专利名称:新的16，17-缩醛取代雄甾烷-17β-羧酸酯类的制备方法
这是一个关于新的有药理活性的化合物，关于其中间体以及制备它们的方法的发明。本发明还涉及那些含有这类化合物的制药配方及用这些化合物治疗肌肉与骨骼或皮肤的炎症，变应性症状等的方法。
本发明的主题是提供一种在应用部位具有高的抗炎作用及低的糖皮质激素系统作用的糖皮质甾类(glucocorticosteroids <GCS>)。
已经知道某些糖皮质甾类(GCS)可用于局部治疗呼吸道(例如哮喘，鼻炎)，皮肤(湿疹，牛皮癣)或肠道(溃疡性结肠炎，克罗恩氏病<Morbus Crohn>)的炎症，变应性或免疫性的疾病。用这种局部的糖皮质激素治疗，人们获得了超越全身治疗(例如给以糖皮质激素片)的临床效益，特别是在降低那些在疾病部位以外不需要的糖皮质激素的作用方面。例如在严重的呼吸道的疾病中，要达到这样的临床效益，GCS必需具有一种适合的药理作用。它们应该在应用部位具有高度内在的糖皮质激素活性但也可在例如靶器官或在吸收进入全身循环之后水解而迅速失活。
由于GCS与糖皮质激素受体的结合为其产生抗炎症及变应性症的效用的必不可少的条件，故甾族化合物(steroids)与其受体结合的能力可用作测定GCS的生理活性的一种适宜方法。已经用家兔耳水肿试验已表明在GCS类与其受体的结合力与其抗炎效用之间有直接关系。〔某些新的，高效的16α-，17α-缩醛取代糖皮质激素类的化学结构，受体结合与生理活性之间的关系。E.Dahl-berg，A.Thalen，R.Brattand，J-A Gustafsson，U.Johansson，K.Roempke，及T.Saartok，Mol。Phamacol.25卷(1984)，70页〕本发明基于观察到某些3-氧-雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸酯类具有与糖皮质甾类受体高度结合的亲合力。本发明化合物可用于治疗及控制炎症。
本发明化合物是以下式为表征的 其中1，2-位为-饱和键或双键X1选自氢，氟，氯及溴X2选自氢，氟，氯及溴R1选自氢或具有1～4碳原子的直链或支链的烃R2选自氢或具有1～10碳原子的直链或支链的烃R3选自
Y为O或SR4选自氢或具有1～10碳原子的直链或支链的烃或选自苯基R5选自氢或甲基R6选自氢，具有1～10碳原子的直链或支链的，饱和或不饱合的烃链，一种至少被一个卤原子取代的烷基，一种在环系中含有3～10个碳原子的杂环系列，-(CH2)m
)n(m＝0，1，2;n＝2，3，4，5，6)，无取代的或被一个或更多烷基，硝基，羧基，烷氧基，卤基，氰基，烷酯基或三氟甲基取代的苯基或苄基基团，当R2为氢时则R1为甲基。
存在于具有上述式(Ⅰ)的甾族化合物的混合物中的各个立体异构体成分可以下列方式阐明
存在于具有下列各式的甾族化合物17β-羧酸酯的混合物中的各个立体异构体成分可以用下列方式阐明，其中St为甾体部分 在像Ⅱ，Ⅲ，Ⅵ，Ⅶ，Ⅷ及Ⅸ的非对映异构体中，其构型的不同仅在于几个不对称碳原子中的一个上面。这种非对映异构体叫作差向异构体。
上述中的烷基为一具1-5碳原子的直链或支链烃链，最好具1-4碳。
上述中的烷氧基为一-O-烷基，其中烷基部分具有上给的定义。
上述中的卤最好是一个氯，溴或氟原子。
上述中的烷酯基为一-COO-烷基，其中烷基部分具有上给的定义。
杂环系统为包含杂原子如N，O或S的环系。
更好的杂环体系为吡咯基，吡啶基，嘧啶基，吡嗪基，呋喃基，吡喃基，苯并呋喃基，吲哚基及噻吩基。
本发明化合物中特别好的为1′-乙氧羰氧乙基6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕-雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸酯，其差向异构体A+B混合物及差向异构体B。
1′-异丙氧羰氧乙基9α-氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕-雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸酯，差向异构体B。
1′-丙氧羰氧乙基6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕-雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸酯，差向异构体B。
