本发明属于药品及药品制造
技术领域：
，特别涉及一种混料优化的蛇床子素发泡微乳剂及其制备方法。
背景技术：
阴道炎是妇科常见病和多发病，是病原微生物感染引起的多种阴道黏膜疾病的总称。滴虫性、细菌性和念珠菌性阴道炎[3]临床最为常见。蛇床子素是一种香豆素类化合物，具有抗炎止痒，抗菌抗病毒，提高免疫力以及抗过敏的作用，临床外用为主，在治疗滴虫性阴道炎和外阴湿疹方面有独特的疗效。但由于蛇床子素水溶性差，存在生物体内溶解度低、生物利用度差等问题限制了临床应用。难溶性药物的增溶仍旧是目前药剂学研究的重点之一，微乳作为一个理想稳定的药物载体，粒径小，性质稳定且渗透性强，提高生物利用度，降低毒副作用。但微乳中需使用表面活性剂及助表面活性剂，它们一般都对黏膜有刺激性，因此寻找低毒高效的表面活性剂及助表面活性剂，甚至通过工艺优化寻找低含量表面活性剂成为目前微乳研究的重点问题。发泡微乳剂是一种利用特定装置将微乳在无需推进剂的情况下即可喷出泡沫的新型给药方式。相较于市面上的洗剂和乳膏，发泡微乳剂实用性和顺应性更好，能够有效促使药物到达病灶，给药方便且持续释药时间长，泡沫的生成更能减少对炎症部位的刺激。比之气雾剂，发泡微乳剂不添加抛射剂，减小刺激性，成本降低，可为阴道炎的治疗带来更优质的产品。技术实现要素：针对蛇床子素的增溶问题，本发明在前期工作研究的基础上，通过测定蛇床子素在辅料中的溶解度，筛选增溶效果较好的油相、表面活性剂、助表面活性剂，绘制三元相图并结合d-最优混料设计优化获得最佳发泡微乳处方。一种混料优化的蛇床子素发泡微乳剂，包括蛇床子素和辅料，其中辅料包括油酸乙酯、混合表面活性剂和去离子水；所述混合表面活性剂包括聚氧乙烯蓖麻油40和二乙二醇单乙基醚。进一步的，所述辅料中各成分的质量百分比为：油酸乙酯1.30％～9.95％，混合表面活性剂17.69％～27.92％，去离子水65.73％～81.01％；进一步的，所述辅料中各成分的质量比如下：油酸乙酯：聚氧乙烯40氢化蓖麻油：二乙二醇单乙基醚：去离子水＝8.13:14.81:6.58:71.44。进一步的，蛇床子素发泡微乳剂各成分的质量比如下：油酸乙酯：聚氧乙烯40氢化蓖麻油：二乙二醇单乙基醚：去离子水：蛇床子素＝8.13∶14.81∶6.58∶71.44∶1.36。一种混料优化的蛇床子素发泡微乳剂制备方法，包括以下步骤：s1、按一定比例称取油酸乙酯、聚氧乙烯40氢化蓖麻油、二乙二醇单乙基醚、去离子水和蛇床子素，并涡旋混匀制成缓释液；s2、将上述缓释液置于37℃、150转/分钟的恒温振荡箱中振荡24小时，然后取出；s3、放入10000转/分钟的离心机中离心10分钟，取上清液。本发明的有益技术效果为：乳化处方将蛇床子素的溶解度至少提高了201倍，达到了对其增溶的目的，这为后期蛇床子素发泡微乳进一步制剂成型提供一定指导意义。附图说明图1为微乳伪三元相图；图2为od值二维等高线图；图3为优选处方的电位(a)和粒径(b)分布图；图4为优选处方的泡沫形成能力图。具体实施方式为了使本
技术领域：
人员能更好地理解本发明的目的、技术方案和有益效果，下面结合具体实施例和说明附图来进行完整的描述。实施例11、蛇床子素在各辅料中溶解度测定分别取不同的油相、表面活性剂、助表面活性剂约2ml于具塞刻度试管中，加入过量的蛇床子素原料药，涡旋分散，于37℃恒温振荡箱震荡48h，10000r/min离心10min，取上清液用无水乙醇适量稀释，然后测定蛇床子素在各种辅料中的溶解度，结果见表1。表1蛇床子素在辅料中的溶解度如表1所示，蛇床子素在油酸乙酯、pgpr、op、odo、labrasol、el-40、peg-200、transcutolhp中的溶解较高，因而拟选用这些辅料做进一步筛选。2、三元相图的绘制选择表面活性剂和助表面活性剂的质量比(km值)分别为1:1、2:1、3:1、4:1，按油相和混合表面活性剂质量比为1:9、2:8、3:7、4:6、5:5、6:4、7:3、8:2、9:1的比例精密称取各油相、表面活性剂和助表面活性剂，混匀，在室温、磁力搅拌下滴加水,直至形成澄清透明的微乳。当外观不再澄清时,记录临界加水量。按油、水、混合表面活性剂在临界点的质量百分比,在伪三元相图中绘制曲线,确定微乳区。