牛磺罗定在制备抗HPV病毒药物中的应用的制作方法

文档序号:22117296发布日期:2020-09-04 15:43阅读:1077来源:国知局

本发明涉及医药技术领域,具体涉及一种牛磺罗定在制备抗hpv病毒药物中的应用。



背景技术:

人乳头瘤病毒(hpv)是一种属于乳多空病毒科的乳头瘤空泡病毒a属,是球形dna病毒,能引起人体皮肤黏膜的鳞状上皮增殖。表现为寻常疣、生殖器疣(尖锐湿疣)等症状。随着性病中尖锐湿疣的发病率急速上升和宫颈癌、肛门癌等的增多,hpv感染越来越引起人们的关注。

现有的针对hpv感染的疾病治疗的方式主要包括:物理治疗、药物治疗、免疫疗法、治疗性疫苗。其中物理治疗主要是采用激光、微波、冷冻、切除、光动力疗法等去除肉眼可见的瘤体和亚临床感染。药物治疗主要使用的药物为0.5%足叶草脂毒素酊、5%咪喹莫特、50%三氯醋酸、氟尿嘧啶软膏等。免疫疗法使用药物干扰素、白介素、胸腺肽、转移因子、卡介苗、异维a酸、自体疫苗等目的在于减少复发和加快清除病灶。疫苗目前只有预防性的四价疫苗可以预防hpv6,11,16,18这四种病毒类型感染,因为大部分宫颈癌的感染类型是16,18型,所以可以减少大部分的宫颈癌,但对于已经感染的人预防疫苗没有作用。

cn101274921a、cn101285813a的中国专利中公开了牛磺罗定(taurolidine)的化学名为:4,4′-亚甲基双-(四氢-2h-1,2,4-噻二嗪)-1,1,1′,1′四氧化物,分子式为c7h16n4o4s2,分子量为:284.348,形状为白色或类白色结晶性粉末,其化学结构式如下:

可通过下述合成路线合成:

牛磺罗定是一种广谱的抗菌、抗真菌和抗内毒素的药物。主要用来预防那些患有多种与导尿管相关的血流感染病人的俊学症。也可用于治疗耳炎、胸膜积脓症、骨炎、骨髓炎、皮炎、牙周炎、牙龈炎、痤疮和各种溃疡。但目前没有被发现可以用于抗人乳头瘤病毒的用途。



技术实现要素:

本发明的目的是提供一种牛磺罗定的新用途,即牛磺罗定在抑制hpv病毒、或者在制备抗hpv病毒药物中的应用。

优选的是:牛磺罗定在制备由hpv病毒感染引发的宫颈上皮细胞瘤变、阴道炎、宫颈糜烂、宫颈息肉、宫颈癌或者尖锐湿疣的药物中的应用。

在上述技术方案中,所述的牛磺罗定可以制成注射剂、输液剂、片剂、胶囊剂等剂型,优选为输液剂。

本发明的有益效果是:

本发明首次发现牛磺罗定的新用途,即牛磺罗定在抑制hpv病毒、或者制备抗hpv病毒药物中的应用。牛磺罗定对人体的安全性已经得到临床实践的检测,本发明发现了牛磺罗定对hpv病毒的明显药效,为抗hpv病毒提供了强有力的理论基础和实践基础,具有开发价值和推广意义。本发明在细胞水平上检测了牛磺罗定对hpv病毒的抑制效果,本发明为hpv病毒引起的疾病的治疗提供了新的途径。

具体实施方式

为了更好的理解本发明的实质,下面通过在细胞水平上检测牛磺罗定对hpv病毒的抑制效果。

一、实验材料:

1.1细胞人口腔粘膜上皮细胞,来源于军事兽医研究所病毒学研究室;

1.2毒株人乳头瘤病毒(hpv),来源于军事兽医研究所病毒学研究室;

1.3试剂elitecell原代上皮细胞培养体系primed-elitecell-001,0.25%胰蛋白酶,fbs,pbs(fh=7.0);

1.4仪器耗材移液器及配套吸头,1.5ml离心管,冰盒,制冰机,生物安全柜,二氧化碳培养箱。

二、实验方法:

2.1细胞培养将人口腔粘膜上皮细胞复苏,连续传三代,待细胞长势良好后用于实验研究;

2.2病毒培养将保存的病毒液置冰上缓慢融化后接种于单层人口腔粘膜上皮细胞(不超过24小时),继续培养至72-96小时,根据细胞病变状态收获病毒液。并测定病毒含量,以tcid50/100μl为计算单位。

2.3牛磺罗定抑制作用

药物与病毒混合同时接入细胞:将长势良好的人口腔粘膜上皮细胞以胰酶消化后计算细胞含量,接种于96孔板,每孔105个细胞,接种12小时内且单层状态进行药物作用的研究。接种病毒含量为200个tcid50hpv与牛磺罗定混合后立刻接种于铺好的6孔板中,2%的牛磺罗定溶液、药物剂量为50μl、25μl、12.5μl、7.5μl、3.75μl。另设立空白细胞对照和牛磺罗定细胞毒性对照,进行3个重复;

将接种后的细胞板置37℃,co2培养箱中,继续培养,并观察细胞病变。

三、实验结果

按照以上实验方法,在37℃,co2培养箱中72小时观察细胞状态,镜下观察,以50μl、25μl药物为接种剂量组细胞状态良好,未出现细胞病变。12.5μl、7.5μl、3.75μl均出现不同程度的细胞病变,以3.75μl为接种剂量组与200tcid50引起的细胞病变无差异。

四、结果判定

根据上述实验结果,判定以接种剂量50μl、25μl药物时可以完全抑制200tcid50,以接种剂量12.5μl、7.5μl不能完全抑制200tcid50病毒感染细胞,以接种剂量3.75μl不能抑制200tcid50病毒感染细胞。

显然,上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例,而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说,在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。



技术特征:

1.一种牛磺罗定在抑制hpv病毒上的应用。

2.一种牛磺罗定在制备抗hpv病毒药物上的应用。

3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,牛磺罗定用于制备由hpv病毒感染引发的宫颈上皮细胞瘤变、阴道炎、宫颈糜烂、宫颈息肉、宫颈癌或者尖锐湿疣的药物中的应用。

4.根据权利要求2或3所述的应用,其特征在于,所述的牛磺罗定的药物剂型为注射剂、输液剂、片剂、或者胶囊剂。

5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述的牛磺罗定的药物剂型为输液剂。


技术总结
本发明涉及一种牛磺罗定的用途,涉及医药技术领域。本发明首次发现牛磺罗定的新用途,即牛磺罗定在抑制HPV病毒、或者在制备抗HPV病毒药物中的应用。牛磺罗定对人体的安全性已经得到临床实践的检测,本发明发现了牛磺罗定对HPV病毒的明显药效,为抗HPV病毒提供了强有力的理论基础和实践基础,具有开发价值和推广意义。本发明在细胞水平上检测了牛磺罗定对HPV病毒的抑制效果。本发明为HPV病毒引起的疾病的治疗提供了新的途径。

技术研发人员:苏熙尧;李维城;轩辕浩宇;苏忠
受保护的技术使用者:长春迈灵生物工程有限公司
技术研发日:2020.07.06
技术公布日:2020.09.04
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