本发明涉及中医药领域，具体涉及罗志藤植物的根和/或叶在制备抑制猪病毒性腹泻疾病药物中的应用。
背景技术：
猪肉是我国国民最主要肉食来源，我国猪肉生产量占全球总产量的一半以上，因此猪的养殖业在我国国民经济中占有举足轻重的地位。然而猪病毒性腹泻是猪的养殖业一直以来需要面对的重大问题，它可以使猪的出栏率严重下降并造成巨大的经济损失。目前我国猪群病毒性腹泻病原以猪流行腹泻病毒为主，猪轮状病毒、猪伪狂犬病毒和猪传染性胃肠炎病毒次之，并且多数以两种或者多种病原混合感染为主。染病猪群多会出现腹泻、呕吐、发热、脱水等症状，若处理不当，一周龄内仔猪极易在2-7天内迅速死亡，死亡率可达100％。成年猪的致死率则低于仔猪，但可能在康复后形成僵猪，仍然会对猪的养殖业造成较大的影响。自2010年以来，我国猪群发生了重大腹泻病症，这对我国的猪肉产出造成了严重的影响，而其中又以病毒性腹泻为主，这对我们防治猪病毒性腹泻提出了新要求，防治工作迫在眉睫。
目前对于猪病毒性腹泻的防治方法是以提高猪的生存环境为主，并辅以疫苗及严格隔离消毒，从而降低猪群的染病概率。而对于已染病猪群，一般采取抗生素抗病毒消炎及口服补液盐补液的方法，对于病重猪群，则采取肌肉注射或灌服等办法控制病情。但是这些方法无不存在着成本高昂及操作繁复的问题，并且抗生素的滥用对于环境及人体的影响很大。
目前也有一些采用中药防治猪病毒性腹泻的专利，如申请号为2015106677636的中国专利公开了了一种将黄连、金银花、黄芪、陈皮、白术、黄芩、马齿苋和甘草粉碎后发酵制成口服液的方法，但是这类方法加重了人类对于这些中药材的需求负担，同样存在成本高昂的问题，因此，开发新型的、对猪病毒性腹泻防治效果好、价格低廉、原材料易得、制备过程简单的中药，已成为我国猪养殖业的研究重点。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明提供了罗志藤植物的根和/或叶在防治猪病毒性腹泻中的应用。通过研究发现，该罗志藤制备物能够有效抑制猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒等引起的猪腹泻症状，减少猪病毒性腹泻的感染率，提高猪群对病毒性腹泻的抵抗力，从而可广泛应用于制备抗猪病毒性腹泻疾病药物。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了罗志藤植物的叶和/或根在防治猪病毒性腹泻药物制备中的应用。
罗志藤，白花菜科罗志藤属植物，广泛分布于东南亚和南亚，在我国广东、广西、西藏、海南、云南等地也有大量分布。其性寒，味微苦，具有清火凉血，补水润肺，止咳平喘的功效。罗志藤不光是一种药材，同时也可作为油料作物，成为生物质柴油的来源。相较于黄连、金银花、黄芪、陈皮、白术、黄芩、马齿苋和甘草，它的应用极为滞后，因此它的采集不会对传统中药材造成压力，其分布广泛而廉价易得，是一种潜力很大，亟待开发的植物资源。本发明通过研究，证明了罗志藤植物的根和/或叶能够有效抑制猪流行腹泻病毒、猪轮状病毒、猪伪狂犬病毒和猪传染性胃肠炎病毒等病毒，可有效防治猪病毒性腹泻，从而可广泛应用于制备猪病毒性腹泻药物。
在本发明提供的一些实施例中，致病病毒为猪流行性腹泻病毒。
在本发明提供的另一些实施例中，致病病毒为猪传染性胃肠炎病毒。
作为优选，猪群为仔猪，公猪成猪和母猪成猪。
本发明还提供了一种防治水产动物细菌性疾病的罗志藤制备物，该罗志藤制备物由罗志藤植物的根和/或叶制得。
在本发明提供的一些实施例中，该罗志藤制备物的制备方法为：取罗志藤植物的根和/或叶，经粉碎、醇提，即得。
在本发明提供的一些实施例中，醇提具体为：取粉碎后的罗志藤植物的根和/或叶与乙醇水溶液混合，加热回流，过滤，浓缩。
在本发明提供的一些实施例中，醇提过程中，罗志藤植物的根和/或叶与乙醇水溶液的质量比为1:(3～10)。
在本发明提供的一些实施例中，乙醇水溶液的体积百分含量为40％～95％。
作为优选，乙醇水溶液的体积百分含量为60％。
作为优选，醇提的次数为2次。
作为优选，每次醇提的时间为30～60min。
在本发明提供的一些实施例中，醇提过程中浓缩的倍数为3倍。
