本发明涉及化工工艺提取领域，尤其涉及一种银杏酚酸的提取工艺。
背景技术：
：银杏酚酸属漆酚类物质，其为6-烷基或6-烯基水杨酸的衍生物，广泛存在于银杏叶、外种皮和种仁中，主要存在于银杏的外种皮内，可分为银杏酸(白果酸、氢化白果酸、氢化白果亚酸)、银杏酚、银杏二酚。银杏酚酸具有免疫毒性、细胞毒性和致敏性，是银杏提取物及其制剂中引起中毒的主要物质。银杏外种皮是银杏种子硬壳外面的部分，俗称白果衣胞，其质量占整个种子的70％，一般只有在产地才能得到，而产地在采收白果时，往往将其作为废料丢弃，这不仅浪费资源，又污染了环境。技术实现要素：针对上述存在的问题，本发明旨在提供一种从银杏外种皮、银杏叶工业废渣或银杏叶工业废液中提取银杏酚酸的提取工艺。为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案如下：一种银杏酚酸的提取工艺，其特征在于，包括以下步骤：s1：材料的选择以及预处理；所述材料包括银杏原材料和大孔树脂；s2：标准曲线的制作；精密称取10.00mg的白果新酸，用甲醇溶解并定容于100ml的容量瓶中制得标准液；分别量取1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ml的标准液置于25ml的容量瓶中，加甲醇定容，于310nm波长处测定吸光度，计算吸光度a与白果新酸浓度c的回归方程；s3：银杏酚酸提取液的制备；称取一定量的预处理后的银杏原材料置于提取容器中，加入乙醇进行回流提取，对提取液进行过滤，滤液备用；s4：银杏总酚酸的提取：在银杏酚酸提取液中按银杏原材料：树脂质量＝1:1的比例加入预处理后的大孔树脂，室温下静置12h，之后40℃旋转蒸发，回收乙醇后，加入蒸馏水，于60℃下振荡12h，转入装有一半体积的树脂柱，用蒸馏水进行冲洗，至洗出液澄清且无可见固体物为止；之后以90％乙醇洗脱，至洗脱液无色为止；乙醇洗脱液在60℃以下旋转蒸发，回收乙醇，剩余物60℃真空干燥，得银杏外种皮总酚酸；s5：测定银杏总酚酸中酚酸的含量；s6：测定银杏原材料中酚酸的含量及提取率。进一步的，步骤s1中银杏原材料包括银杏外种皮、银杏叶工业废渣和银杏叶工业废液；具体的，所述银杏外种皮和所述银杏叶工业废渣的预处理具体操作为60℃真空干燥，机械粉碎，过40目筛，置于干燥器中备用；所述银杏叶工业废液的预处理具体操作为将废液用0.45μ膜过滤，滤液真空旋转蒸发，回收有机溶剂后，剩余液体备用。优选的，步骤s1中银杏原材料为银杏外种皮。进一步的，步骤s1中大孔树脂的预处理具体操作为将各种大孔树脂用95％的乙醇浸泡24h，以95％的乙醇湿法装柱，用95％的乙醇洗至流出液中加入质量比为1:3的蒸馏水后无白色浑浊，再用大量蒸馏水洗至无醇味，倾出，于真空干燥厢内60℃烘干备用。进一步的，所述大孔树脂可以是ab-8大孔树脂、hpd-100大孔树脂、d101大孔树脂、x-5大孔树脂、nka-9大孔树脂、lsa-20大孔树脂、lsa-30大孔树脂、d201大孔树脂、sp70大孔树脂或者ztc-1大孔树脂。优选的，所述大孔树脂为d101大孔树脂。进一步的，步骤s3中加入的乙醇浓度为40-80％，加入的乙醇量为1：5-10，回流提取3次，每次提取2-4h，提取温度为40-60℃。优选的，步骤s3中加入的乙醇浓度为80％，加入的乙醇量为1：8，回流提取3次，每次提取4h，提取温度为60℃。进一步的，银杏总酚酸的得率为0-7％，提取率为90-95％，提取物中酚酸的含量为35-40％。进一步的，银杏外种皮中银杏总酚酸的得率为7.0，提取率为92％，提取物中酚酸的含量为39.5％。