血小板生成素受体激动剂在促进造血干细胞归巢中的用图
【专利说明】血小板生成素受体激动剂在促进造血干细胞归巢中的用途
[0001 ]优先权信息
[0002]本申请请求2015年08月07日向中国国家知识产权局提交的、专利申请号为201510483901.5的专利申请的优先权和权益，并且通过参照将其全文并入此处。
技术领域
[0003]本发明涉及生物制药领域，具体地，涉及血小板生成素受体激动剂在促进造血干细胞归巢中的用途。
【背景技术】
[0004]造血干细胞(Hematopoietic stem cells，HSC)移植已经成为临床上治疗多种恶性血液病、免疫缺陷性疾病等的重要手段之一。造血干细胞移植后，经血液循环归巢于受体造血微环境，进行增殖、分化，重建受者的造血和免疫系统，从而达到治疗的目的。造血干细胞在受者体内长期植入，受到多种因素的影响，其中造血干细胞归巢于骨髓的效率是一个重要的影响因素。在移植细胞后的24小时内，通过有效的促归巢药物的作用来达到增加归巢的造血干细胞数量的目的，对于改善造血干细胞的植入效率具有重要意义。
[0005]然而，目前临床上尚没有应用于造血干细胞移植术后促进造血干细胞归巢的药物，用于该领域的药物有待进一步研究。
【发明内容】
[0006]本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出血小板生成素受体激动剂用于制备造血干细胞移植术中促进造血干细胞归巢药物中的用途。
[0007]需要说明的是，本发明是基于发明人的下列工作而完成的:
[0008]重组人促血小板生成素(rhTPO)在临床上用于化疗后所致的血小板减少症、特发性血小板减少性紫癜和造血干细胞移植后血小板重建。血小板生成素作用靶点是细胞表面的c-MPL受体。造血干细胞及巨核细胞表面表达c-MPL。血小板生成素与受体结合，激活了下游信号通路，调节了造血干细胞及巨核细胞的扩增及分化等生物学行为。
[0009]基于人重组血小板生成素可以安全、有效地应用于异基因造血干细胞移植术后血小板减少症的临床治疗，发明人进一步研究发现血小板生成素及血小板生成素受体(c-MPL)激动剂对造血干细胞的归巢均有重要作用，能明显增加造血干细胞归巢至骨髓的数量，进而促进造血干细胞的植入，提高造血干细胞的移植成功率。
[0010]并且，发明人通过一系列研究发现，艾曲波帕通过下调小鼠体内mmp-9基因的表达，降低MMP9蛋白分泌，抑制SDF-la降解，通过扰乱SDF_la/CXCR4功能轴调节造血干/祖细胞归巢。而传统的促血小板生成素研究认为，ΤΡ0受体(c-Mpl)的激活可以通过Jak/STAT、PI3K/AKT、Ras/MAPK等信号通路调节造血干细胞向髓系祖细胞—巨核系祖细胞—血小板分化。显然，ΤΡ0受体激动剂的两种作用，在调控机制上有着本质区别。进而，根据本发明的一个方面，本发明提供了血小板生成素受体激动剂在制备药物中的用途，所述药物促进造血干细胞归巢。
[0011 ]发明人惊奇的发现，应用血小板生成素受体激动剂制备的药物，可以在造血干细胞移植术中促进造血干细胞的归巢，增加归巢的造血干细胞的数量，提高造血干细胞归巢效率，进而改善骨髓造血干细胞的移植成功率。
[0012]根据本发明的实施例，所述血小板生成素受体激动剂为选自艾曲波帕、罗米司亭、AKR-501、AS1070542、MA01G4G344和VB22Bsc(Fv)2中的至少一种，优选艾曲波帕(SB-497115;eltr0mb0pag)。由此，利用所述药物能够显著提高造血干细胞归巢效率。
[0013]根据本发明的另一方面，本发明提供了一种用于促进造血干细胞归巢的药物。根据本发明实施例，该药物包含血小板生成素受体激动剂。
[0014]发明人惊奇的发现，该药物可以在造血干细胞移植术中促进造血干细胞的归巢，增加归巢的造血干细胞的数量，提高造血干细胞归巢效率，进而提高骨髓造血干细胞的移植成功率。
[0015]根据本发明的实施例，所述血小板生成素受体激动剂为选自艾曲波帕、罗米司亭、AKR-501、AS1070542、MA01G4G344和VB22Bsc(Fv)2中的至少一种，优选艾曲波帕。由此，在造血干细胞移植术中利用所述药物，能够显著提高造血干细胞归巢效率。根据本发明实施例，所述药物为选自注射剂、颗粒剂、片剂和胶囊剂的至少一种，优选注射剂。
[0016]根据本发明实施例，所述药物采用生理盐水或者PBS进行稀释。
[0017]根据本发明实施例，所述药物在清髓照射前24小时至骨髓移植后24小时内进行给药。根据本发明的一些具体示例，所述药物在清髓照射前24小时至骨髓移植后4小时内进行给药。由此，药物促进造血干细胞归巢的效果好，进而促进造血干细胞的早期植入。
