本发明涉及医学
技术领域：
，尤其涉及一种含凉粉草提取物的药物及其在防治萎缩性胃炎中的应用。技术实现要素：慢性萎缩性胃炎(cag)是常见消化道疾病，属于慢性胃炎的一种，是指胃粘膜表面反复受到损害后导致的粘膜固有腺体萎缩，甚至消失，粘膜肌层常见增厚的病理改变。慢性萎缩性在中医理论中没有相应的疾病名称，古代医籍文献中没有“萎缩性胃炎”这一病名。古籍中虽然没有“萎缩性胃炎”这一病名，但是该病临床以胃脘痞满、痛或不痛、纳食减少为主要表现，多归属于中医“胃脘痛”、“痞证”等范畴。早在《素问太阴阳明论》篇云：“食饮不节，起居不时者，阴受之。阴受之则入五脏。入五脏则嗔满闭塞”。慢性萎缩性胃炎的病因病机复杂多变，至今未明确。现有报道的致病因素有慢性浅表性胃炎，慢性浅表性胃炎的病因不除，继续发展下去变成慢性萎缩性胃炎；遗传因素，慢性萎缩性胃炎病人的第一代亲属间，慢性萎缩性胃炎的发病率明显增高；金属接触，长期接触重金属的人易得cag，放射治疗溃癌或其它胖瘤时，可使胃粘膜损伤甚至萎缩；缺铁性贫血，因身体内缺铁使胃粘膜更新率受影响而容易发生炎症；体制因素：年龄大，随着年龄的增长，本病的发生率也随之增加，病变程度也越重，故也有人认为是中老年胃粘膜的退行性变，是一种“半生理”现象。幽门螺旋杆菌感染（hp），大量资料证明hp感染是胃部疾病发病的重要致病因子；此外饮食不当，高盐低维生素饮食，长期饮用浓茶、烈酒、咖啡，过热、过冷、过于粗糙的食物，可导致胃粘膜损伤；滥用药物，破坏粘膜屏障；吸烟，烟草中的尼古丁不仅可影响胃粘膜的血液循环，还可导致幽门括约肌功能紊乱，造成胆汁返流；中枢神经失调也是导致慢性萎缩性胃炎不可忽略的因素。在上述致病因素作用下，胃粘膜表面反复受到损害，久之导致胃分泌腺体萎缩或减少，胃粘膜变色、变薄、血管显露，形成慢性萎缩性胃炎。中医则认为慢性萎缩性胃炎与饮食积滞、情志失调、脾气虚弱、外邪内陷、痰浊郁阻相关。中西医在本病的治疗上，目前无特效的口服药物，主要以增强胃蠕动，促进胃排空，协助胃、十二指肠运动，防止胆汁返流，调节和恢复胃肠运动，增加胃粘膜更新，提高细胞再生能力，增强胃粘膜对胃酸的抵抗能力，达到保护胃粘膜的作用。但目前人们常服用的药物不但疗效差，而且会产生毒副作用，给患者带来不必要的伤害。因此本申请人通过实践经验，经过多年的研究提出了一种含凉粉草提取物的药物及其在防治萎缩性胃炎中的应用。
发明内容本发明的目的是为克服现有技术的不足，最大程度保留凉粉草的整体活性成分，提供一种含凉粉草提取物的药物及其在防治萎缩性胃炎中的应用。为了实现上述发明目的，所述凉粉草提取物作为所述药物的唯一活性成分，加入药学上可接受的辅料按常规方法制成口服剂，应用到防治萎缩性胃炎中。为达到以上技术目的，首先制备凉粉草提取物，包括以下步骤：将新鲜的凉粉草用清水洗净，自然风干后机械打碎；将打碎好的原料加入到体积比70％的乙醇水溶液中，调节ph值为5，超声波功率为800w，料液质量比为1:20，在温度为40℃条件下超声提取40min后过滤，得含提取物的滤液及滤渣；将滤渣重新加入到体积比80％的乙醇水溶液中，在60℃、ph值为4、超声波功率为1000w、料液质量比为1:15的条件下，超声浸提50min后过滤，合并步骤两次所得的滤液；将合并所得的滤液采用高速离心的方法进一步分离，离心速度为5000r/min，离心40min，分离出上层清液和沉淀；上层清液通过减压蒸馏浓缩，低温烘干，得到粗制凉粉草提取物。