粒，填充胶囊，制成1000粒，即得。实施例7本发明药物组合物的制备九香虫脂肪油提取物5g（1000片）淀粉80g微晶纤维素20g将九香虫脂肪油提取物与淀粉通过等量递增法混匀后，在与微晶纤维素混匀，制粒，压片，即得片剂。实施例8本发明药物组合物的制备九香虫脂肪油提取物500g（1000袋颗粒）糖粉400g糊精200g可溶性淀粉400g矫味剂1g将九香虫脂肪油提取物与糊精通过等量递增法混匀，再与其他辅料混匀，制粒即得。以下通过试验例具体说明本发明的有益效果。实验例1九香虫脂肪油提取物治疗胃溃疡和保护胃粘膜的实验一、材料与仪器西米替丁片：市售，0.1g×100片/瓶，批号：140507；甲醛溶液：天津市天力化学试剂有限公司出品，500ml/瓶，批号：20130808；乙醇（95％）：天津市科密欧化学试剂有限公司出品，500ml/瓶，批号：20140222；磷酸二氢钠：天津市科密欧化学试剂有限公司出品，500g/瓶，批号：20070111；磷酸氢二钠：天津市光复科技发展有限公司出品，500g/瓶，批号：20130105；氯化钠：天津市科密欧化学试剂有限公司出品，500g/瓶，批号：20100427；无水乙醚：洛阳市化学试剂厂出品，500ml/瓶，批号：130906；橄榄油：市售，1.6L/瓶，批号：20150226；SD大鼠，雌雄各半，体重为（200±20g)，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供。二、试验用药的配制阳性药的配制：将0.5355g的西米替丁用研钵研碎，然后加入150ml的蒸馏水，将溶液倒入烧杯中，用数码超声波清洗机使药物充分混匀，即得（0.00357g/ml）。不同浓度氨基酸提取物的配制：取预先制备好的九香虫氨基酸提取物20.625g，用100ml蒸馏水溶解，作为高浓度氨基酸提取物（0.210g/ml），用蒸馏水将高浓度氨基酸提取物稀释2倍，制备低浓度氨基酸提取物（0.105g/ml）。总氨基酸由九香虫药材脱脂后以蒸馏水回流提取制得，提取工艺为10倍溶剂加热回流提取1h，提取3次。不同浓度脂肪油提取物的配制：称取预先制备好的九香虫脂肪油提取物20.625g，用100ml橄榄油于水浴锅上加热溶解，制备高浓度的九香虫脂肪油提取物（0.210g/ml）。将高浓度脂肪油提取物稀释2倍制备低浓度脂肪油提取物（0.105g/ml），脂肪油由前述超临界流体萃取法制得。不同浓度九香虫水煎液提取物的配制：称取预先制备好的九香虫水煎液提取物20.625g，用100ml蒸馏水溶解，作为高浓度九香虫水煎液提取物（0.210g/ml）。将水煎液提取物稀释2倍制备低浓度水煎液提取物（0.105g/ml）。九香虫生药，加入蒸馏水，回流提取两次（每次30min），浓缩，抽滤，干燥即得九香虫水煎液提取物。10％甲醛缓冲溶液的配制：用量筒量取200ml甲醛溶液，并用1800ml蒸馏水稀释。随后向混合溶液中加入8gNaH2PO4和13gNa2HPO4，混合溶解。制备10%甲醛缓冲溶液。1％甲醛溶液的配制：将10%甲醛缓冲溶液稀释10倍，即得。三、药效对比1、九香虫脂肪油提取物对无水乙醇诱发胃溃疡的药理作用研究1.1实验方法：72只健康SD大鼠（180g～220g），雌雄各半，随机平均分为9组，每组8只。9组分别是空白组、模型组、阳性（西米替丁）组、九香虫氨基酸提取物高剂量组（以下简称为氨基酸高剂量组）、九香虫氨基酸提取物低剂量组（以下简称为氨基酸低剂量组）、九香虫脂肪油提取物高剂量组（以下简称为脂肪油高剂量组）、九香虫脂肪油提取物低剂量组（以下简称为脂肪油低剂量组）、九香虫水煎液提取物高剂量组（以下简称水煎液高剂量组）、九香虫水煎液提取物低剂量组（以下简称水煎液低剂量组）。大鼠适应饲养3天后，各组大鼠每天按100g体重给予1ml的药量灌胃，空白组和模型组大鼠灌胃等量的蒸馏水。