1′-异丙氧羰氧乙基6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)-雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸酯，差向异构体A+B混合物及差向异构体B。
1′-乙酰氧乙基(20R)-9α-氟-11β-羟基-16α，17α-丙基亚甲基双氧雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸酯，差向异构体B。
1′-乙氧羰氧乙基(22R)-9α-氟-11β-羟基-16α，17α-丙基亚甲基双氧雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸酯，差向异构体B。
1′-异丙氧羰氧乙基(20R)-9α-氟-11β-羟基-16α，17α-丙基亚甲基双氧雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸酯，差向异构体B。
1′-乙氧羰氧乙基(20R)-6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-丙基亚甲基双氧雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸酯，差向异构体A+B混合物及差向异构体B。
制备方法本发明化合物是把一种式Ⅹ，Ⅺ及Ⅻ的化合物氧化成相应的17β-羧酸而制备的
其中在C-1及C-2之间的实线和虚线表示一个单键或双键，X1，X2，R1及R2具有前给的含义，R7为氢或一种具有1-10碳原子的按直链或支链排列的酰基团。
然后将此种17β-羧酸进行酯化得到以式Ⅰ-Ⅸ为表征的化合物，其中
，X1，X2，R1，R2及R3具有如前给的含义。
本发明的使一种式Ⅹ，Ⅺ或Ⅻ化合物转变为相应的17β-羧酸的工艺是在一种适宜的氧化烃溶媒如像低级烷醇中进行的。甲醇及乙醇是更好的，特别是前者。反应介质中加入一种适宜的弱无机碱如像碱金属碳酸盐来使之成弱碱性，例如钠，锂或钾的碳酸盐。后者更好。式Ⅹ，Ⅺ或Ⅻ化合物转变成式Ⅰ，Ⅱ或Ⅲ(R3＝H)的17β-羧酸可在室温发生，例如20-25℃。
反应需有氧存在。可以把空气或氧气流鼓泡通入反应混合物中。
式Ⅹ，Ⅺ及Ⅻ的17β-侧链化合物的氧化降解为17β-羧酸也可用过碘酸，次溴酸钠或铋酸钠来进行。反应是在水和一种适宜的氧化烃溶媒如像低级醚的混合物中完成的。二噁烷及四氢呋喃是更好的，特别是前者。
式Ⅰ，Ⅱ及Ⅲ(R3＝H)化合物的母体17β-羧酸可以用已知方法酯化以得到本发明的17β-羧酸酯。例如，可以使这种17β-羧酸与适宜的醇及一种碳化二亚胺，如二环己基碳化二亚胺，在一种适宜的溶媒中反应，溶媒如乙醚，四氢呋喃，二氯甲烷或吡啶，反应温度宜于在25～100℃。另一方面，可以使这种17β-羧酸的一种碱金属盐，例如锂，钠或钾盐，或季铵盐化合物如三乙胺或三丁胺或四丁铵的盐，与一种适当的烷化剂最好在极性溶媒介质中反应，适宜的温度范围为25～100℃，烷化剂例如酰氧烷基卤化物或卤烷基·烷基碳酸酯，极性溶媒如丙酮，甲乙酮或二甲基甲酰胺，二甲基亚砜，二氯甲烷或氯仿。
生成的粗甾族化合物的酯衍生物分离之后在一种适宜的材料例如Sephadex
LH-型的交联葡聚糖膠上用色谱法进行精制，以适宜的溶媒作洗脱剂，例如卤代烃类，醚类，酯类如乙基乙酸酯或乙腈。
在16α，17α-羟基的缩醛化中或在17β-羧酸的酯化中形成的各个差向异构体具有实际上一致的溶解度特性。因此，已经证明用常规的拆分差向异构体的方法例如分级结晶(tractionated Crystallization)从差向异构体混合物中分开和离析它们是不可能的。为了分别得到各个的差向异构体，可将式Ⅰ，Ⅳ及Ⅴ的差向异构体混合物进行柱色谱法分离，如此可由于其在固定相上不同的流动性而分离得Ⅱ，Ⅲ，Ⅵ，Ⅶ，Ⅷ及Ⅸ差向异构体。色谱分离可以在例如Sephadex
LH(如Sephadex
LH-20)型交联葡聚糖膠上进行，以一种适宜的有机溶媒作洗脱剂。Sephadex
LH-20为一种珠状的羟丙醇化的葡聚糖膠，其中葡聚糖链为交联的形成三维空间的多糖格，是由瑞典乌普萨拉(Uppsala)，Pharmacia Fine Chemicals AB制造的。作为洗脱剂，已经成功地使用了卤代烃类例如氯仿或一种己烷-氯仿-乙醇以0-50∶50-100∶10-1比例的混合物，最好是20∶20∶1的混合物。