将粗制凉粉草提取物用去离子水溶解，加入大孔吸附树脂柱，控制流速在6ml/min，待吸附饱和后，先以去离子水冲洗树脂柱，洗去杂质，再用ph值为6，体积比为75％的乙醇水溶液洗脱；将得到的洗脱液进行减压蒸馏浓缩，得凉粉草提取物。作为一种优选，所述一种含凉粉草提取物的药物为临床上可以接受的口服制剂。所述口服制剂选自散剂、普通口服片剂、胶囊剂、软胶囊剂、丸剂、滴丸剂、微丸剂、颗粒剂、口腔崩解片和口腔速溶膜剂中的一种或多种。本发明所述口服制剂是指除活性成分以外，还包含在剂型中药学上可接受的辅料，包括但不仅限于稀释剂、润滑剂、分散剂、粘合剂、调节剂、增溶剂、抗氧剂、乳化剂、崩解剂等。所述稀释剂包括淀粉、糊精、预胶化淀粉、乳糖、微晶纤维素、硫酸钙、磷酸氢钙、碳酸钙、氧化镁、碳酸镁、氢氧化铝凝胶、β-环糊精、甘露醇、山梨醇、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、羟甲基纤维素钠中的一种或多种。所述粘合剂包括糖浆、阿拉伯胶、明胶、山梨醇、黄芪胶、纤维素及其衍生物(如微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素或羟丙甲基纤维素等)、明胶浆、糖浆、淀粉浆或聚乙烯吡咯烷酮等；填充剂包含乳糖、糖粉、糊精、淀粉及其衍生物、纤维素及其衍生物、无机钙盐(如硫酸钙、磷酸钙、磷酸氢钙、沉降碳酸钙等)、山梨醇或甘氨酸等。所述润滑剂包括微粉硅胶、硬脂酸镁、滑石粉、氢氧化铝、硼酸、氢化植物油、聚乙二醇等。所述崩解剂包括淀粉及其衍生物(如羧甲基淀粉钠、淀粉乙醇酸钠、预胶化淀粉、改良淀粉、羟丙基淀粉、玉米淀粉等)、聚乙烯吡咯烷酮或微晶纤维素等。所述湿润剂包括十二烷基硫酸钠、水或醇等。所述抗氧剂包括亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、二丁基苯酸等。所述调节剂包括盐酸、枸橼酸、氢氧化钾(钠)、枸橼酸钠及缓冲剂(包括磷酸二氧钠和磷酸氢二钠)等。所述乳化剂包括聚山梨酯-80、脂肪酸山梨坦、普流罗尼克f-68，卵磷酯、豆磷脂等；增溶剂包含吐温-80、胆汁、甘油等。本发明所述的应用，防止慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎的发生。治疗有需要的慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎患者。本发明有益效果：用凉粉草提取物作为有效成分来治疗胃炎，目前还未见报道，更没有将凉粉草作为唯一的活性成分防治萎缩性胃炎的报道。本发明采用对凉粉草独特的提取方法，最大程度保留凉粉草的整体活性成分，保持药效，无毒副作用，使用安全、方便。具体实施方式实施方式一：本发明的药物由凉粉草提取物22g、山梨醇12g、羧甲基纤维素钠17g、微晶纤维素34g、微粉硅胶4g、羧甲基淀粉钠7g、预胶化淀粉26g、十二烷基硫酸钠9g、二丁基苯酸8g、枸橼酸6g、卵磷酯9g制成，按常规方法制成片剂。实施方式二：本发明的药物由凉粉草提取物18g、山梨醇10g、羧甲基纤维素钠14g、微晶纤维素29g、微粉硅胶3g、羧甲基淀粉钠5g、预胶化淀粉18g、十二烷基硫酸钠7g、二丁基苯酸6g、枸橼酸4g、卵磷酯6g制成，按常规方法制成片剂。实施方式三：所述本发明的药物由凉粉草提取物15g、山梨醇8g、羧甲基纤维素钠11g、微晶纤维素24g、微粉硅胶2g、羧甲基淀粉钠3g、预胶化淀粉11g、十二烷基硫酸钠5g、二丁基苯酸4g、枸橼酸3g、卵磷酯4g制成，按常规方法制成片剂。