犬用干细胞分泌因子注射剂的制作方法

文档序号:12336842阅读:来源:国知局

技术特征:

1.犬用干细胞分泌因子注射剂,其特征在于其注射剂中含有犬干细胞分泌因子原液,该原液由A液和B液按3:1的体积比混合而成;其中,A液为犬干细胞裂解液,B液为犬MSCs和HSCs无血清培养上清液融化、混合、低温分离、超滤和浓缩后形成。

2.如权利要求1所述的犬用干细胞分泌因子注射剂,其特征在于犬干细胞分泌因子原液中,按质量,加入原液0.5%-1%的甘氨酸,0.2%-0.5%的黄芪多糖,0.3%-0.6%的香菇多糖。

3.如权利要求1所述的犬用干细胞分泌因子注射剂,其特征在于按质量,加入原液0.15%-0.2%的甲钴胺,0.3-0.5%的维生素B1,0.05-0.1%的维生素B12。

4.如权利要求1所述的犬用干细胞分泌因子注射剂,其特征在于犬干细胞分泌因子注射剂是注射液或是注射用冻干粉。

5.如权利要求1或4所述的犬用干细胞分泌因子注射剂,其特征在于所述的犬干细胞分泌因子注射用冻干粉是用真空冷冻干燥机经真空浓缩、喷雾干燥,得到犬干细胞分泌因子冻干粉。

6.如权利要求1所述的犬用干细胞分泌因子注射剂,其特征在于该犬干细胞分泌因子原液是通过以下的步骤制备而得:

(1)犬干细胞裂解液的制备:将体外培养获得的MSCs和HSCs混合密封于冻存管中,经超低温液氮反复冻融至细胞破碎,再经中空纤维超滤柱超滤,再用滤膜过滤,使其无菌,测定蛋白浓度,调整浓度为0.5mg/ml,标记为A液;

(2)将收集后的犬MSCs和HSCs无血清培养上清液融化、混合、低温分离、超滤和浓缩;利用超滤膜过滤浓缩,再经中空纤维超滤柱超滤,将超滤后的液体进行浓缩,用滤膜过滤,使其无菌,测定蛋白浓度,定浓度为0.5mg/ml,4℃保存,标记为B液;

(3)将上述A液和B液按3:1的体积比混合,得到犬干细胞分泌因子原液。

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