连续灌胃4天。第4天灌胃结束后，将每组大鼠放入代谢笼中饲养，禁食不禁水24小时，24h后各组大鼠继续灌胃相应的药物。1小时后，除空白组外，各组大鼠按1ml/只的量灌胃无水乙醇制备大鼠胃溃疡模型。继续禁食1.5小时。1.5小时后采用眼静脉丛取血方法取血，脱颈处死大鼠，剪开大鼠腹腔，用结扎线结扎幽门，从贲门注入1％甲醛溶液10ml，结扎贲门，并放入1％甲醛溶液中固定10分钟，之后沿着胃大弯将胃剪开，并用生理盐水清洗胃壁内测，观察并记录溃疡指数。之后将胃放入10％甲醛溶液中固定，用于制作大鼠胃溃疡病理切片。溃疡指数用“分”来表示，瘀血点为1分，线状瘀血长度＜1mm者为2分，1～2mm者为3分，3～4mm者为4分，＞5mm者为5分。每只大鼠胃分数的总和为该鼠的溃疡指数。1.2实验结果：表1：九香虫不同提取物对大鼠溃疡指数的影响组别n溃疡指数(±SD）P值空白组80模型组856.63±12.37阳性组845.43±29.830.17九香虫氨基酸高剂量组844.50±22.910.11九香虫氨基酸低剂量组852.25±15.620.27九香虫脂肪油高剂量组825.50±17.080.0002**九香虫脂肪油低剂量组88.50±6.630.0003**九香虫水煎液高剂量组850.29±12.040.17九香虫水煎液低剂量组851.50±15.580.25实验结果表明，空白组大鼠的溃疡指数为0，与模型组相比具有显著性差异(P<0.01)。说明无水乙醇可以成功诱发胃溃疡。九香虫脂肪油高剂量组和低剂量组大鼠的溃疡指数与模型组相比，有显著性差异（P<0.01)，而氨基酸高、低剂量组和水煎液高、低剂量组与模型组相比无显著性差异（P>0.05），说明九香虫提取物中对无水乙醇致胃溃疡起主要治疗作用的成分是脂溶性成分。九香虫脂肪油提取物对酒精引起的胃粘膜损伤具有明显的保护作用。说明对于与胃粘膜损伤密切相关的急、慢性胃炎、胃溃疡等疾病来讲，九香虫脂肪油提取物是一个极具开发潜力的药物。它可直接用于相关疾病的防治以及相关药物或者保健食品的制备。2、九香虫脂肪油提取物对大鼠应激性胃溃疡的影响2.1实验方法将清洁级健康SD大鼠72只随机分为空白组，模型组，西咪替丁对照组，九香虫脂肪油高剂量组（0.2101g/ml），九香虫脂肪油低剂量组（0.1050g/ml），九香虫水煎液高剂量组（0.2101g/ml），九香虫水煎液低剂量组（0.1050g/ml），九香虫氨基酸高剂量组（0.2101g/ml），九香虫氨基酸低剂量组（0.1050g/ml），共九个组，每个组8只（雌雄各半），每天灌胃已准备好的药物一次，灌胃时间每天相同，连续给药5天。给药剂量体积按1ml/100g。本实验采用水浸-束缚法诱发大鼠胃溃疡。第四天给药后，将各组大鼠放入代谢笼中禁食24小时（不禁水，严格控制大鼠吃自己的粪便和饲料）。第五天实验前俩小时经口灌胃给药一次，俩小时后将实验大鼠用适量乙醚（防治过量致鼠死亡）麻醉后固定于鼠板浸入水中，液面与大鼠胸骨剑突保持水平，束缚7小时。其间要注意大鼠防止脱线掉入水中。整个过程水温保持在20摄氏度左右。七小时后，眼静脉丛取血，处死。迅速打开腹腔，暴露胃体，结扎贲门和幽门、剪断,取出全胃，用注射器以1％甲醛10m1注入胃内，再将胃浸入1％甲醛内固定10分钟，结束固定后，沿胃大弯将其剪开展平，可见局限于胃粘膜的点状或线状出血性损伤,记录损伤长度并打分。溃疡指数用“分”来表示，瘀血点为1分，线状瘀血长度＜1mm者为2分，1～2mm者为3分，3～4mm者为4分，＞5mm者为5分。每只大鼠胃分数的总和为该鼠的溃疡指数。数据都以均数±标准差表示（±SD），两组间计量资料比较采用t检验，多组间比较采用方差分析。当P＜0.05为差异有统计学意义。