本发明的有益效果是：1、本发明中对银杏酚酸的提取工艺简单，成本低廉，溶剂损耗少，分离效果好，对银杏酚酸进行提取的得率高达7％，提取率高达92％，提取物中酚酸的含量高达39.5％；2、由于银杏酚酸不溶于水，故在用大孔树脂纯化时，不能将其醇提取液回收乙醇后的水溶液直接上树脂柱，因这时酚酸已经大量析出，上柱用水冲淋时根本不能和水一起流过树脂柱，因而也就不能被树脂吸附。本研究所提出的提取方法和过程即有效解决了上述问题。具体实施方式为了使本领域的普通技术人员能更好的理解本发明的技术方案，下面结合实施例对本发明的技术方案做进一步的描述。实施例一：银杏外种皮中酚酸的提取银杏外种皮中酚酸的提取步骤为：s1：材料的选择以及预处理将采集到的银杏外种皮在dzf-6021真空干燥箱中60℃真空干燥，机械粉碎，过40目筛，置于干燥器中备用；将ab-8大孔树脂、hpd-100大孔树脂、d101大孔树脂、x-5大孔树脂、nka-9大孔树脂、lsa-20大孔树脂、lsa-30大孔树脂、d201大孔树脂、sp70大孔树脂和ztc-1大孔树脂10中大孔树脂用95％的乙醇浸泡24h后，以95％的乙醇湿法装柱，用95％的乙醇洗至流出液中加入质量比为1:3的蒸馏水后无白色浑浊，再用大量蒸馏水洗至无醇味，倾出，于真空干燥厢内60℃烘干备用。s2：标准曲线的制作精密称取10.00mg的白果新酸，用纯甲醇溶解并定容于100ml的容量瓶中制得标准液；分别量取1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ml的标准液置于25ml的容量瓶中，加纯甲醇定容，于310nm波长处测定吸光度，计算吸光度a与白果新酸浓度c的回归方程；测定数据如表1所示，吸光度a与白果新酸浓度c之间的回归方程为a＝21.15c-0.0374。表1不同浓度的白果新酸吸光度测定结果表s3：银杏酚酸提取液的制备称取100g银杏外种皮粉末置于1000ml圆底烧瓶中，加入80％乙醇(1:10)60℃回流提取4h，提取3次，合并提取液，用0.45μ膜过滤，滤液备用。首先，确定最佳吸附树脂。分别精密称取上述s1中十种预处理的60℃干燥至恒重的树脂各0.1g于500ml烧杯中，分别加入200ml样品溶液，置于振荡器中，室温下振荡、挥发至溶液无醇味后用大量蒸馏水反复多次清洗直至溶液澄清并无任何其它沉淀颗粒，之后完全转移过滤于60℃干燥恒重的带滤纸的漏斗中，并再次用蒸馏水冲洗几次，于60℃干燥恒重后称重，计算树脂吸附后的质量和其相应的饱和吸附量。将上述干燥后的各种吸附后的树脂置于500ml具塞三角瓶中，分别加入200ml80％乙醇，置于振荡器中，室温下振荡24h，倾去上层液体，再用200ml80％乙醇清洗1次，之后完全转移过滤于60℃干燥恒重的带滤纸的漏斗中，于60℃干燥恒重后称重，计算树脂解附后的质量和其相应的解吸率。结果见表2。比吸附量超过80mg/g的树脂有x-5、sa-20、lsa-30、d101，其比吸附量分别为80.040mg/g、83.640mg/g、85.830mg/g、82.460mg/g，其解吸率分别为90.042％、88.176％、90.621％、98.666，综合考虑比吸附量和解吸率，d101树脂为最佳吸附树脂。表2静态吸附时各种树脂的饱和吸附量与解吸率然后，为考察乙醇浓度(a)、乙醇加入量(b)、提取时间(c)和提取温度(d)这4个因素对银杏外种皮中总酚酸提取的影响，每个因素设3个水平，见表3，利用正交表l9(34)进行试验设计和相应试验，试验设计和结果见表4。每个试验准确称取银杏外种皮粉末50g，按表3所示试验方案进行提取，提取3次，合并提取液，用0.45μ膜过滤。