一种异海松酸在制备抗肿瘤药物中的应用的制作方法

本发明属于医药领域，涉及抗肿瘤药物的发现与开发，具体涉及胆囊癌和多发性骨髓瘤药物的发现与开发。

背景技术：

恶性肿瘤是当今威胁人类健康的主要因素之一，在我国其病死率呈逐年上升趋势，且已成为我国居民死亡原因之首。目前，治疗恶性肿瘤的方法主要有手术、放化疗以及靶向治疗。

胆囊癌是一种来源于胆囊上皮细胞的恶性肿瘤，其易转移、预后差、早期症状不典型，临床上大多数患者确诊时已为中晚期。目前，胆囊癌治疗方法有限，外科手术切除是唯一有效的根治方法，因此寻找一种高效、低毒且副作用小的治疗药物迫在眉睫。

多发性骨髓瘤是以骨髓中浆细胞大量异常增殖为特征的一种血液系统常见恶性肿瘤，老年人多发，近年来发病率逐渐上升，且由于我国人口老龄化日益严重，此病对我国老年人健康的影响不容忽视。虽然目前针对多发性骨髓瘤的治疗手段较多，但仍无法治愈。患者年龄较高，对化疗药物的副作用难以忍受，自体干细胞移植疗法也只是使3％～10％的患者超过10年生存期。因此，开发高效且毒副作用小的药物较为迫切。

天然产物的化学多样性无与伦比，是生物活性小分子筛选的理想选择。从历史上看，天然产物一直是新药研发最成功的来源，据权威机构统计，从1981年至今，99种小分子抗癌药物中的79种是以天然产物为基础研制成功的。天然产物已被证明可以成功的调控某些孤立的但又很重要的靶点，如一系列抗菌靶点，特别是蛋白质与蛋白质相互作用。因此，许多研究人员认为天然产物及其衍生物是研究和操纵蛋白质功能的独特工具。

由于天然产物在新药研发事业中不可忽视的作用和无法替代的地位，很多科研人员都尝试从天然产物中寻找新的成药化合物。

海通松香烷二萜d(cas号：308327-22-2)、海通松香烷二萜e(cas号：308327-24-4)、海通松香烷二萜f(cas号：308327-26-6)、海通松香烷二萜g(cas号：308327-28-8)、海通松香烷二萜h(cas号：308327-30-2)、奇任醇(cas号：52659-56-0)、12-羟基奇任醇(cas号：203927-67-7)、19-异海松醇(cas号：83692-05-1)、海松二烯酸(cas号：19889-23-7)、异海松酸(cas号：5835-26-7)、9(11),15-异海松二烯-3β,19-二醇(cas号：39702-18-6)为11种化学结构较为相似的天然产物，其化学结构如下所示。

现有没有公开过上述结构的化合物在治疗胆囊癌和多发性骨髓瘤中的应用。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供多种不同天然产物在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明目的通过下述技术方案实现：