2.2实验结果表2：九香虫不同提取物对大鼠应激性胃溃疡溃疡指数的影响组别n溃疡指数（±SD）P值空白组80-模型组828.1211.22-阳性对照组812.3310.760.011*九香虫氨基酸高剂量组823.3811.200.205九香虫氨基酸低剂量组828.8813.810.453九香虫脂肪油高剂量组811.437.590.0029**九香虫脂肪油低剂量组87.836.790.0010**水煎液高剂量组832.8759.390.187水煎液低剂量组829.7512.560.394（与模型组相比，*P<0.05,**P<0.01）实验结果表明，与模型组相比，脂肪油高剂量组和脂肪油低剂量组大鼠的溃疡指数显著降低（P<0.01）。阳性药西米替丁组大鼠溃疡指数也降低（P<0.05）。而氨基酸高、低剂量组和水煎液高、低剂量组大鼠的溃疡指数与模型组相比变化不明显（P>0.05）。九香虫提取物中对应激性胃溃疡具有治疗作用的是九香虫脂肪油提取物，且九香虫脂肪油低剂量组的抗溃疡效果要优于九香虫脂肪油高剂量组。该研究还表明，九香虫脂肪油提取物对应急引起的胃粘膜损伤具有明显的保护作用。这对于与胃粘膜损伤密切相关的急、慢性胃炎、胃溃疡等疾病来讲，九香虫脂肪油提取物是一个极具开发潜力的药物。它可直接用于相关疾病的防治以及相关药物或者保健食品的制备。3、九香虫脂肪油提取物对幽门结扎型胃溃疡的影响3.1实验方法将72只SD大鼠随机分为9组，分别为阳性对照组（西米替丁组）、空白组、模型组、九香虫脂肪油、水煎液及氨基酸提取物的高、低剂量组，称重，给药3天后，禁食不禁水36小时，在禁食24小时、36小时分别给药，共给药5次后，称重，麻醉药为10%水合氯醛，按照每100g体重给予0.03g的剂量腹腔注射，待大鼠麻醉完全后，将大鼠腹部准备剪口的地方及周围的毛剪干净，大鼠仰面固定于玻璃板上，用浸泡在碘伏里的脱脂棉擦拭消毒，消毒完成后，用手术刀沿大鼠的腹中线剪开一个长约2cm左右的切口（切口尽量要小），用止血钳将外皮夹住，然后沿腹白线剪开内皮，伤口长约2cm左右，将大鼠的胃轻轻拽出，用医用丝线将幽门结扎，再把胃轻轻塞回到腹腔内，缝合，常规消毒。除空白组外（空白组只解剖缝合，不结扎幽门）。分笼饲养，继续禁食不禁水18小时后，通过眼眦取血，取5ml血液，之后将大鼠脱颈处死，解剖取胃，取胃时保持幽门结扎状态把幽门端剪断，然后将贲门端剪断，将胃取出，用灌胃针抽取适量1%甲醛溶液，通过贲门注射入胃里，结扎贲门，把胃按组别雌雄分别浸泡在不同的盛有1%甲醛溶液的烧杯中，浸泡10分钟，沿着胃大弯将胃剪开，用生理盐水清洗胃壁内测，观察并记录溃疡指数，观察后把胃浸泡在10%中型甲醛溶液中，做病理切片用。溃疡指数（UI)检测方法：溃疡指数用“分”来表示，瘀血点为一分，线状淤血长度＜1mm者为2分，1～2mm者为3分，3～4mm者为4分，＞5mm者5分。各鼠胃分数的总和为该鼠的溃疡指数。溃疡抑制百分率=(模型组UI－实验组UI)/模型组UI×100%统计学处理：所有资料均用±s表示。采用统计学软件进行组间t检验，P＜0.05有统计学意义。3.2实验结果3.2.1施术后观察大鼠苏醒后精神状态欠佳，活动减少，嗜卧，对外界刺激不敏感。数小时后开始进水，排尿正常。3.2.2九香虫提取物对大鼠幽门结扎型胃溃疡的影响表3：九香虫提取物对大鼠幽门结扎型胃溃疡的影响组别n溃疡指数溃疡抑制率（%）P值空白组80100-模型组823.00±4.89--阳性对照组813.00±4.19**43.470.004363469九香虫氨基酸高剂量组816.0±12.9830.430.249607298九香虫氨基酸低剂量组813.5015.0241.300.178577812九香虫脂肪油高剂量组810.33±5.49**54.220.001707684九香虫脂肪油低剂量组87.33±4.68**68.130.000207712九香虫水煎液高剂量组816.50±5.2628.260.586037724九香虫水煎液低剂量组819.75±7.0914.130.411983847注：同模型组相比，P*＜0.05,P**＜0.01实验结果表明，九香虫氨基酸高低剂量、脂肪油高低剂量、水煎液高低剂量及阳性药均能降低溃疡指数，其中，九香虫脂肪油高低剂量组及阳性对照组与模型组相比，有显著性差异（P＜0.01)，溃疡抑制率分别为54.22%、68.13%、43.47%，且九香虫脂肪油高低剂量组溃疡抑制率明显高于阳性组。