准确量取滤液1ml，挥干液体，用甲醇溶解并用甲醇定容于5ml容量瓶中，按s2中“标准曲线的制作”测定酚酸浓度，进一步计算原提取液中总酚酸的量。极差分析发现，4个因素的主次顺序为c＞a＞d＞b，而最优组合为a3b2c3d3，即提取时乙醇浓度为80％，乙醇加入量为1:8，每次提取4小时，提取温度为60℃。表3因素水平表表4试验方案及试验结果s4：银杏总酚酸的提取在s3中银杏酚酸提取液中按银杏原材料：树脂质量＝1:1的比例加入预处理后的大孔树脂，室温下静置12h，之后40℃旋转蒸发，回收乙醇后，加入蒸馏水，于60℃下振荡12h，转入装有一半体积的树脂柱，用蒸馏水进行冲洗，至洗出液澄清且无可见固体物为止；之后以90％乙醇洗脱，至洗脱液无色为止；乙醇洗脱液在60℃以下旋转蒸发，回收乙醇，剩余物60℃真空干燥，得银杏外种皮总酚酸，标为样品i。实施例二：银杏叶工业废渣中总酚酸的提取s1中将银杏叶工业废渣在dzf-6021真空干燥箱中60℃真空干燥，机械粉碎，过40目筛，置于干燥器中备用；其他步骤与实施例一中均相同，总酚酸提取物标为样品ii。实施例三：银杏叶工业废液中总酚酸的提取s1中将银杏叶工业废液首先用0.45μ膜过滤，滤液真空旋转蒸发，回收有机溶剂后，剩余液体备用；s3中将s1剩余的液体加入95％乙醇，调整浓度至80％，60℃回流4h，提取3次，合并提取液，用0.45μ膜过滤，滤液备用；其他步骤与实施例一中也相同，总酚酸提取物标为样品iii。结合实施例一、实施例二和实施例三中的总酚酸提取物样品，进行步骤s5和s6的测定。s5：总酚酸提取物中酚酸含量的测定分别称取总银杏酚酸i、ii、iii各10.0mg，用甲醇溶解并定容于200ml容量瓶中，于310nm波长处测定吸光度，重复3次，得平均吸光度，根据s2中的回归方程可得c＝(a+0.0374)/21.15，计算各样品银杏酚酸含量，结果见表5。表5总酚酸提取物中酚酸含量样品总银杏酚酸i总银杏酚酸ii总银杏酚酸iii吸光度a(平均值)0.380.400.35浓度c(mg/ml)0.019740.020680.01832样品酚酸含量(％)39.48041.36236.640s6：测定银杏原材料中酚酸的含量及提取率准确称取银杏外种皮/工业废渣粉末10g(废液量取10ml)，按上述提取过程提取，提取3次，合并提取液，用0.45μ膜过滤。准确量取滤液1ml，挥干液体，用甲醇溶解并用甲醇定容于5ml容量瓶中，按s2“标准曲线的制作”中的回归方程测定酚酸浓度，计算酚酸含量。结果见表6。表6原材料中酚酸含量及提取率原材料银杏工业废液银杏工业废渣银杏外种皮得率(％)0.4800.5806.966提取物中酚酸含量(％)36.64041.36239.480原料中酚酸含量(％)0.1760.2402.750提取率(％)--92.01银杏外种皮、银杏工业废渣、银杏工业废液三者所提取的总酚酸中酚酸含量很接近，但由于后二者原材料中酚酸含量和得率都极低，因而，从经济角度考虑，大量提取总酚酸制备植物源农药时还是应当以资源丰富、酚酸含量和得率都很高的外种皮为提取原料。由于银杏酚酸不溶于水，故在用大孔树脂纯化时，不能将其醇提取液回收乙醇后的水溶液直接上树脂柱，因这时酚酸已经大量析出，上柱用水冲淋时根本不能和水一起流过树脂柱，因而也就不能被树脂吸附。本研究所提出的提取方法和过程即有效解决了上述问题，总酚酸的得率近7％，提取率高于90％，而提取物中酚酸含量也高达近40％。以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。当前第1页12