式Ⅹ，Ⅺ及Ⅻ化合物可用作本发明的起始原料。它们是由下列结构式化合物 其中在C-1及C-2间的实线和虚线表示一个单键或双键，X1，X2及R7具有前给的含义，下式的醛相反应而制备的。
其中R2具有前给的含义。
醛最好是乙醛，丙醛，丁醛，异丁醛，戊醛，3-甲基丁醛，2，2-二甲基丙醛，己醛，庚醛，辛醛，壬醛及癸醛。反应是将甾族化合物加到醛与一种酸催化剂在一起的溶液中来进行，酸催化剂例如过氯酸，对-甲苯磺酸，盐酸，反应在一种醚中进行，最好是二噁烷，或卤代烃类，最好是二氯甲烷或氯仿。
化合物Ⅹ，Ⅺ及Ⅻ还可以从相应的16α，17α-丙酮化物 其中在C1及C2之间的实线和虚线代表一个单键或双键，X1，X2及R7具有前给的含义，下式的醛经缩醛转移作用(transa-cetalisation)而制备。
其中R2具有前给的含义。
醛最好是乙醛，丙醛，丁醛，异丁醛，戊醛，3-甲基丁醛，2，2-二甲基丙醛，己醛，庚醛，辛醛，壬醛及癸醛。反应是将甾族化合物加到醛与一种作催化剂的强无机酸在一起的溶液中进行的，催化剂最好是过氯酸或盐酸，反应在醚中进行，最好是二噁烷或四氢呋喃，或一种卤代烃，最好是二氯甲烷或氯仿，或一种芳香烃，最好是甲苯，或一种脂环烃，最好是环己烷，或一种脂肪烃，最好是己烷或异辛烷。在后种条件下，差向异构体Ⅲ和Ⅻ的制备，可省去色谱法步骤。
药物的制剂本发明化合物可依炎症部位以不同方式局部给药，例如经皮的，非胃肠道的或用吸入法在呼吸道局部给药。处方设计的一个重要目标是达到活性的甾族化合物成分的最佳生物利用度。在为经皮给药的处方中，如将甾族化合物溶解于具有高热力学活性的载体中这种目标就能很好地达到。这可以通过使用一种适当的溶媒体系而达到，溶媒包括适当的二元醇类，如像丙二醇或1，3-丁二醇，可单独使用或与水结合使用。
借一种表面活性剂为助溶剂将这种甾族化合物或者全部或者部分地溶于一种亲脂相中这也是能达到的。经皮的制剂可以为油羔，水包油的乳剂，油包水的乳剂或洗剂。在乳剂载体中含有溶解的活性成分的系统可以构成分散相也可构成连续相。这种甾族化合物也可以作成微粒化的固体物存在于上述的制剂中。
这种甾族化合物的压缩气雾剂是用于口腔或鼻的吸入剂。这种气雾剂是以提供每个释放剂量为10～1000微克的活性甾族化合物来设计的，最好的剂量是20～250微克。最为有效的这种甾族化合物可以较低的剂量范围给药。微粒化的甾族化合物由实际小于5微米的颗粒组成，将它悬浮在一种发射剂的混合物中加入一种分散剂为助，例如脱水山梨醇三油酸酯(Sorbitan trioleate)，油酸，卵磷脂二辛基磺基琥珀酸的锂或钠盐。
工作实例本发明将用下列非限定性的实例进一步阐明。在实例中在制备色谱法操作中使用一个2.5毫升/公分2·小时-1的流速。在所有实例中分子量是用电子撞击质谱分析测定的。熔点是用Leitz Wetzlar热台显微镜(hot stage microscope)测定的。如无另外说明，所有的高效液相色谱分析(HPLC)是以一个1.0毫升/分的流速在Waters μBondapak C18柱(300×3.9毫米内径)上完成的，流动相为乙醇-水其配比在50∶50及60∶40之间。
实例1。本例叙述一个制备(22RS)-(22R)-及(22S)-11β，16α，17α，21-四羟孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮16α，17α-缩醛的方法。
(22RS)-，(22R)-及(22S)-16α，17α-亚丁基二氧-6α，9α-二氟-11β，21-二羟孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮。
A.将0.32毫升新鲜蒸馏的正丁醛及2毫升72%过氯酸加入到500毫升二氯甲烷中有1.0克6α，9α-二氟-11β，16α，17α，21-四羟孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮的悬浮液中。在搅拌下将反应混合物于室温放置24小时。反应混合物用10%碳酸钾水溶液及水洗涤，用无水硫酸钠干燥，蒸除溶媒。残留物溶于乙酸乙酯中用石油醚沉淀得到883毫克(22RS)-16α，17α-亚丁基二氧-6α，9α-二氟-11β，21-二羟孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮。高效液相分析表明纯度为99%，22S-与22R-差向异构体的比例为16∶84。分子量466(计算466.5)。