辅料筛选实验发现，peg-200和odo、pgpr、labrasol为对蛇床子素溶解性最佳的助表面活性剂和表面活性剂，但与溶解最佳油相油酸乙酯几乎不成乳。故选取了对蛇床子素溶解性仅次于peg-200的transcutolhp为助表面活性剂，以及el-40为表面活性剂。构建伪三元相图如图1，a中km＝4:1,b中km＝3:1,c中km＝2:1，d中km＝1:1；sm表示混合乳化剂；m表示微乳区；g表示凝胶区。从图中看出km＝3:1时，微乳区最大，所以本实验选择乳化剂与助乳化剂的比例为3:1。3、d-最优混料设计优化处方在三元相图基础上，以油相(油酸乙酯)质量(x1)、去离子水的质量(x2)和混合表面活性剂(el-40与transcutolhp)质量(x3)的质量比例为考察因素，以蛇床子素的载药量(y1)、发泡量(y2)、泡沫半衰期(y3)、粒径(y4)为评价指标，用designexpert7.0统计软件进行d-最优混料设计优化处方，见表2，并按照表2所示比例称取油相、混合表面活性剂、去离子水，加入过量的蛇床子素原料药涡旋混匀，置于37℃、150r/min恒温振荡箱振荡24h，取出，10000r/min离心10min，取上清液适量，加无水乙醇稀释，测定载药量。按照表2所示比例称取油相、混合表面活性剂、去离子水在“2.2”方法指导下测定各个微乳的发泡量及泡沫半衰期。对4个响应值分别进行“归一化”处理得4个归一值(od)(y1、y2和y3取odmax，y4取odmin)，在此基础上，取每个od值的权重系数均为0.25(本实验中4个指标处于同等地位，故权重系数皆为0.25)。试验设计与结果见表2。表2d-最优混料试验设计及结果序号x1x2x3y1/(mg·g-1)y2/cmy3/miny4/nmod值11.3062.1336.5811.107.355.8839.770.61241.2939.4519.2625.486.555.2759.660.5231.3048.2550.4519.719.276.2043.990.72428.5236.0135.4729.882.803.0156.850.29524.4563.7611.7926.842.652.3790.900.17617.6949.9432.3721.456.474.7874.380.4378.8171.4419.7513.558.576.7943.540.70817.6949.9432.3723.057.224.5474.660.43924.4563.7611.7926.642.702.4568.740.19101.3086.9111.798.637.734.1336.670.531141.298.2650.4563.706.453.4332.820.661241.2922.3036.4132.324.103.0158.770.311317.6949.9432.3720.525.574.9474.510.57141.3086.9111.798.157.444.2036.750.521521.9027.6450.4538.537.453.4983.800.411641.2939.4519.2623.346.755.3059.750.52odmax＝(yi－ymin)/(ymax－ymin)odmin＝(ymax－yi)/(ymax－ymin)od＝0.25×(od1max+od2max+od3max+od4min)4、数据分析及处方优化应用designexpert8.0实验设计软件以4种数学模型进行回归拟合与分析，以回归模型的p值、失拟项、复相关系数、调整相关系数和预测复相关系数为综合指标，判断并选取4种数学模型中最佳的回归模型，结果见表3。表3回归分析结果4个响应值及其od值的复相关系数皆较高，表明回归模型拟合较好，回归方程的代表性好，能准确预测实际情况。