在本发明提供的另一些实施例中，该罗志藤制备物的制备方法为：取罗志藤植物的根和/或叶，经粉碎、水煎，即得。
在本发明提供的一些实施例中，水煎具体为：取粉碎后的罗志藤植物的根和/或叶与水混合，煎煮，过滤，浓缩。
在本发明提供的一些实施例中，水煎过程中，罗志藤植物的根和/或叶与水的质量比为1:(3～10)。
作为优选，水煎的次数为2次。
作为优选，每次水煎的时间为30～60min。
在本发明提供的一些实施例中，水煎过程中浓缩的倍数为3倍。
在本发明提供的另一些实施例中，该罗志藤制备物的制备方法为：取罗志藤植物的根和/或叶，经粉碎，即得。
为了保证罗志藤制备物药效的充分发挥，作为优选，粉碎的粒径为20～40目。
本发明提供的罗志藤制备物可直接加入猪饲料或者兽药中进行喂食，用于防治猪病毒性腹泻。
本发明提供了罗志藤植物的根和/或叶在制备抑菌剂或防治猪病毒性腹泻药物中的应用。本发明提供的防治猪病毒性腹泻的罗志藤制备物由罗志藤植物的根和/或叶制得。通过抗病毒活性试验的研究发现，本发明提供的罗志藤制备物均对引起猪病毒性腹泻的猪流行性腹泻病毒或猪传染性胃肠炎病毒表现出明显的抑制作用，与阳性对照药物的抗病毒活性相当，表明本发明提供的罗志藤制备物具有明显的抗病毒活性；通过罗志藤制备物在养殖厂的猪群中抗病毒试验的研究发现，本发明提供的罗志藤制备物对染病猪群的抗病毒效果优于现有产品，或与现有产品的相当，表明本发明提供的罗志藤制备物能够有效地抑制病毒，避免引发腹泻症状，为养殖场的猪群生长提供良好的饲养环境；通过罗志藤制备物对养殖场的猪群成活率影响的研究发现，施用本发明提供的罗志藤制备物后，猪群的死亡率极大地减少了，且效果优于阳性对照组，表明本发明提供的罗志藤制备物可提高猪群成活率。由此可见，该罗志藤制备物能够有效抑制猪流行性腹泻病毒或猪传染性胃肠炎病毒等病毒，可有效防治猪群病毒性腹泻，从而可广泛应用于制备猪病毒性腹泻疾病药物。
具体实施方式
本发明公开了罗志藤植物的根和/或叶在制备防治猪病毒性腹泻疾病药物中的应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
本发明提供的罗志藤植物的根和/或叶在制备抗病毒药剂或防治猪病毒性腹泻疾病药物中的应用中所用罗志藤植物的根和/或叶可由市场购得或采集得到，其分布广泛，来源充足。
下面结合实施例，进一步阐述本发明：
实施例1罗志藤制备物的制备
称取干燥的罗志藤根120g，粉碎后加入1200g体积分数为40％的乙醇加热回流提取2次，每次1h，醇提后过滤，滤液浓缩至浸膏，即得。
实施例2罗志藤制备物的制备
称取干燥的罗志藤叶130g，粉碎后加入700g体积分数为95％的乙醇加热回流提取2次，每次30min，醇提后过滤，滤液浓缩至浸膏，即得。
实施例3罗志藤制备物的制备
称取干燥的罗志藤根200g粉碎后加入600g体积分数为50％的乙醇加热回流提取2次，每次40min，醇提后过滤，滤液浓缩至浸膏，即得。
实施例4罗志藤制备物的制备
称取干燥的罗志藤根120g，粉碎后加入1200mL水煎煮2次，每次30min，水煎后过滤，滤液浓缩至浸膏，即得。
实施例5罗志藤制备物的制备
称取罗志藤叶160g，粉碎后加入900mL水煎煮2次，每次50min，水煎后过滤，滤液浓缩至浸膏，即得。
实施例6罗志藤制备物的制备
称取干燥的罗志藤根200g，粉碎后加入600mL水煎煮2次，每次60min，水煎后过滤，滤液浓缩至浸膏，即得。
实施例7罗志藤制备物的制备
取干燥的罗志藤根，粉碎至20目，即得。
实施例8罗志藤制备物的制备
取干燥的罗志藤叶，粉碎至40目，即得。
实施例9抗病毒活性试验
试验病毒：引起猪病毒性腹泻的猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒。
试验细胞：永生化猪小肠上皮细胞ZYM-SIEC02。
试验分组：试验分为对照组和试验组，对照组分为两组，为猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒，分别施用市售中草药制剂维迪康；试验组分别施用实施例1至8提供的罗志藤制备物。