九香虫氨基酸高低剂量组及九香虫水煎液高低剂量组与模型组相比，无显著性差异（P＞0.05）。该研究同时表明，九香虫脂肪油提取物对胃粘膜损伤具有明显的保护作用。说明对于与胃粘膜损伤密切相关的急、慢性胃炎、胃溃疡等疾病来讲，九香虫脂肪油提取物是一个极具开发潜力的药物。它可直接用于相关疾病的防治以及相关药物或者保健食品的制备。4、九香虫脂肪油提取物对大鼠醋酸涂抹型胃溃疡的影响4.1实验方法将48只雄性SD大鼠，随机分成空白组、模型组、阳性药西咪替丁组和九香虫脂肪油低剂量组，每组12只，用苦味酸标记。将大鼠禁食不禁水36小时，称重，造模时先取实验大鼠，10%水合氯醛按照每100g体重给予0.03g的比例对大鼠进行腹腔注射给药，待大鼠麻醉完全后，将其仰卧固定于玻璃板上，去毛，用医用酒精对其进行消毒，用手术刀从剑突下部轻轻沿腹白线打开长度约2cm的切口，打开腹腔。通过切口找到胃，将整个胃移出腹腔，观察胃部情况是否正常。模型组、阳性药西咪替丁组、九香虫脂肪油低剂量组分别用注射器吸取40%乙酸0.05ml将针头沿胃窦处进入，将40%乙酸注入至胃壁肌层与浆膜层之间，将胃放入腹腔，操作完成后覆盖网膜，空白组大鼠只开腹不注药。缝合，分别缝合腹膜、腹壁各层组织、皮肤，常规消毒。第二天晚上称重，将已配好的药物溶液按每100g体重给予1ml药的剂量灌胃。空白组和模型组均给予等量的蒸馏水。连续给药5天，且每天腹腔注射适量的青霉素钠，防止感染。给药5天后，将大鼠禁食不禁水12小时，处死，剖腹，结扎贲门和幽门、离断,取出全胃。胃内注射1%的甲醛溶液5ml，并全胃置于1%甲醛中浸泡10分钟后，沿胃大弯剪开，冲洗，滤纸吸干后铺开，以尺子测量溃疡最大长径，以及垂直于最大长径的最大宽径。计算溃疡指数=溃疡最大长径×最大宽径。并计算各给药组的溃疡治愈率，溃疡抑制百分率=（1-实验组溃疡指数/模型组溃疡指数)×100%。把观测后的胃置于10%的中性甲醛溶液中，做病理切片用。所有溃疡指数都以均值±标准差（±s）表示，采用统计学软件进行组间t检验，P<0.05有统计学意义。4.2实验结果4.2.1施术后观察大鼠苏醒后精神状态欠佳，活动减少，嗜卧，不能立即进食进水，对外界刺激反应不敏感，数小时后开始进食进水，排粪尿基本正常。4.2.2解胃后观察到明显的溃疡，如图1所示。4.2.3九香虫提脂肪取物对醋酸涂抹型大鼠胃溃疡的影响表4：九香虫脂肪油提取物溶液对醋酸涂抹型大鼠胃溃疡的影响（±s，%）组别n溃疡指数溃疡抑制率（%）空白组120模型组1266.20±22.63-阳性对照组1225.00±17.51**62.24%九香虫脂肪油低剂量组1243.22±19.21*34.71%注：与模型组比较，P*＜0.05，P**＜0.01。表4所示表明，九香虫脂肪油提取物和阳性药物西咪替丁对乙酸型胃溃疡均能减小胃溃疡面积具有治疗作用，溃疡抑制率分别为34.71%、62.24%，实验组与模型组比较具有统计学意义（P＜0.05）。从图2来看，九香虫脂肪油低剂量组大鼠的胃溃疡得到了明显愈合。另外，从图1和图2的对比来看，该研究还表明九香虫脂肪油提取物对胃粘膜损伤具有明显的保护作用。说明对于与胃粘膜损伤密切相关的急、慢性胃炎、胃溃疡等疾病来讲，九香虫脂肪油提取物是一个极具开发潜力的药物。它可直接用于相关疾病的防治以及相关药物或者保健食品的制备。