本发明药物对慢性萎縮性胃炎大鼠模型的干预作用1、动物spf级wistar大鼠120只，雌雄各半，体重170-200g。2、受试药及配置方法称取按实施方式二制备的本发明药物30g，溶于50ml蒸馏水中制成浸膏，再用饮用水溶至600ml灌胃给药，按体重比例将成人用量换算成大鼠用量灌胃给药。摩罗丹：邯郸摩罗丹药业股份有限公司。批号：110413。规格：9g/55粒。按成人临床用量38g/日换算成大鼠等效用量4g/kg，即1.0ml/100g体重，灌胃给药。叶酸：天津飞鹰制药有限公司。批号1104007。规格：5mg/片。临床每日用量为15-30mg。按成人临床用量20mg/日换算成大鼠等效用量2mg/kg。取叶酸4片，用蒸馏水溶至100ml，灌胃给药1ml/100g体重。3、化学试剂mnng为日本tci公司产品，购于北京化学试剂公司。盐酸雷尼替丁胶囊：中诺药业（石家庄）有限公司生成，批号100902256。无水乙醇：北京化工厂，批号20100901。4、仪器jm20002电子天平、labofuge400r离心机、nikoneclipse80i焚光显微镜、ph计，雷磁-phs-3c、分光光度计（alpha-1502型紫外分光光度计）、图像分析软件（imagepro-plus7.0)。5、模型的制备大鼠按体重随机分为对照组大鼠10只（雌雄各5只）和造模大鼠（雌雄各55只），饲养于通风、光照规律的动物房里，室温23-27℃，湿度50%-70%。对照组大鼠每天灌胃蒸馏水15ml/kg，造模大鼠每日饮用110ug/ml·mnng溶液，每日灌胃雷尼替丁溶液0.04g/kg，每周禁食1次，每次20h，禁食第2天灌胃体积分数45%的乙醇1ml/只，当天不再灌胃雷尼替丁溶液，连续造模15周，造模期间大鼠共死亡6只。6、分组与给药第15周将对照组大鼠和造模大鼠各随机取2只，杀检，观察胃组织病理学变化，确认造模成功。第16周开始将剩余造模大鼠102只按体重随机分为模型组20只、摩罗丹组20只、叶酸组20只、本发明药物组42只。正常对照组和模型组每日灌胃蒸馏水，其它各组灌胃给予相应的药物10ml/kg，给药7周。实验期间每周观察大鼠的体重及进食饮水量，给药期间大鼠共死亡15只，模型组死亡9只、摩罗丹组死亡2只、叶酸组死亡4只、本发明药物组无死亡。7、方法第21周，大鼠禁食8小时，不禁水，乙醚麻醉，开腹结扎幽门，记录结扎时间，缝合腹壁，4小时后10%水合氯醛麻醉，结扎贲门，取胃，收集胃液，用ph计测定胃酸，再将胃液用0.04mol/l的盐酸溶液稀释50倍，用改良安宋氏法测定胃蛋白酶活性，分光光度计读取结果；沿胃大弯剪开，除去胃容物，生理盐水冲洗干净，展开照相，做大体观察，胃窦部组织条状取材，用10%中性福尔马林液固定，苏木精-伊红染色作病理检查及免疫组化。8、结果造模期间，与对照组相比，模型组大鼠毛发松散，较无光泽，进食、饮水量均减少，体重较轻。给药6周后，模型组体重与对照组相比仍有明显偏轻；本发明药物组体重有很好恢复，见下表。组别日给药剂量雌鼠体重雄鼠体重空白组-332.1±12.5442.9±21.1模型组-244.4±12.5340.2±17.4摩罗丹组4.0g/kg276.5±13.7389.4±19.1叶酸组2.0mg/kg269.7±15.1378.8±14.7本发明药物0.5g/kg319.8±13.4431.8±19.79、本发明药物对cag大鼠模型胃酸和胃蛋白酶活性的影响。给药6周后，与对照组相比，模型组胃酸值偏高，但无统计学差异，结果见下表。