一种注射用左卡尼汀的制备方法与流程

本发明涉及药物领域，具体涉及一种注射用左卡尼汀的制备方法。

背景技术

左卡尼汀：(r)-3-羧基-2-羟基-n，n，n-三甲基-1-丙胺氢氧化物，内盐。左卡尼汀(又称左旋肉碱)广泛存在于哺乳类动物肌体组织内的天然物质，是哺乳动物能量代谢必需的营养物质，人类可从动物食品中摄取，也可自身合成，主要分布于人体心肌、骨骼肌中。

左卡尼汀主要功能是促进脂类代谢，对于各种组织缺血缺氧，左卡尼汀通过增加脂类代谢、能量产生而提高组织器官的供能，尤其是心肌细胞、脑、肾脏等多组织器官，从而提高缺血缺氧的组织器官功能。左卡尼汀其他功能包括：促进中等长链脂肪酸的氧化作用，防止缺血缺氧的细胞因脂肪酸堆积导致酸中毒死亡；脂肪酸过氧化物酶的氧化作用；对结合的辅酶a和游离的辅酶a二者比率的缓冲作用及从酮类物质、丙酮酸、氨基酸(包括支链氨基酸)中产生能量，去除过高辅酶a的毒性，调节血中氨的浓度。

左卡尼汀的注射剂主要以小容量注射剂和冻干粉针剂为主，冻干粉针剂的冻干周期长，能耗大，使得左卡尼汀冻干粉针剂的生产成本居高不下。

中国专利cn107281142a提供了一种注射用左卡尼汀冻干粉针剂及其制备方法，该方法的真空冷冻干燥步骤为：先在-40～-45℃预冻2～3小时，然后在-45～-15℃升华15～18小时，再在-15～0℃升华11～13小时，最后在40～50℃下干燥2～3h，得到左卡尼汀冻干粉。这种方法总共需要30～37h，能耗大、生产周期长。

中国专利cn102327240a提供了一种注射用左卡尼汀组合物及其制备方法，其真空冷冻干燥步骤为：-45℃预冷冻90min，使后箱冷阱温度低于-70℃，其后将前箱抽真空至10pa以下，以50℃导热油对预冷冻的左卡尼汀药液进行高速升温升华干燥，当制品温度达到-23℃时将导热油温度降低至20℃，继续匀速升温升华干燥至制品温度为15℃，得到冻干粉末。该方法虽然仅需18h即可完成真空冷冻干燥过程，但是该方法中快速升温以达到升华干燥一体进行的方式也较一般方法更为耗能，不适宜大规模推广应用。

因此，目前缺乏一种生成周期短、能耗低的注射用左卡尼汀冻干粉针剂的制备方法。

技术实现要素：

本发明为了解决现有技术中的左卡尼汀冻干粉针剂制备方法成本高、周期长的问题，提供了一种注射用左卡尼汀的制备方法，能够有效缩短生产周期、降低生产成本。

为了解决上述问题，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了一种注射用左卡尼汀的制备方法，包括以下步骤：

(1)将甘露醇、注射用水和左卡尼汀依次混合，得到混合溶液1；所述甘露醇与左卡尼汀的质量比为0.9～1.2:1；

(2)将所述混合溶液1的ph值调节至6.0～7.5，以注射用水将调节ph值后的混合溶液1稀释，得到混合溶液2；

所述步骤(1)和(2)中的注射用水总体积与左卡尼汀的质量比为0.9～1.1ml:1g；

(3)将所述混合溶液2以活性炭吸附，过滤，取滤液，得到待冻干物料；

(4)将所述待冻干物料在-45～-40℃下预冷冻1～4h，在-45～0℃的温度下升华12～15h，再在40～45℃下干燥6～8h，得到冻干物料，得到注射用左卡尼汀。