(22RS)差向异构体混合物在Sephadex LH-20柱(76×3厘米)上色谱分离，使用庚烷∶氯仿∶乙醇，20∶20∶1作流动相。收集馏分12315-13425毫升(A)及13740-15690毫升(B)，蒸除溶媒，将残留物溶于二氯甲烷，用石油醚沉淀。馏分A得62毫克(22S)-，馏分B得687毫克(22R)-16α，17α-亚丁基二氧-6α，9α-二氟-11β，21-二羟孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮。(22S)-差向异构体分子量466(计算466.5)，熔点196-200℃。(22R)-差向异构体分子量466(计算466.5)，熔点169-72℃。
B.将0.30毫升新鲜蒸馏的正丁醛及2毫升72%过氯酸加到1.0克6α，9α-二氟-11β，21-二羟-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕-孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮在500毫升二氯甲烷的溶液中。将反应混合物在搅拌下33℃放置24小时，用碳酸钾水溶液及水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸除溶媒。残留物溶于二氯甲烷并用石油醚沉淀，得848毫克(22RS)-16α，17α-亚丁基二氧-6α，9α-二氟-11β，21-二羟孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮。高效液相分析显示纯度为93%，22S-与22R-差向异构体之间的比为12/88。
B′.将新鲜蒸馏的正丁醛1.2毫升及3.8毫升过氯酸(72%)加到在100毫升庚烷中有4.0克6α，9α-二氟-11β，21-二羟-16α，17α-〔(甲基亚乙基)双(氧)〕-孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮的悬浮液中。反应混合物在猛烈搅拌下于室温放置5小时，用碳酸钾水溶液及水洗涤，硫酸钠干燥并蒸除溶媒，得4.0克(22RS)-16α，17α-亚丁基二氧-6α，9α-二氟-11β，21-二羟孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮。高效液相分析表明纯度为98.5%，在22S-和22R-差向异构体间的比例为3/97。在两次用氯仿-石油醚重结晶之后得3.1克22R-差向异构体，其中含有仅为1.1%的22S-差向异构体及1.3%其它杂质。
C.相似地，按实例中陈述的规程，以11β-，16α，17α，21-四羟孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮，9α-氟-及6α-氟-11β，16α，17，21-四羟孕甾-1，4-二烯3，20-二酮或相应的丙酮化物来代替6α，9α-二氟-11β，16α，17α，21-四羟孕甾-1，4-二烯3，20-二酮，从乙醛，丙醛，丁醛，异丁醛，戊醛，3-甲基丁醛，2，2-二甲基丙醛，己醛，庚醛，辛醛壬醛及十二醛来制备无氟取代的及氟取代的非对称的(22RS)-，(22R)-及(22S)-11β，16α，17α，21-四羟孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮的16α，17α-缩醛物。
实例2A.将丙缩羟强龙(Prednacinolone)16α，17α-丙酮化物(250毫克;0.6毫克分子)溶于75毫升二氯甲烷中，加入正丁醛(130毫克;1.8毫克分子)及70%过氯酸(0.025毫升)。溶液在33℃搅拌15小时。黄色溶液用2×10毫升10%碳酸钾水溶液及4×10毫升水洗涤，干燥，蒸除溶媒。收得257毫克(97.7%)。高效液相分析纯度为91.1%。杂质中有7.4%的未反应的酮。差向异构体比例为14.6/85.4。
B.将16α，17α-丙酮化氟羟脱氢皮质醇(Triamci-nolone)(0.5克;1.1毫克分子)溶于150毫升二氯甲烷中，加入正丁醛(260毫克;3.6毫克分子)及70%过氯酸(0.22毫升)。将此混合物在33℃搅拌16小时。将二氯甲烷相移到一个分液漏斗中，用10毫升碳酸钾及二氯甲烷各数次洗涤反应瓶。然后用2×10毫升10%碳酸钾及4×10毫升水洗涤，干燥，蒸发。收得438毫克(84.9%)。高效液相分析得纯度为80.2%。差相异构体比为19/81。