组别胃酸ph值胃蛋白酶活性（u）空白组3.61±1.31258.23±71.65模型组3.63±1.11209.56±36.23摩罗丹组3.45±1.54289.43±42.38叶酸组3.10±1.21365.32±67.76本发明药物2.50±0.65375.59±62.1710、本发明药物对cag大鼠胃粘膜病理的作用。组别给药剂量胃粘膜（um）粘膜肌层（um）空白组-769.92±98.43243.47±43.89模型组-658.12±86.56356.14±56.34摩罗丹组4.0g/kg742.43±69.72341.43±56.77叶酸组2.0mg/kg814.35±101.56269.70±47.58本发明药物0.5g/kg825.77±86.41240.22±32.76实验结果表明与空白组相比，模型组大鼠胃酸ph值无明显改变；胃蛋白酶是胃液中主要的消化酶，是由胃腺的主细胞产生的。在安静状态下，主细胞以少量恒定的速率将胃蛋白酶原分泌入胃腔。当细胞受到刺激时，酶原颗粒将迅速大量释放。胃蛋白酶原在胃酸的作用下，裂解生成胃蛋白酶，这种裂解作用仅在ph为5以下进行，且以ph值1.8-3.5之间为宜，当ph值升至6以上时，胃蛋白酶即失去活性。实验结果表明cag大鼠胃蛋白酶活性降低，本发明的药物能提高胃蛋白酶活性，与模型组相比有显著性差异。实验结果显示大鼠造成胃萎缩胃炎模型后，给予本发明药物后，具有改善胃萎缩病变，降低大鼠胃窦区褶皱处粘膜肌层厚度值，提高胃粘膜厚度/粘膜肌层厚度值，显示有良好的治疗胃萎缩性胃炎作用。临床试验1、一般资料我院在2010年3月-2016年5月间，共收集慢性萎缩性胃炎患者160例，均来自消化科门诊，年龄23-65岁，男性68例，女性52例，病程0.8-5年，随机分为治疗组和对照组，各组均为80例患者。2、诊断标准：胃镜检查胃粘膜颜色变淡；粘膜下血管透见；粘膜皱襞细小甚至消失；当萎缩性胃炎伴有腺体颈部过度增生或肠上皮化生时，粘膜表面粗糙不平，呈颗粒状或结节状，有时可见假息肉形成，而粘膜下血管显露的特征常被掩盖；萎缩粘膜脆性增加，易出血，并可有糜烂灶；萎缩性胃炎可同时伴有慢性浅表性胃炎的表现。符合上述各项诊断标准，年龄大于18岁的患者。排除标准：妊娠期、哺乳期妇女；合并严重心肺肝肾疾病者。3、试验方法治疗组患者口服本发明按照实施方式二制得的片剂，每日3次。对照组按常规方法服用摩罗丹。疗程5周。4、疗效标准治愈：临床症状消失，胃镜复查慢性炎性反应好转达轻度，活检组织病理证实胃镜所见，腺体萎缩消失。好转：临床症状明显好转，胃镜复查慢性炎性反应好转，活检组织病理证实胃镜所见，腺体萎缩减轻。无效：临床症状无改善，胃镜复查慢性炎性反应无改变5、治疗结果治疗组80例患者中治愈65例，好转12例，无效3例，总有效率96.25％。对照组80例患者中治愈45例，好转20例，无效15例，总有效率81.25％。治疗期间对照组有8例出现轻度腹泻，治疗组未见不良反应。可见本发明药物安全有效，具有推广应用的价值。典型病例刘某，男，43岁，临沂人，2014年5月8日首诊。症状：心悸、胸闷时发3个多月，静平动发，或动甚加重。做胃镜检查，第二天心悸无时，少动气急、胸闷、心慌，伴失眠、头昏、乏力。经常胃脘灼烧、嘈杂、纳差、大小便正常，口不干苦，而喜温。神疲消瘦，面色不华，行动迟缓，舌淡有紫色，舌苔薄腻，脉细涩无力。胃镜显示：慢性全胃炎；诊断：萎缩性胃炎；服用本发明的药物后，胃镜及病理检查明显好转，继续连服，身体完全恢复健康。当前第1页12