[0018]根据本发明实施例，所述药物的给药途径为选自皮下注射、肌肉注射、静脉注射和口服灌胃的至少一种。根据本发明的一些具体示例，优选口服灌胃给药。由此，药物的吸收效果好。
[0019]根据本发明实施例，所述药物的给药剂量为10-400mg/kg。由此，药物的疗效好。
[0020]本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。
【附图说明】
[0021]本发明的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中:
[0022]图1显示了根据本发明一个实施例，利用流式细胞术检测供者小鼠造血干细胞(⑶45.1/LSK)在受者体内归巢比例的示意图；
[0023]图2和图3显示了根据本发明一个实施例，利用集落培养的方法检测供者小鼠造血干细胞在受者体内的归巢数量的示意图。
【具体实施方式】
[0024]下面详细描述本发明的实施例，所述实施例的示例在附图中示出。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
[0025]根据本发明的一个方面，本发明提供了血小板生成素受体激动剂在制备药物中的用途，所述药物促进造血干细胞归巢。
[0026]发明人惊奇的发现，应用血小板生成素受体激动剂制备的药物，可以在造血干细胞移植术中促进造血干细胞的归巢，增加归巢的造血干细胞的数量，提高造血干细胞归巢效率，进而改善骨髓造血干细胞的移植成功率。
[0027]根据本发明的实施例，所述血小板生成素受体激动剂的种类不受特别限制，例如艾曲波帕、罗米司亭(Romiplostim)、AKR-501、AS1070542、MA01G4G344、VB22Bsc(Fv)2等，只要其具备血小板生成素受体激动剂功能，能够有效激活血小板生成素受体即可。根据本发明的一些具体示例，优选地，所述血小板生成素受体激动剂为艾曲波帕。由此，利用所述药物能够显著提高造血干细胞归巢效率。
[0028]根据本发明的另一方面，本发明提供了一种用于促进造血干细胞归巢的药物。根据本发明实施例，该药物包含血小板生成素受体激动剂。
[0029]发明人惊奇的发现，该药物可以在造血干细胞移植术中促进造血干细胞的归巢，增加归巢的造血干细胞的数量，提高造血干细胞归巢效率，进而提高骨髓造血干细胞的移植成功率。
[0030]如前所述，血小板生成素受体激动剂的种类不受特别限制。根据本发明的一些实施例，所述血小板生成素受体激动剂为选自艾曲波帕、罗米司亭、AKR-50UAS1070542、MA01G4G344和VB22Bsc(Fv)2中的至少一种，优选艾曲波帕(Eltrompobag)。由此，在造血干细胞移植术中利用所述药物，能够显著提高造血干细胞归巢效率。根据本发明实施例，所述药物为选自注射剂、颗粒剂、片剂和胶囊剂的至少一种，优选注射剂。
[0031]根据本发明实施例，所述药物采用生理盐水或者PBS(即磷酸盐缓冲液，pH= 7.4)进行稀释。
[0032]根据本发明实施例，所述药物在清髓照射前24小时至骨髓移植后24小时内进行给药。根据本发明的一些具体示例，所述药物在清髓照射前24小时至骨髓移植后4小时内进行给药。由此，药物促进造血干细胞归巢的效果好，能够有效提高药物疗效。
[0033]根据本发明实施例，所述药物的给药途径不受特别限制，例如可以通过静脉注射给药、肌肉注射给药、静脉注射给药或口服灌胃给药。根据本发明的一些具体示例，优选通过口服灌胃给药。由此，药物的吸收效果好。
[0034]根据本发明实施例，所述药物安全有效给药剂量范围可达10-400mg/kg，可以根据用药需求及治疗个体差异，依据临床经验进行适当调整。根据本发明的具体示例，对于6-8周龄，20g体重，雄性C57BL/45.1品系小鼠，在进行Co6()射线照射，剂量9.5Gy，照射20-22小时后，所述药物的给药剂量为100mg/kg。由此，药物的疗效好。
[0035]根据本发明实施例，所述药物可以单次或多次给药，可以根据用药需求及治疗个体差异，依据临床经验进行适当调整。根据本发明具体示例，对于6-8周龄，20g体重，雄性C57BL/45.1品系小鼠，在进行Co6()射线照射，剂量9.5Gy，照射20-22小时后，可以基于确定的给药剂量通过单次给药或两次给药。由此，药物的疗效好。
[0036]下面将结合实施例对本发明的方案进行解释。本领域技术人员将会理解，下面的实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
[0037]实施例1
[0038]按照以下步骤，检测血小板生成素受体激动剂艾曲波帕对骨髓细胞移植后造血干细胞归巢的影响:
[0039]1、分离小鼠骨髓细胞