C.将16α，17α-丙酮化肤轻松(Fluocinolone)(0.5克;1.1毫克分子)溶于150毫升二氯甲烷中。加入正丁醛(260毫克;3.6毫克分子)及70%过氯酸(0.22毫升)。混合物在33℃搅拌24小时。将二氯甲烷相移入一分液漏斗。用15毫升10%碳酸钾及二氯甲烷各自洗涤反应瓶数次。用2×15毫升10%碳酸钾及4×15毫升水洗涤反应液，干燥，蒸发。收得513毫克(100%)。高效液相分析纯度为97.4%。差向异构体比为8.6/91.4。
实例3.本例叙述制备11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕-及(20RS)-，(20R)-及(20S)-11β-羟基-16α，17α-烷基亚甲基二氧雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸及11β-羟基-16α，17α〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕-及(20RS)-，(20R)-及(20S)-11β羟基-16α，17α-烷基亚甲基二氧雄甾-4-烯-3-酮-17β-羧酸类的方法。6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)-双(氧)〕雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸的制备。
A.向1.99克肤轻松(fluocinolone)16α，17α-丙酮化物在120毫升甲醇的溶液中加入40毫升20%碳酸钾水溶液。于室温在搅拌下向此溶液通入空气流使鼓泡约20小时。蒸去甲醇后残留物中加入200毫升水。用二氯甲烷提取此溶液，用稀盐酸酸化水层。过滤收集沉淀并干燥得1.34克6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)-双(氧)〕雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸，熔点264-68℃，分子量438。高压液相分析纯度为94.0%。水层用乙酸乙酯提取。溶媒蒸除后干燥得另一部分酸0.26克。纯度93.7%B.将16.5毫升水中有过碘酸(15.1克)的溶液加到55毫升二噁烷中有肤轻松(fluocinolone)16α，17α-丙酮化物(5.0克)的溶液中。将反应混合物在室温搅拌20小时，用饱和的碳酸氢钠水溶液中和然后蒸发。将残留物溶于200毫升二氯甲烷中并用8×100毫升10%碳酸钾水溶液洗涤。水层用浓盐酸酸化并用6×100毫升乙酸乙酯提取。干燥后蒸除溶媒。残留物溶于400毫升乙酸乙酯中并用石油醚使之沉淀，得3.96克6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕-雄甾-1，4-二烯-3-酮17β-羧酸。高效液相测定纯度为99.5%。
C.相似地，按实例中陈述的过程，用11β，16α，17α，21-四羟孕甾-1，4-二烯-3-20二酮，6α-氟-11β，16α，17α，21-四羟孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮及氟羟脱氢皮质醇16α，17α-丙酮化物代替肤轻松(fluo-cinolone)16α，17α-丙酮化物来制备11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸类。以16α-羟基泼尼松龙，6α-氟-16α-羟基泼尼松龙，氟羟脱氢皮质醇及肤轻松与乙醛，丙醛，丁醛，异丁醛，戊醛，3-甲基丁醛，2，2-二甲基丙醛，己醛，庚醛，辛醛，壬醛和十二醛之间生成的16α，17α-缩醛化合物来代替16α，17α-丙酮化物而制备(20RS)-(20R)-及(20S)-11β-羟基-16α，17α-烷基亚甲基二氧雄甾-1，4-二烯及-4-烯-3-酮-17β-羧酸的酯类。
实例4.1′-乙氧羰氧乙基6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸酯。