拟合模型的回归方程：y1＝-24.59x1+8.11x2+84.22x3+135.68x1x2+137.99x1x3-101.54x2x3-332.41x12x2x3-44.57x1x22x3-600.11x1x2x32；y2＝147.47x1+7.50x2+92.63x3-287.74x1x2-454.99x1x3-162.55x2x3+569.58x1x2x3-161.34x1x2(x1-x2)-125.15x1x3(x1-x3)+103.63x2x3(x2-x3)；y3＝24.25x1+4.16x2+110.86x3-46.37x1x2-255.87x1x3-204.33x2x3+335.99x1x2x3-23.19x1x2(x1-x2)+126.42x1x3(x1-x3)+153.22x2x3(x2-x3)；y4＝1642.53x1+36.74x2-1561.40x3-2906.58x1x2-53.16x1x3-3211.91x2x3-6.32x1x2x3-2038.03x1x2(x1-x2)-5074.96x1x3(x1-x3)-2338.82x2x3(x2-x3)；od＝1.36x1+0.51x2+15.20x3-3.13x1x2-30.44x1x3-28.45x2x3+39.17x1x2x3-0.88x1x2(x1-x2)+19.23x1x3(x1-x3)+20.52x2x3(x2-x3)。根据最佳回归方程，应用designexpert8.0统计软件绘制y1、y2、y3和y4响应值的od值二维等高线图，如图2所示。当油酸乙酯所占比例为1.30％～9.95％，混合乳化剂为17.69％～27.92％，水为65.73％～81.01％时，od值较大。最优处方为油酸乙酯-聚氧乙烯蓖麻40-二乙二醇单乙基醚-去离子水-蛇床子素原料药(8.13∶14.81∶6.58∶71.44∶1.36)。以此比例称取油相、混合乳化剂和蛇床子素原料药，涡旋混匀，置于37℃、150r/min恒温振荡箱振荡24h，取出，10000r/min离心10min，取上清液，即得蛇床子素发泡微乳剂。实施例2优化处方的验证按最优处方，制备发泡微乳，重复3次，其辅料配比及试验结果见表4。结果验证处方的各指标实际值均接近预测值，表明d-最优混料设计对微乳配比具有准确的预测性。表4优化验证处方的实测值与预测值比较1、发泡微乳理化性质表征取按表四制备的微乳对其进行电位、粒径、多分散系数、溶解度和载药量等理化性质进行表征。外观：该蛇床子发泡微乳剂外观为澄清透明的带有淡蓝色乳光液体。粒径、多分散系数和zeta电位：该发泡微乳平均粒径为(43.54±3.43)nm(n＝3)，平均多分散系数(0.839±0.092)％(n＝3)，平均电位为(-2.32±0.78)mv(n＝3)，粒径分布和电位分布如图3所示。按照取适量药乳置于无推进喷雾装置，最大程度按压一次至玻璃皿中，考察泡沫形成力，见图4。溶解度：将空白微乳与水按照1g∶50ml混合，再加入过量蛇床子素原料药，测定蛇床子素在水中的溶解度。结果蛇床子素在水中的溶解度为0.43mg/ml，蛇床子素原料药在水中的溶解度为2.14μg/ml，因此本研究优化的微乳处方将蛇床子素的溶解度至少提高了201倍。载药量：精密称取含药乳0.1g，置于10ml量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释至刻度，按“2.1.3”项下色谱条件测定。计算得蛇床子素的载药量为13.62mg/g。2、温度实验精密称取蛇床子素发泡微乳适量，在4℃、25℃、60℃条件下密封保存10天，分别于0天、5天、10天观察其外观有无改变，并测定药物含量、粒径、发泡量、泡沫半衰期，以考察样品稳定性，结果见表5。结果说明蛇床子素发泡微乳保存于4℃、25℃、60℃条件下外观均匀，药物含量、粒径、发泡量、半衰期均无显著变化。表5蛇床子素发泡微乳温度稳定性考察结果(n＝3)本发明发泡微乳系统显著提高了蛇床子素的溶解度和溶出度，由于蛇床子素原料药的溶解未检测出来，因而以本研究中的最低检测限计算，本研究优化的自乳化处方将蛇床子素的溶解度至少提高了201倍，达到了对其增溶的目的，这为后期蛇床子素发泡微乳进一步制剂成型提供一定指导意义。以上所举实施例，对本发明的目的、技术方案和优点进行了进一步的详细说明，所应理解的是，以上所举实施例仅为本发明的优选实施方式而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内对本发明所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。当前第1页12