如下结构的化合物用于制备抗肿瘤药物的医药用途。

其中，r＝h，所述化合物为海通松香烷二萜e；

r＝oh，所述化合物为海通松香烷二萜f；

所述肿瘤为胆囊癌或多发性骨髓瘤。

一种抗肿瘤药物，其活性成分为海通松香烷二萜e或海通松香烷二萜f。

进一步地，所述肿瘤为胆囊癌。

进一步地，所述肿瘤为多发性骨髓瘤。

化合物海通松香烷二萜g用于制备抗肿瘤药物的医药用途，海通松香烷二萜g的化学结构式如下。

所述肿瘤为胆囊癌或多发性骨髓瘤。

一种抗肿瘤药物，其活性成分为海通松香烷二萜g。

进一步地，所述肿瘤为胆囊癌。

进一步地，所述肿瘤为多发性骨髓瘤。

化合物海通松香烷二萜h用于制备抗肿瘤药物的医药用途，海通松香烷二萜h的化学结构式如下。

所述肿瘤为胆囊癌或多发性骨髓瘤。

一种抗肿瘤药物，其活性成分为海通松香烷二萜h。

进一步地，所述肿瘤为胆囊癌。

进一步地，所述肿瘤为多发性骨髓瘤。

如下结构的化合物用于制备抗肿瘤药物的医药用途。

其中，r＝h，所述化合物为奇任醇，所述肿瘤为胆囊癌或多发性骨髓瘤；

r＝oh，所述化合物为12-羟基奇任醇，所述肿瘤为多发性骨髓瘤。

一种抗肿瘤药物，其活性成分为奇任醇。

进一步地，所述肿瘤为胆囊癌。

进一步地，所述肿瘤为多发性骨髓瘤。

一种抗肿瘤药物，其活性成分为奇任醇12-羟基奇任醇。

进一步地，所述肿瘤为多发性骨髓瘤。

化合物19-异海松醇用于制备抗肿瘤药物的医药用途，19-异海松醇的化学结构式如下。

所述肿瘤为胆囊癌或多发性骨髓瘤。

一种抗肿瘤药物，其活性成分为19-异海松醇。

进一步地，所述肿瘤为胆囊癌。

进一步地，所述肿瘤为多发性骨髓瘤。

化合物海松二烯酸用于制备抗肿瘤药物的医药用途，海松二烯酸的化学结构式如下。

所述肿瘤为胆囊癌或多发性骨髓瘤。

一种抗肿瘤药物，其活性成分为海松二烯酸。

进一步地，所述肿瘤为胆囊癌。

进一步地，所述肿瘤为多发性骨髓瘤。

化合物异海松酸用于制备抗肿瘤药物的医药用途，异海松酸的化学结构式如下。

所述肿瘤为胆囊癌或多发性骨髓瘤。

一种抗肿瘤药物，其活性成分为异海松酸。

进一步地，所述肿瘤为胆囊癌。

进一步地，所述肿瘤为多发性骨髓瘤。

化合物9(11),15-异海松二烯-3β,19-二醇用于制备抗肿瘤药物的医药用途，9(11),15-异海松二烯-3β,19-二醇的化学结构式如下。

所述肿瘤为胆囊癌。

一种抗肿瘤药物，其活性成分为9(11),15-异海松二烯-3β,19-二醇。

进一步地，所述肿瘤为胆囊癌。

有益的效果：

本发明发现，海通松香烷二萜e、海通松香烷二萜f、海通松香烷二萜g、海通松香烷二萜h、奇任醇、19-异海松醇、海松二烯酸、异海松酸对胆囊癌snu-308细胞、多发性骨髓瘤arh-77细胞均具有优异的抑制作用；12-羟基奇任醇仅对多发性骨髓瘤arh-77细胞具有优异的抑制作用；9(11),15-异海松二烯-3β,19-二醇仅对胆囊癌snu-308细胞具有优异的抑制作用；海通松香烷二萜d对胆囊癌snu-308细胞、多发性骨髓瘤arh-77细胞均无明显抑制。

附图说明

图1为测试化合物的化学结构对比。

具体实施方式

一、试验材料

海通松香烷二萜d(cas号：308327-22-2)、海通松香烷二萜e(cas号：308327-24-4)、海通松香烷二萜f(cas号：308327-26-6)、海通松香烷二萜g(cas号：308327-28-8)、海通松香烷二萜h(cas号：308327-30-2)、奇任醇(cas号：52659-56-0)、12-羟基奇任醇(cas号：203927-67-7)、19-异海松醇(cas号：83692-05-1)、海松二烯酸(cas号：19889-23-7)、异海松酸(cas号：5835-26-7)、9(11),15-异海松二烯-3β,19-二醇(cas号：39702-18-6)购买或自制，纯度不低于98％。

胆囊癌snu-308细胞株、多发性骨髓瘤arh-77细胞株由中国药科大学天然药物活性组分与药效国家重点实验室赠送。

dmem培养液、胎牛血清为gibco公司产品。

二、试验方法

1、肿瘤细胞培养

snu-308细胞、arh-77细胞用dmem培养液(含10％胎牛血清和1％青-链霉素)培养，于37℃、5％co2细胞培养箱中常规培养。

2、mtt法测定化合物抗肿瘤活性

采用mtt(四唑盐)比色法测试了各化合物对snu-308细胞、arh-77细胞的增殖抑制活性，然后根据化合物对肿瘤细胞增殖抑制活性的ic50值，评价化合物的体外抗肿瘤效果。

具体操作方法如下：

首先，将snu-308、arh-77肿瘤细胞株接种到含有dmem+10％胎牛血清培养基的96孔板中，37℃下于5％co2条件下培养过夜。次日，向培养板中加入培养基稀释的梯度浓度的待测化合物及空白对照处理72h，再向每孔加入浓度为5mg/ml的mtt试剂20μl，继续培养4h。待到甲瓒形成后，吸去上清液，再向每孔中加入150μldmso，振荡使形成的甲瓒充分溶解，采用酶标仪测定570nm波长下的吸光度值(od570)。最后，根据抑制率(％)＝(空白对照组od570－实验组od570)/空白对照组od570×100％，计算各化合物对snu-308、arh-77肿瘤细胞的抑制率，并采用graphpad软件拟合求得ic50值。

三、试验结果

各化合物对胆囊癌snu-308细胞、多发性骨髓瘤arh-77细胞的抑制活性如表1所示(ic50值为三次试验的平均值±sd)。

表1各化合物对胆囊癌snu-308细胞、多发性骨髓瘤arh-77细胞抑制的ic50值

上述试验结果表明，海通松香烷二萜e、海通松香烷二萜f、海通松香烷二萜g、海通松香烷二萜h、奇任醇、19-异海松醇、海松二烯酸、异海松酸对胆囊癌snu-308细胞、多发性骨髓瘤arh-77细胞均具有优异的抑制作用；12-羟基奇任醇仅对多发性骨髓瘤arh-77细胞具有优异的抑制作用；9(11),15-异海松二烯-3β,19-二醇仅对胆囊癌snu-308细胞具有优异的抑制作用；海通松香烷二萜d对胆囊癌snu-308细胞、多发性骨髓瘤arh-77细胞均无明显的抑制作用。