永生化猪小肠上皮细胞系(ZYM-SIEC02)，使用培养基为RPMI-1640培养基，配置完毕后需加入100mL/L的牛血清，并调节pH为中性。使用细胞维持液为不加牛血清的中性RPMI-1640培养基。将细胞置于37℃，5％CO2的培养箱中培养，随后取适量接种于96孔板后培养24h生长为单层，吸弃培养液。取罗志滕制备物用细胞维持液稀释为200μg/mL，在各孔分别加入50μL，随即将50μL病毒悬液分别加入相应的培养孔。每块孔板同时设阳性药物对照组(加入200μg/mL的维迪康稀释液50μL)。轻摇混匀后置于CO2培养箱中37℃培养24h，随后在酶标仪上测OD值，并计算半数细胞死亡所需浓度(IC50),依此数值大小表示抗病毒活性。实验结果如表1所示：
表1抗病毒活性检测结果
由表1的试验数据可知，本发明实施例1至8提供的罗志藤制备物对引起猪病毒性腹泻的猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒有较强的抑制作用，与阳性对照药物的抗病毒活性相当。
实施例10罗志藤制备物在养殖厂仔猪群中的猪病毒性腹泻治疗效果试验
对养殖厂330头发病仔猪随机分为10组，每组均在饥饿一顿后按常规量减半喂食饲料，并按每公斤体重10ml进行注射补盐(补盐液为0.4％NaCl、0.4％KCl和0.3％NaHCO3)。其中空白对照组不再进行任何处理，阳性药物对照组采用市售的中成药维迪康，口服量分别为每公斤体重50mg。试验组施用本发明实施例1至8提供的罗志藤制备物，口服量同样分别为每公斤体重50mg。7天后观察一次仔猪的健康状况，如果水样腹泻停止，粪便褐色或黑色，能成堆，食欲正常，则为治愈，上述有一项恢复者则为有效，如果症状没有缓解甚至死亡，则为无效。试验结果如表2所示：
表2仔猪群中猪病毒性腹泻治疗效果试验检测结果
由表2的试验数据可知，本发明提供的罗志藤制备物对养殖厂的仔猪的猪病毒性腹泻有较好的治疗效果，同市售维迪康相比，其治愈率相当，有效率则明显更高，说明本发明所提供的罗志腾制备物在仔猪中的抗病毒效果要优于现有产品的效果，可更有效地抑制病毒活性，提高仔猪的生存率，为养猪场提供良好的饲养环境。
实施例11罗志藤制备物在养殖厂公猪成猪群中的猪病毒性腹泻治疗效果试验
对养殖厂400头发病公猪成猪随机分为10组，每组均在饥饿一顿后按常规量减半喂食饲料，并按每公斤体重10mL进行注射补盐(补盐液为0.4％NaCl、0.4％KCl和0.3％NaHCO3)。其中空白对照组不再进行任何处理，阳性药物对照组采用市售的中成药维迪康，口服量分别为每公斤体重50mg。试验组施用本发明实施例1至8提供的罗志藤制备物，口服量为每公斤体重50mg。7天后观察一次公猪成猪的健康状况，如果水样腹泻停止，粪便褐色或黑色，能成堆，食欲正常，则为治愈，上述有一项恢复者则为有效，如果症状没有缓解甚至死亡，则为无效。试验结果如表2所示：
表2公猪成猪群中猪病毒性腹泻治疗效果试验检测结果
由表2的试验数据可知，空白对照组由于未施药，公猪成猪治愈率为零，；而试验组和阳性对照组在施药后，公猪成猪的治愈率和有效率极大地增加了，且试验组的公猪成猪的无效率整体低于阳性对照组，这表明试验组的药效要好于阳性对照组的药效，说明本发明提供的罗志藤制备物可提高公猪成猪的治愈率和有效率。
实施例12罗志藤制备物在养殖厂母猪成猪群中的猪病毒性腹泻治疗效果试验
对养殖厂350头发病母猪成猪随机分为10组，每组均在饥饿一顿后按常规量减半喂食饲料，并按每公斤体重10ml进行注射补盐(补盐液为0.4％NaCl、0.4％KCl和0.3％NaHCO3)。其中空白对照组不再进行任何处理，阳性药物对照组采用和市售的中成药维迪康，口服量为每公斤体重50mg。试验组施用和本发明实施例1至8提供的罗志藤制备物，口服量为每公斤体重50mg。7天后观察一次母猪成猪的健康状况，如果水样腹泻停止，粪便褐色或黑色，能成堆，食欲正常，则为治愈，上述有一项恢复者则为有效，如果症状没有缓解甚至死亡，则为无效。试验结果如表3所示：
表3母猪成猪群中猪病毒性腹泻治疗效果试验检测结果
由表3的试验数据可知，空白对照组由于未施药，母猪成猪仅有一例症状缓解；试验组和阳性对照组由于施药后，母猪成猪的治愈率和有效率极大地增加了，且试验组的治愈率和有效率要优于阳性对照组。结果表明本发明提供的罗志藤制备物可提高母猪成猪的治愈率和有效率。