本发明涉及一种银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂及其制备方法，属于制剂学领域。
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：银杏叶为银杏科植物银杏的叶。银杏叶性味甘苦涩平，有益心敛肺、化湿止泻等功效。《中药志》记载它能“敛肺气，平喘咳，止带浊”。《中国药典2010版》记载银杏叶功能主治为：活血化瘀，通络止痛，敛肺平喘，化浊降脂，用于瘀血阻络，胸痹心痛，中风偏瘫，肺虚咳喘，高脂血症。据现代药理研究，银杏叶对人体和动物体的作用较为广泛，如改善心血管及周围血管循环功能，对心肌缺血有改善作用，具有促进记忆力、改善脑功能的作用。此外，还能降低血黏度、清除自由基。以银杏叶为原料，采用适当的溶剂提取的银杏叶提取物，是发挥银杏叶药用价值的主要形式。目前，银杏叶提取物可作为银杏叶胶囊、片剂、胶丸、滴丸、口服液、水针等产品。传统的银杏叶提取物口服制剂主要通过胃肠道吸收，起效慢，生物利用率低，对于心肌梗塞、脑血管痉挛等发病紧急的病症来说有一定的滞后性。雾化吸入疗法是呼吸系统相关疾病的重要治疗手段。作为一种疗法，中药雾化吸入在临床上已经比较广泛的应用，与口服、肌肉注射和静脉给药等方式相比，雾化吸入疗法因药物直接作用于靶器官，具有起效迅速、疗效佳、全身不良反应少、不需要患者刻意配合等优势，被国内外广泛应用。但目前所有临床应用中没有专门的雾化吸入溶液剂型，也没有规范的使用方法，在使用方面存在安全隐患。技术实现要素：本发明主要解决的技术问题是提供一种安全、有效、质量优异的银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂；本发明还提供了该制剂的制备方法，该制备方法简单易操作，利于工业化生产；且采用本发明的制备方法提取的银杏叶提取物中活性成分含量高。本发明目的之一在于提供一种银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂，技术方案如下：一种银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂，所述雾化吸入用溶液包括：有效成分、等渗剂及溶剂；其中，所述有效成分为银杏科植物银杏叶的提取物；在每升所述雾化吸入用溶液中，包括：由不少于150g(比如150～1000g、180～800g、200～600g、300～400g、240g、280g、320g、350g、390g、400g、450g、490g、550g、580g)银杏叶制得的所述有效成分。在上述银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂中，作为一种优选实施方式，在每升所述雾化吸入用溶液中，包括：由180～800g银杏叶制得的所述有效成分。在上述银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂中，作为一种更优选的实施方式，在每升所述雾化吸入用溶液中，包括：由300～400g银杏叶制得的所述有效成分。在上述银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂中，作为一种更优选的实施方式，所述等渗剂为无机盐类等渗剂或糖类等渗剂；优选地，所述无机盐类等渗剂为氯化钠、氯化镁、氯化钙中的一种或多种，更优选地，所述无机盐类等渗剂为氯化钠；优选地，所述糖类等渗剂为葡萄糖、果糖、甘露醇中的一种或多种，更优选地，所述糖类等渗剂为葡萄糖或甘露醇中的一种或两种。在上述银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂中，作为一种优选实施方式，在每升所述雾化吸入用溶液中，所述无机盐类等渗剂的质量为1-15g(比如1.5g、2g、3g、4g、5g、6g、7g、8g、9g、10g、11g、12g、13g、14g、14.5g)，优选为2-10g。采用无机盐类等渗剂形成的银杏叶提取物雾化吸入用溶液，不仅利于普通患者的使用，更有利于糖尿病患者的使用，使用范围较广。在上述银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂中，作为一种优选实施方式，在每升所述雾化吸入用溶液中，所述糖类等渗剂的质量为20-100g(比如25g、30g、40g、50g、60g、70g、80g、90g、95g)，优选为20-80g。