优选的，所述步骤(1)、步骤(2)中，注射用水的温度独立为50～70℃。

优选的，所述注射用水的温度独立为55～60℃。

优选的，步骤(2)中，以摩尔浓度为1mo/l的盐酸溶液调节混合溶液1的ph值。

优选的，所述步骤(3)中，还包括将所述滤液进行灌装，得到冻干物料。

优选的，所述灌装时对容器进行同步振荡。

优选的，所述振荡频率为0.4～1s/次。

优选的，所述步骤(3)中，活性炭与左卡尼汀的质量比为0.8～2:100

与现有技术相比，本发明提供的技术方案具有以下优点：

本发明提供了一种注射用左卡尼汀的制备方法，将注射用水溶解甘露醇和左卡尼汀，调节ph值至6.0～7.5后稀释至左卡尼汀含量为1g/ml，经活性炭吸附、过滤后进行灌装，得到待冻干物料；将待冻干物料在-45～-40℃下预冷冻1～4h，在-45～0℃的温度下升华12～15h，再在40～45℃下干燥6～8h，得到冻干物料，包装，得到注射用左卡尼汀。本发明所述注射用左卡尼汀的制备方法的冻干时间仅需要19～27h，与常规左卡尼汀冻干粉针剂的冷冻干燥方式(先升华再干燥的方式)相比，升华时间缩短10～13h，干燥时间延长了3～5h，冷冻干燥时间整体缩短10h左右。本发明通过缩短升华时间、延长干燥时间的方式有效缩短了生产周期。

同时，本发明所述方法的真空冷冻干燥温度等相对于常规技术没有显著改变，在未显著增加能耗的同时有效缩短了冻干时间，从而进一步降低注射用左卡尼汀的生产成本。

经检测表明，采用本发明所述方法制备得到的注射用左卡尼汀的有关物质并未产生变化，与原料左卡尼汀的杂质对比一致，即本发明提供的方法在缩短真空冷冻干燥时间的同时并未影响注射用左卡尼汀的质量。

在本发明一些优选的技术方案中，灌装同时进行振荡，能够有效防止药液挂壁，减少对冻干效果的影响。

附图说明

图1为实施例4检测的原料药左卡尼汀hplc图；

图2为实施例4检测的注射用左卡尼汀hplc图。

具体实施方式

本发明提供了一种注射用左卡尼汀的制备方法，包括以下步骤：

(1)将甘露醇、注射用水和左卡尼汀依次混合，得到混合溶液1；所述甘露醇与左卡尼汀的质量比为0.9～1.2:1；

(2)将所述混合溶液1的ph值调节至6.0～7.5，以注射用水将调节ph值后的混合溶液1稀释，得到混合溶液2；

所述步骤(1)和(2)中的注射用水总体积与左卡尼汀的质量比为0.9～1.1ml:1g；

(3)将所述混合溶液2以活性炭吸附，过滤，取滤液，得到待冻干物料；

(4)将所述待冻干物料在-45～-40℃下预冷冻1～4h，在-45～0℃的温度下升华12～15h，再在40～45℃下干燥6～8h，得到冻干物料，包装，得到注射用左卡尼汀。

本发明所述甘露醇、注射用水和左卡尼汀依次混合是指，甘露醇与注射用水混合后再加入左卡尼汀，即得混合溶液1。本发明加入甘露醇的目的在于使左卡尼汀在溶液中稳定，因而在制备时先溶解甘露醇再加入左卡尼汀。

在本发明中所述甘露醇与左卡尼汀的质量比优选为0.9～1.2:1，更优选为1.0～1.1:1。本发明对所述甘露醇和左卡尼汀的原料来源无特殊限定，采用适宜注射剂制备的药用原料即可。

在本发明中，所述注射用水的温度优选为50～70℃，更优选为55～60℃。左卡尼汀在这一温度下较为稳定，因而在溶解左卡尼汀时优选的采用这一温度的注射用水进行。

得到混合溶液1后，本发明将所述混合溶液1的ph值调节至6.0～7.5，以注射用水将调节ph值后的混合溶液1稀释，得到混合溶液2。

本发明优选的，调节ph值时采用1mol/l盐酸进行调节。左卡尼汀易溶于水，溶液的ph为弱酸性或中性时能够提高左卡尼汀的稳定性，因而本发明先将混合溶液1的ph值调节至6.0～7.5，稀释后得到的混合溶液2的ph值接近中性(7.0)，提高注射用左卡尼汀的稳定性。通过长期24个月稳定性试验检测，24个月与0月时的注射用左卡尼汀有关物质基本保持一致。

