本发明公开了一种银杏叶皮提取物的制备及其在防治酒精性肝损伤药物中的应用，属于中医药
技术领域：
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：肝脏疾病一直是临床上常见的严重危害人类健康的疾病之一，近年来随着药物滥用，药源性肝损伤发病呈逐年增加趋势；而酒精性肝损伤，同样是国内外不可忽视的临床疾病之一。在西方国家，酒精中毒是肝硬化的主要病因；在我国，酒精性肝病的发病率也在日益增加，是我国常见的肝脏疾病之一，严重危害人民健康。因此，对酒精性肝损伤的了解及治愈变得尤为重要。技术实现要素：本发明的目的是：提供一种银杏叶皮提取物的制备方法及其在防治酒精性肝损伤药物中的应用。本发明是通过下述的技术方案来实现的：一种银杏叶皮提取物的制备方法，包括如下步骤：（1）取晒干的银杏叶皮，去核，适取量加水煎煮两次，过滤，合并两次滤液；（2）所得滤液减压浓缩，放冷后在搅拌下加乙醇使含醇量达60％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，加水稀释，过滤；（3）将所得滤液上大孔吸附树脂，依次用水、乙醇洗脱，收集洗脱液，过滤，减压浓缩，真空干燥后得银杏叶皮提取物。第1步中，加水煎煮，第一次加8倍量的水，煮沸2小时，第二次加6倍量的水，煮沸1小时。第2步中，加水稀释至相对密度1.05～1.2(60℃)。第3步中，洗脱剂水用量是5～7倍量柱体积、乙醇是8～10倍量柱体积的40％乙醇。由上述方法制备得到的银杏叶皮提取物。上述银杏叶皮提取物在制备防治酒精性肝损伤药物中的应用。上述银杏叶皮提取物在制备抑制哺乳动物酒精诱导的肝组织中丙二醛合成、血清alt、血清ast、血清中胆固醇或者血清中甘油三酯的药物中的应用。本发明的有益效果在于：本发明首次公开了去核银杏叶皮提取物可用于制备防治酒精性肝损伤药物。实验证明，采用本发明制备的银杏叶皮提取物能够有效减缓酒精诱导的小鼠肝脏体重指数升高，对酒精诱导的小鼠血清tg、tc、alt、ast水平升高均具有明显的抑制作用，并且能够有效抑制酒精诱导的小鼠肝组织中丙二醛的合成。具有较好的防治酒精性肝损伤的作用。具体实施方式下面结合具体实施例对本发明作更进一步的说明，以便本领域的技术人员更了解本发明，但并不因此限制本发明。一、银杏叶皮提取物的制备第1步，取晒干的银杏叶皮，去核，取适量加水煎煮两次，过滤，合并两次滤液；第2步，所得滤液减压浓缩，放冷后在搅拌下加乙醇使含醇量达60％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，加水稀释，过滤；第3步，将所得滤液上大孔吸附树脂，依次用水、乙醇洗脱，收集洗脱液，过滤，减压浓缩，真空干燥后得银杏叶皮提取物。第1步中，加水煎煮，第一次加8倍量的水，煮沸2小时，第二次加6倍量的水，煮沸1小时。第2步中，加水稀释至相对密度1.05～1.2(60℃)。第3步中，洗脱剂水用量是5～7倍量柱体积、乙醇是8～10倍量柱体积的40％乙醇。二、银杏叶皮提取物应用于防治酒精性肝损伤的实验方法和结果2.1银杏叶皮提取物对酒精诱导的小鼠肝脏体重指数升高的抑制作用取18-22g昆明种小鼠50只，随机分为5组，每组10只，分别为对照组、模型组、高剂量给药组（按600mg·kg-1剂量灌胃给药）、中剂量给药组（按400mg·kg-1剂量灌胃给药）、低剂量给药组（按200mg·kg-1剂量灌胃给药）。适应性喂养5天，实验期间小鼠自由进食普通饲料和饮水，给药2h后一次性给予酒精4.8g/kg，禁食不禁水。