作为一种优选实施方式，等渗剂不仅能够调节银杏叶提取物雾化吸入用溶液的等渗压，还可以使银杏叶提取物雾化吸入用溶液更易于形成气溶胶。在上述银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂中，作为一种优选实施方式，所述雾化吸入用溶液还包括增溶剂。在上述银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂中，作为一种优选实施方式，所述增溶剂的用量为所述银杏叶质量的0.1～5％(比如0.12％、0.5％、0.8％、1.0％、1.5％、2.0％、2.6％、3.0％、3.5％、4.0％、4.5％、4.8％)，优选为0.5～3％；优选地，所述增溶剂选自吐温-80、聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯、泊洛沙姆、聚乙二醇、β-环糊精和羟丙基-β-环糊精中的一种或多种。在上述银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂中，作为一种优选实施方式，所述银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂具有200～500mosmol/kg(比如220mosmol/kg、260mosmol/kg、280mosmol/kg、290mosmol/kg、300mosmol/kg、305mosmol/kg、310mosmol/kg、350mosmol/kg、400mosmol/kg、450mosmol/kg、490mosmol/kg)的重量克分子渗透浓度；优选为240～450mosmol/kg。在上述银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂中，作为一种优选实施方式，所述溶剂为纯化水或注射用水，优选为注射用水。在上述银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂中，作为一种优选实施方式，所述雾化吸入用溶液的ph值为3.0-8.5(比如3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0)；优选地，所述雾化吸入用溶液的ph值为4.0-7.0。将雾化吸入用溶液的ph值调节至一定的范围内，一方面减少其对黏膜的刺激作用，另一方面可以提高雾化吸入用溶液形成气溶胶的能力。在本发明中，将所得雾化吸入溶液制剂，用超声雾化器或者空气压缩式雾化器，使银杏叶提取物雾化吸入用溶液以雾化形式直接吸入呼吸系统，直接作用于病灶部位，起效快，更安全有效。本发明的目的之二提供了一种上述银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂的制备方法，所述方法依次包括如下步骤：步骤一，将银杏叶经机械粉粹，得到银杏叶粉碎物；步骤二，向步骤一的所述银杏叶粉碎物中加入溶剂，进行n次提取，n为大于等于1的自然数，n优选为1或2或3，每次提取后进行过滤，得到n份滤液，合并n份滤液并浓缩，得到银杏叶浓缩膏；步骤三，向所述步骤二的银杏叶浓缩膏中加入水，搅拌均匀后静置12～24h，滤过，得到银杏叶上柱液；步骤四，所述步骤三的银杏叶上柱液采用大孔树脂柱进行纯化，得到银杏叶纯化液；所述银杏叶纯化液浓缩后得到银杏叶纯化膏；步骤五，将所述步骤四的银杏叶纯化膏进行脱色处理后，过滤收集滤液，并将所述滤液静置后再经过滤、超滤，得到银杏叶脱色溶液；步骤六，向所述步骤五中的所述银杏叶脱色溶液中加入溶剂、等渗剂和/或增溶剂，再加入ph值调节剂调节ph值，然后经过滤得到滤液，所述滤液经灌封、灭菌得到所述银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂。在上述制备方法中，作为一种优选实施方式，在所述步骤二中，所述溶剂为50～90wt％(比如55wt％、65wt％、70wt％、80wt％、85wt％)乙醇水溶液，优选为60～80wt％乙醇水溶液；优选地，所述每次提取的溶剂用量为所述银杏叶粉碎物体积的的6～12倍(比如7倍、8倍、9倍、10倍、11倍)，优选为8～10倍；更优选地，第n-1次提取的溶剂用量小于所述第n次提取的溶剂用量。