实验例2九香虫脂肪油提取物具有镇痛作用的实验1、实验用药：不同浓度脂肪油提取物的配制：称取预先制备好的九香虫脂肪油提取物20.625g，用100ml橄榄油于水浴锅上加热溶解，制备高浓度的九香虫脂肪油提取物（0.210g/ml）。将高浓度脂肪油提取物稀释2倍制备低浓度脂肪油提取物（0.105g/ml），脂肪油由前述超临界流体萃取法制得。不同浓度九香虫水煎液提取物的配制：称取预先制备好的九香虫水煎液提取物20.625g，用100ml蒸馏水溶解，作为高浓度九香虫水煎液提取物（0.210g/ml）。将水煎液提取物稀释2倍制备低浓度水煎液提取物（0.105g/ml）。九香虫生药，加入蒸馏水，回流提取两次（每次30min），浓缩，抽滤，干燥即得九香虫水煎液提取物。不同浓度氨基酸提取物的配制：取预先制备好的九香虫氨基酸提取物20.625g，用100ml蒸馏水溶解，作为高浓度氨基酸提取物（0.210g/ml），用蒸馏水将高浓度氨基酸提取物稀释2倍，制备低浓度氨基酸提取物（0.105g/ml）。总氨基酸由九香虫药材脱脂后以蒸馏水回流提取制得，提取工艺为10倍溶剂加热回流提取1h，提取3次。阳性药：氨酚羟考酮片，市售，(5mg/325mg)*10片/盒，批号：0512W89432。2、仪器：分析天平（上海良平JA4003精密电子天平）；YP601N电子天平（600g/0.1g，上海舜宇恒平科学仪器有限公司)；RB-200智能热板仪（成都泰盟软件有限公司）；PL-S40康士洁牌数码超声波清洗机（深圳市宸韵佳贸易有限公司）。3、动物：昆明种小鼠150只（购自军事医学科学院，SCXK(京）2012-0004）雌性100只，雄性50只，体重（22±2）g，常规喂养7日。4、实验方法4.1镇痛实验（热板法)温控热板仪调节55±0.5℃，放入大烧杯固定。以小鼠放入后至舔后足之间的时间为痛觉反应时间。取雌性小鼠100只，对标记，称重，进行痛阈筛选，先测试小白鼠的痛觉反应时间，选取10s＜痛阈值＜30s的小鼠80只，跳跃者、＜10s、＞30s的都剔除。随机分为8组，每组10只，按表5所示剂量给药灌胃给药，连续6天。于末次给药后30min、60min、90min分别测定其痛阈值（若不舔后足超过60s者，潜伏时间按60s计）。表5：九香虫的不同提取部位对小鼠热板实验的影响（ｎ＝10，±ｓ)注：与空白对照组比较，*P<0.05。表5的实验结果表明，与空白组相比，给药后30min时九香虫脂肪油高剂量和九香虫脂肪油低剂量的痛阈值显著提高（P＜0.05)，给药后90min时九香虫脂肪油高剂量和九香虫脂肪油低剂量组痛阈值也显著提高（P＜0.05)。阳性药与空白组相比痛阈值也显著提高（P＜0.05)。该实验表明了九香虫脂肪油提取物具有明显的镇痛作用。4.2镇痛实验（醋酸扭体法）取雌性和雄性小鼠各40只，小鼠随机分为8组，每组10只，雌雄各半。按表6所示剂量给药后30min，按照每10g体重注射0.6％冰醋酸0.1ml的剂量向小鼠腹腔注射，观察注射冰醋酸后15min内各组小鼠出现的扭体反应次数。表6：九香虫的不同提取部位对醋酸致小鼠扭体反应的影响（n=10，±s）注：与空白对照组比较，*P<0.05。实验结果表明，九香虫提取物即脂肪酸高剂量组可明显减少醋酸所致小鼠的扭体反应次数，与空白组比较具有显著差异（P＜0.05），表明了九香虫脂肪油提取物起到了一定的镇痛作用。阳性药与空白组相比，也明显的减少了醋酸所致小鼠的扭体次数（P＜0.05）。九香虫脂肪油提取物作为一种治疗胃溃疡的药物，同时还具有缓解疼痛和胃粘膜保护作用，是优于目前其他治疗胃溃疡的药物，且临床发现，中药治疗胃溃疡，不仅可以弥补西药治疗的不足，同时还具有整体调节的优势。九香虫脂肪油提取物解决了胃溃疡患者需要同时服用缓解疼痛和粘膜保护作用等多种药物的问题。当前第1页1 2 3