16h后，将小鼠处死，分离肝脏，用预冷的pbs（0.1m，ph=7）溶液漂洗两次，再用滤纸将脏器表面的水分吸干，称重，计算脏器指数。计算公式如下：脏器指数（%）=脏器重量（g）/体重（g）*100%，结果如下表所示。银杏叶皮提取物对酒精所致肝脏指数升高的抑制作用##p<0.01，与正常对照组相比；*p<0.05，与模型组相比；（n=10；x±sd）测试结果表明，本发明制备的银杏叶皮提取物能明显抑制酒精引起的小鼠肝脏体重指数升高。2.2银杏叶皮提取物对酒精诱导的小鼠血清tg、tc水平升高的抑制作用取18-22g昆明种小鼠50只，随机分为5组，每组10只，分别为对照组、模型组、高剂量给药组（按600mg·kg-1剂量灌胃给药）、中剂量给药组（按400mg·kg-1剂量灌胃给药）、低剂量给药组（按200mg·kg-1剂量灌胃给药）。适应性喂养5天，实验期间小鼠自由进食普通饲料和饮水，给药2h后一次性给予酒精4.8g/kg，禁食不禁水，16h后眼球取血，3000rpm×10min制备血清，测定tg、tc指标。如下表所示。银杏叶皮提取物对酒精所致tc、tg升高的抑制作用#p<0.01，与正常对照组相比；*p<0.05，与模型组相比；（n=10；x±sd）测试结果表明，本发明制备的银杏叶皮提取物能明显抑制酒精引起的小鼠血清中胆固醇(tc)水平的升高，亦可抑制酒精引起的小鼠血清中甘油三酯（tg）水平的升高。2.3银杏叶皮提取物对酒精诱导的小鼠血清alt、ast水平升高的抑制作用取18-22g昆明种小鼠50只，随机分为5组，每组10只，分别为对照组、模型组、高剂量给药组（按600mg·kg-1剂量灌胃给药）、中剂量给药组（按400mg·kg-1剂量灌胃给药）、低剂量给药组（按200mg·kg-1剂量灌胃给药）。适应性喂养3-5天，实验期间小鼠自由进食普通饲料和饮水，给药2h后一次性给予酒精4.8g/kg，禁食不禁水，16h后眼球取血，3000rpm×10min制备血清，测定alt、ast指标，实验结果下表所示。银杏叶皮提取物对酒精所致alt、ast水平升高的抑制作用##p<0.01，与正常对照组相比；*p<0.05，与模型组相比；（n=10；x±sd）测试结果表明，本发明制备的黄果皮提取物能明显抑制酒精引起的小鼠血清中谷丙转氨酶（alt）、谷草转氨酶（ast）水平的升高。即表明黄果皮提取物能够保护肝细胞，减轻炎性反应。2.4银杏叶皮提取物对肝组织中丙二醛合成的抑制作用取18-22g昆明种小鼠50只，随机分为5组，每组10只，分别为对照组、模型组、高剂量给药组（按600mg·kg-1剂量灌胃给药）、中剂量给药组（按400mg·kg-1剂量灌胃给药）、低剂量给药组（按200mg·kg-1剂量灌胃给药）。适应性喂养5天，实验期间小鼠自由进食普通饲料和饮水，给药2h后一次性给予酒精4.8g/kg，禁食不禁水，6h后取小鼠肝组织，制备10%肝组织匀浆液，测定肝脏中mda含量。实验结果下表所示。银杏叶皮提取物对肝组织中mda合成的抑制作用组别剂量mg/kgmda(nm/gprotein)对照组-----68.59±16.37模型组-----142.13±37.66#高剂量60087.13±21.34*中剂量40093.78±22.94*低剂量20092.11±19.37*#p<0.05，与正常对照组相比；*p<0.05，与模型组相比；（n=10；x±sd）.测试结果表明，本发明的银杏叶皮提取物能明显抑制酒精引起的肝脏中丙二醛（mda）的合成。当前第1页12