在上述制备方法中，作为一种优选实施方式，在所述步骤二中，所述每次提取温度为60～100℃(比如65℃、70℃、80℃、90℃、95℃)，提取时间为1～4h。在上述制备方法中，作为一种优选实施方式，在所述步骤三中，所述水的加入量为所述银杏叶浓缩膏体积的1～2倍(比如1.1倍、1.2倍、1.3倍、1.4倍、1.5倍、1.6倍、1.7倍、1.8倍、1.9倍)。在上述制备方法中，作为一种优选实施方式，在所述步骤四中，所述纯化的洗脱液为20wt％-40wt％乙醇水溶液。在上述制备方法中，作为一种优选实施方式，在所述步骤五中，所述脱色处理为：向所述银杏叶纯化膏加水，再加入活性炭，煮沸30min，放冷过滤，得到滤液；优选地，所述活性炭的质量为所述银杏叶纯化膏质量的0.1～0.8％(比如0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％)。在上述制备方法中，作为一种优选实施方式，在所述步骤六中，所述ph值调节剂为常用无机酸或无机碱；所述无机酸优选盐酸、枸橼酸、马来酸、酒石酸、碳酸氢钠、磷酸氢钠、磷酸二氢钠、枸橼酸钠、醋酸、乳酸中的一种或多种；所述无机碱优选为氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠中的一种或多种。临床前药理实验表明，银杏叶提取物具有抗氧化性，可清除自由基，抑制细胞膜脂质过氧化反应，降低过氧化脂质产生，提高sod活性。再者，本发明还提供了一种上述银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂在制备治疗肺部疾病的药物中的应用。本发明所述肺部疾病包括但不限于慢性支气管炎、肺气肿、慢性阻塞性肺疾病、支气管扩张症、呼吸衰竭等疾病。与现有技术相比，本发明具有如下技术效果：1、本发明提供的银杏叶提取物雾化吸入用溶液，通过雾化器可以快速形成气溶胶，形成的气溶胶可以被直接快速作用于病患处，且作用于患处的药物可快速被吸收起效；不仅使用剂量少，且起效快，疗效好，无其他毒副作用。2、制剂中药物溶解于合适介质中，借雾化器以气溶胶形式，经口或鼻吸入递送到呼吸道或肺部，给药直达作用部位，减少了药物在其他组织器官的分布，局部病灶的药物浓度高，较口服给药而言，雾化吸入给药方式的治疗总有效率大幅提高，具有安全有效，生物利用度高、毒副作用小的特点，因而具有明显优势。3、本发明制备的溶液制剂弥补了目前国内市场上的空白，而且本发明制备的溶液制剂是专为雾化吸入用患者设计，与雾化器配套使用，使用过程便捷，与银杏露合剂相比，给药途径不同，使用剂量减少，安全性提高。同时可避免口服给药所需经过肝的首过效应，给患者造成的损伤，增加患者的顺应性，对于不方便口服给药的儿童是一种很好的给药途径。具体实施方式以下药物制剂实施例的制剂过程和制剂所用物质或制剂所用物质的用量不限于文字表述，凡含有本发明提供的药物组合物的制剂方法，均属于本发明的保护范围。本发明实施例中所使用的银杏叶、无机盐类等渗剂、糖类等渗剂及其它化学药品、试剂等均属于市售商品。实施例1(1)取300g新鲜银杏叶进行机械粉碎，得到银杏叶粉碎物；(2)向步骤(1)中的银杏叶粉碎物中加入8倍体积量的60wt％乙醇水溶液，回流提取2h，放冷过滤，收集第一次提取液；然后向滤渣中加入6倍体积量的60wt％乙醇水溶液，回流提取2h，放冷过滤，收集第二次提取液；合并第一次提取液、第二次提取液，减压蒸馏，得到银杏叶浓缩膏；(3)向所述步骤(2)的银杏叶浓缩膏中加入1倍体积量的水，搅拌均匀后静置24h，滤过，得到银杏叶上柱液；(4)采用大孔树脂柱对步骤(3)的银杏叶上柱液进行纯化，洗脱液为20wt％-40wt％乙醇水溶液，收集从大孔树脂柱流出的洗脱液，减压蒸馏，得到银杏叶纯化膏；(5)向步骤(4)的银杏叶纯化膏中加入适量注射用水，并加0.5wt％活性炭，煮沸30min，放冷，滤过，超滤，得到银杏叶脱色溶液；(6)向步骤(5)的银杏叶脱色溶液加入适量注射用水，加入3g氯化钠，再加入注射用水定容至1000ml，滤过，灌封，灭菌，得银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂。实施例2～8实施例2～8除“在实施例1处方的基础上，在步骤(6)中加入助溶剂”外，其它参数和操作与实施例1相同，助溶剂的具体种类和使用量如表1所示：表1实施例2～8助溶剂的具体种类和参数序号助溶剂(g)实施例2β-环糊精(1.8g)实施例3泊洛沙姆(1.8g)实施例4吐温-80(1.8g)实施例5羟丙基-β-环糊精(0.9g)、吐温-80(0.9g)实施例6羟丙基-β-环糊精(0.9g)、聚乙二醇(0.9g)实施例7β-环糊精(12g)实施例8羟丙基-β-环糊精(3g)、聚乙二醇(9g)实施例9(1)取150g新鲜银杏叶进行机械粉碎，得到银杏叶粉碎物；(2)向步骤(1)中的银杏叶粉碎物中加入6倍体积量的70wt％乙醇水溶液，回流提取2h，放冷过滤，收集第一次提取液；然后向滤渣中加入5倍体积量的60wt％乙醇水溶液，回流提取2h，放冷过滤，收集第二次提取液；合并第一次提取液、第二次提取液，减压蒸馏，得到银杏叶浓缩膏；(3)向所述步骤(2)的银杏叶浓缩膏中加入1.2倍体积量的水，搅拌均匀后静置24h，滤过，得到银杏叶上柱液；(4)采用大孔树脂柱对步骤(3)的银杏叶上柱液进行纯化，洗脱液为20wt％-40wt％乙醇水溶液，收集从大孔树脂柱流出的洗脱液，减压蒸馏，得到银杏叶纯化膏；(5)向步骤(4)的银杏叶纯化膏中加入适量注射用水，并加0.5wt％活性炭，煮沸30min，放冷，滤过，超滤，得到银杏叶脱色溶液；(6)向步骤(5)的银杏叶脱色溶液加入适量注射用水，加入2g氯化钠，0.9g羟丙基-β-环糊精、0.6g聚乙二醇，再加入注射用水定容至1000ml，滤过，灌封，灭菌，得银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂。实施例10(1)取1000g新鲜银杏叶进行机械粉碎，得到银杏叶粉碎物；(2)向步骤(1)中的银杏叶粉碎物中加入10倍体积量的40wt％乙醇水溶液，回流提取2h，放冷过滤，收集第一次提取液；然后向滤渣中加入6倍体积量的80wt％乙醇水溶液，回流提取2h，放冷过滤，收集第二次提取液；合并第一次提取液、第二次提取液，减压蒸馏，得到银杏叶浓缩膏；(3)向所述步骤(2)的银杏叶浓缩膏中加入2倍体积量的水，搅拌均匀后静置24h，滤过，得到银杏叶上柱液；(4)采用大孔树脂柱对步骤(3)的银杏叶上柱液进行纯化，洗脱液为20wt％-40wt％乙醇水溶液，收集从大孔树脂柱流出的洗脱液，减压蒸馏，得到银杏叶纯化膏；(5)向步骤(4)的银杏叶纯化膏中加入适量注射用水，并加0.5wt％活性炭，煮沸30min，放冷，滤过，超滤，得到银杏叶脱色溶液；(6)向步骤(5)的银杏叶脱色溶液加入适量注射用水，加入5g氯化钠，9g羟丙基-β-环糊精、3g吐温-80，再加入注射用水定容至1000ml，滤过，灌封，灭菌，得银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂。实施例11(1)取600g新鲜银杏叶进行机械粉碎，得到银杏叶粉碎物；(2)向步骤(1)中的银杏叶粉碎物中加入8倍体积量的60wt％乙醇水溶液，回流提取2h，放冷过滤，收集第一次提取液；然后向滤渣中加入6倍体积量的60wt％乙醇水溶液，回流提取2h，放冷过滤，收集第二次提取液；合并第一次提取液、第二次提取液，减压蒸馏，得到银杏叶浓缩膏；(3)向所述步骤(2)的银杏叶浓缩膏中加入1.5倍体积量的水，搅拌均匀后静置24h，滤过，得到银杏叶上柱液；(4)采用大孔树脂柱对步骤(3)的银杏叶上柱液进行纯化，洗脱液为20wt％-40wt％乙醇水溶液，收集从大孔树脂柱流出的洗脱液，减压蒸馏，得到银杏叶纯化膏；(5)向步骤(4)的银杏叶纯化膏中加入适量注射用水，并加0.5wt％活性炭，煮沸30min，放冷，滤过，超滤，得到银杏叶脱色溶液；(6)向步骤(5)的银杏叶脱色溶液加入适量注射用水，加入3g氯化钠，4.8gβ-环糊精、1.2g聚乙二醇，再加入注射用水定容至1000ml，滤过，灌封，灭菌，得银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂。实施例12(1)取800g新鲜银杏叶进行机械粉碎，得到银杏叶粉碎物；(2)向步骤(1)中的银杏叶粉碎物中加入8倍体积量的60wt％乙醇水溶液，回流提取2h，放冷过滤，收集第一次提取液；然后向滤渣中加入6倍体积量的60wt％乙醇水溶液，回流提取2h，放冷过滤，收集第二次提取液；合并第一次提取液、第二次提取液，减压蒸馏，得到银杏叶浓缩膏；(3)向所述步骤(2)的银杏叶浓缩膏中加入1倍体积量的水，搅拌均匀后静置24h，滤过，得到银杏叶上柱液；(4)采用大孔树脂柱对步骤(3)的银杏叶上柱液进行纯化，洗脱液为20wt％-40wt％乙醇水溶液，收集从大孔树脂柱流出的洗脱液，减压蒸馏，得到银杏叶纯化膏；(5)向步骤(4)的银杏叶纯化膏中加入适量注射用水，并加0.5wt％活性炭，煮沸30min，放冷，滤过，超滤，得到银杏叶脱色溶液；(6)向步骤(5)的银杏叶脱色溶液加入适量注射用水，加入3g氯化钠，3.5g羟丙基-β-环糊精、0.7g聚乙二醇，加入碳酸氢钠调节ph值至7，再加入注射用水定容至1000ml，滤过，灌封，灭菌，得银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂。实施例13(1)取1200g新鲜银杏叶进行机械粉碎，得到银杏叶粉碎物；(2)向步骤(1)中的银杏叶粉碎物中加入8倍体积量的60wt％乙醇水溶液，回流提取2h，放冷过滤，收集第一次提取液；然后向滤渣中加入6倍体积量的60wt％乙醇水溶液，回流提取2h，放冷过滤，收集第二次提取液；合并第一次提取液、第二次提取液，减压蒸馏，得到银杏叶浓缩膏；(3)向所述步骤(2)的银杏叶浓缩膏中加入1倍体积量的水，搅拌均匀后静置24h，滤过，得到银杏叶上柱液；(4)采用大孔树脂柱对步骤(3)的银杏叶上柱液进行纯化，洗脱液为20wt％-40wt％乙醇水溶液，收集从大孔树脂柱流出的洗脱液，减压蒸馏，得到银杏叶纯化膏；(5)向步骤(4)的银杏叶纯化膏中加入适量注射用水，并加0.5wt％活性炭，煮沸30min，放冷，滤过，超滤，得到银杏叶脱色溶液；(6)向步骤(5)的银杏叶脱色溶液加入适量注射用水，加入5g氯化钠，10.8g羟丙基-β-环糊精、3.6g聚乙二醇，加入碳酸氢钠调节ph值至7，再加入注射用水定容至1000ml，滤过，灌封，灭菌，得银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂。为了说明本发明实施例制备得到的银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂的参数、安全性、药效，设计如下试验例。试验例1本发明实施例1～13制备得到的银杏叶提取物雾化吸入用溶液的物理参数如表2所示。表2实施例1～13雾化吸入用溶液制剂的物理参数试验例2利用试验型德国百瑞在线系统评价实施例1～13雾化吸入用溶液制剂的性能。通过激光衍射测量粒子尺寸参数，测量的质量中值直径(mmd)和粒径分布(几何标准差-gsd)以及总输出速率(tor)结果示于表3中。表3实施例1～13雾化吸入用溶液制剂的性能序号mmd(um)gsdtor(mg/分钟)％<5um％<2um实施例12.051.53608856实施例22.051.53609060实施例32.051.53609060实施例42.051.53609061实施例52.051.53609162实施例62.051.53609362实施例72.051.53609680实施例82.051.53609785实施例92.931.73009363实施例102.651.54009265实施例111.801.23209462实施例122.802.04009565实施例132.302.23509366由表3可知，本发明实施例1～13吸入用溶液制剂的雾化性能良好，但实施例7和实施例8由于助溶剂含量偏高，雾化后形成的气溶胶颗粒易聚集。试验例3雾化吸入用溶液制剂对甲型流感病毒感染小鼠肺指数的影响实验方法：取小鼠56只，雌雄各半，随机分为14组，其中，第1～11组小鼠通过雾化吸入分别给予实施例1～6、实施例9～13吸入用溶液制剂，一组小鼠对应一个实施例的吸入用溶液制剂，第12～13组(对照组一、二)小鼠通过雾化吸入给予等量生理盐水，第14组(对照组三)小鼠通过静脉注射给予等量实施例12的吸入用溶液制剂，每天给药1次，连续给药5天。于第6天在乙醚的麻醉下，以血凝试验640以上的甲型流感病毒尿囊液(每组每只小鼠4ul，20个ld50攻击量)给第1～11组、第13～14组小鼠滴鼻感染，同时第12组小鼠用生理盐水滴鼻对照；感染后96h解剖小鼠，取肺称重，算出肺指数(＝肺重量(g)/体重(g)×100％)和抑制率[＝(模型组(对照组二)肺指数均值-治疗组肺指数均值)/模型组肺指数均值×100％]。具体数据详见表4。表4雾化吸入用溶液对甲型流感病毒感染小鼠肺指数的影响(x±sd，n＝20)各给药组与对照组二相比*p<0.05结论：本发明的银杏叶提取物雾化吸入用溶液制剂均能不同程度地降低甲型流感病毒感染小鼠的肺指数。当前第1页12