在本发明中用于稀释混合溶液1的注射用水温度优选为50～70℃，更优选为55～60℃。

在本发明中，用于制备混合溶液1的注射用水和用于稀释调节ph值后的混合溶液1的注射用水体积之和与左卡尼汀的质量比为0.9～1.1ml:1g。

得到混合溶液2后，本发明向混合溶液2中加入活性炭进行吸附，吸附后采用微孔滤膜进行过滤，取滤液，从而得到待冻干物料。

在本发明中，所述活性炭与左卡尼汀的质量比优选为0.8～2:100，更优选为1.2:100。本发明添加活性炭的目的是为了对杂质进行吸附，降低成品的有关物质含量。

在本发明中，所述微孔滤膜的规格优选为0.22μm或0.45μm。

本发明优选的，在得到滤液后将滤液进行灌装，得到待冻干物料。

在本发明中，所述灌装量优选的根据所需制备的成品规格确定，比如1ml、5ml、10ml等。

本发明优选的，在灌装时对容器进行同步振荡；所述振荡优选的通过振荡器提供。在本发明中，所述振荡频率优选为0.4～1s/次，更优选为0.6s/次。在灌装过程中进行同步振荡有助于防止药液挂壁，进而防止药液挂壁对冻干效果的影响。在本发明中，所述灌装用的容器为任何适宜盛装注射剂的容器，比如安瓿瓶。

得到待冻干物料后，本发明将待冻干物料在-45～-40℃下预冷冻1～4h，在-45～0℃的温度下升华12～15h，再在40～45℃下干燥6～8h，得到冻干物料，得到注射用左卡尼汀。

本发明所述预冷冻时间自待冻干物料冷却预冻干温度时起算，所述预冷冻时间更优选为2～3h。

在本发明中，所述升华时间更优选为13～14h；在本发明中，所述升华时优选的为匀速升温。

在本发明中，所述干燥时间优选为7h。本发明提供的真空冷冻干燥方式相对于常规方法的升华时间降低10～13h，干燥时间延长3～5h，从而整体上缩短了冷冻干燥时间10h左右。本发明采用缩短升华时间、延长干燥时间的方式减少了整体生产周期，并且对冷冻干燥条件无显著改变，生产成本相对降低。

在本发明中，当得到待冻干物料时进行了灌装，则在得到冻干物料后对容器进行压塞、出箱、扎铝盖等包装操作，得到注射用左卡尼汀冻干粉针剂。

经检测表明，本发明制备得到的注射用左卡尼汀有关物质与左卡尼汀原料药无显著差异，表明本发明提供制备方法并不会降低冻干粉针剂的质量，是一种有效的节本高效的左卡尼汀冻干粉针剂制备方法。

为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。

实施例1

处方：

1.将甘露醇加入注射用水(60℃)中搅拌溶解，然后加入左卡尼汀搅拌使之完全溶解。

2.使用1mol/l的盐酸溶液，调节ph值在6.0～7.5范围内，再补加注射用水至全量。

3.投入活性炭(供注射用)，吸附，0.22μm微孔滤膜过滤，取滤液。

4.将滤液灌装至5ml安瓿瓶中，灌装过程中使用振荡器按照0.6s/次的频率进行同步振荡。

5.分装后进行真空冷冻干燥操作，先在-45℃预冻2小时，然后在-45℃～0℃升华12小时，最后40℃干燥8小时，得到左卡尼汀冻干粉。

6.干燥后压胶塞、出箱、扎铝盖，得到注射用左卡尼汀。

实施例2

处方：

1.将甘露醇加入注射用水(55℃)中搅拌溶解，然后加入左卡尼汀搅拌使之完全溶解。

2.使用1mol/l的盐酸溶液，调节ph值在6.8～7.2范围内，再补加注射用水至全量。

3.投入活性炭(供注射用)，吸附，0.22μm微孔滤膜过滤，取滤液。

4.将滤液灌装至5ml安瓿瓶中，灌装过程中使用振荡器按照0.4s/次的频率进行同步振荡。

5.分装后进行真空冷冻干燥操作，先在-40～-45℃预冻4小时，然后在-45℃～0℃升华15小时，最后45℃干燥6小时，得到左卡尼汀冻干粉。

6.干燥后压胶塞、出箱、扎铝盖，得到注射用左卡尼汀。

实施例3

处方：

1.将甘露醇加入注射用水(65℃)中搅拌溶解，然后加入左卡尼汀搅拌使之完全溶解。

2.使用1mol/l的盐酸溶液，调节ph值在6.4～7.0范围内，再补加注射用水至全量。

3.投入活性炭(供注射用)，吸附，0.22μm微孔滤膜过滤，取滤液。

4.将滤液灌装至5ml安瓿瓶中，灌装过程中使用振荡器按照0.8s/次的频率进行同步振荡。

5.分装后进行真空冷冻干燥操作，先在-40℃预冻2小时，然后在-45℃～0℃升华13小时，最后42℃干燥7小时，得到左卡尼汀冻干粉。

6.干燥后压胶塞、出箱、扎铝盖，得到注射用左卡尼汀。

实施例4

分别取实施例1中的原料药左卡尼汀与实施例制备得到的注射用左卡尼汀的有关物质进行检测，检测方法如下：

(1)原料药左卡尼汀的hplc检测方法

有关物质：照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录ⅴd)测定。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以磷酸盐的缓冲液-甲醇(90:10)为流动相，检测波长为225nm，理论板数按左卡尼汀峰计算不得低于1200。计算公式：理论板数n＝5.54(tr/wh/2)²。

磷酸盐的缓冲液：取磷酸11.5ml，加水1900ml，用1mol/l氢氧化钠溶液约100ml，调节ph至2.4，加庚烷磺酸钠1.1g，振摇使溶解

测定法：精密称取本品0.095～0.105g，置于50ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，制成每1ml中约含2mg左卡尼汀的溶液，作为供试溶液；再精密量取上述溶液1.0ml置50ml容量瓶中，加水至刻度制成每1ml中约含40μg左卡尼汀的溶液，作为对照溶液。取对照液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10～20％；再取供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，各杂质峰面积的和，不得大于对照溶液的主峰面积0.7倍(0.7％)。检测结果如图1所示。

(2)注射用左卡尼汀的hplc检测方法

用十八烷基键合硅胶为填充剂；以磷酸盐缓冲液-甲醇-庚烷磺酸钠(980ml:20ml:555mg)为流动相；检测波长为225nm。

测定法：取本品36.6～38.5mg，加入10ml的容量瓶中，加适量水溶解，稀释至刻度制成每1ml中含左卡尼汀2mg的溶液，混匀，作为供试品溶液；再精密量取1.0ml供试品溶液加入100ml的容量瓶中，再加水至刻度制成每1ml含左卡尼汀0.02mg，混匀，作为对照溶液。

取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰峰高约为记录仪满量程的20％；再取供试品溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间2.5倍，供试品溶液的色谱图中如显示杂质峰，除溶剂峰外，各杂质峰面积总和不得大于对照溶液主峰的面积(0.9％)。结果如图2所示，

(3)杂质峰面积的计算公式：

(4)结果：

根据杂质峰面积的计算公式，分别计算图1和图2中的杂质峰面积百分比，图1和图2中2min之前出峰为溶剂峰。

由图1和图2可以看出，原料药左卡尼汀和注射用左卡尼汀成品均未检出杂质峰，表明本发明提供的制备方法并未引入更多杂质，制得的产品符合注射剂相关标准，缩短冻干时间对注射用左卡尼汀冻干粉剂的质量无影响。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。