A.将6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕-雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸(600毫克)及碳酸氢钾(684毫克)溶于45毫升二甲基甲酰胺中。加入(2毫升)1-溴乙基碳酸乙酯并将反应混合物在室温搅拌过夜。加入200毫升水，用二氯甲烷提取此混合物。合并的提取物用5%碳酸氢钠水液及水洗涤，残留物在Sephadex LH-20柱(72×6.3厘米)上进行色谱法纯化，使用氯仿作流动相。收集1515-2250毫升部分，蒸发后得480毫克1′-乙氧羰氧乙基6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕-雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸酯。高效液相测定纯度为98.1%，差向异构体A/B的比例为48/52。熔点218-27℃。〔α〕25D＝+63.2°(C＝0.214;二氯甲烷)。分子重554。
将此1′-乙氧羰氧乙基6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-(1-甲基亚乙基)双(氧)〕雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸酯(480毫克)在Sephadex LH-20柱(76×6.3公分)上色谱法分离，使用庚烷∶氯仿∶乙醇为20∶20∶1作流动相。收集2325-2715毫升流份，蒸发，用二氯甲烷溶解残留物并以石油醚使之沉淀，得200毫克化合物(A)，纯度97.3%(高效液相分析测定)。熔点246-50℃〔α〕25D＝+100.5°(C＝0.214;二氯甲烷)。分子量554。
4140-5100毫升流份得250毫克化合物(B)，纯度99.0%。熔点250-55℃〔α〕25D＝+28.5°(C＝0.246;二氯甲烷)。分子量554。酯基的次甲基信号在核磁谱中B比A向低磁场移动0.13ppm，光谱的其余部分是接近一致的。A和B的电子碰撞质谱除了质量峰的强度外都是一致的。这些光谱学上的不同和相似方面表明A和B是由于在酯基团中手性中心造成的差向异构体。
B.将6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸(200毫克)溶于25毫升二甲基甲酰胺中。加入1-氯乙基碳酸乙酯(100毫克)，碳酸氢钾(70毫克)及18-冠醚-6。将反应混合物在80℃搅拌3小时，冷却，加入150毫升水后用二氯甲烷提取，干燥并蒸干。用与过程A相同的方法将粗品精制得207毫克1′-乙酯氧羰氧乙基6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酯酯。纯度(高效液相)98.4%，差向异构体A/B比例为54/46。
C.将6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸(200毫克)及1，5-二氮二环〔5.4.0〕+-碳烯-5(140毫克)悬浮于25毫升苯中并加热至回流。将5毫升苯中有1-溴乙基碳酸乙酯(175毫克)的溶液加入，混合物回流半小时。冷却后加入50毫升二氯甲烷，将此溶液以水洗涤，干燥，蒸发。粗的产物用与规程A相同方法精制，得207毫克1′-乙氧羰氧乙基6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸酯。纯度(高效液相)96.4%，差向异构体A/B比例为44/56。
D.向25毫升丙酮中有6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸(100毫克)的溶液中加入175毫克α-溴代二乙基碳酸酯及45毫克无水碳酸钾。混合物加热回流6小时。将此冷的反应混合物倾入150毫升水中，用二氯甲烷提取。提取物用水洗涤，用硫酸钠干燥并蒸除溶媒得65毫克固体的1′-乙酯氧羰氧乙基6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕-雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸酯。高效液相测定纯度为97.6%，差向异构体A/B比为49/51。
E.将6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸(500毫克)及硫酸氢四丁基铵(577毫克)加到3毫升1M的氢氧化钠中。将在50毫升二氯甲烷中有435毫克1-溴乙基碳酸乙酯的溶液加入。将此混合物在搅拌下回流过夜，将分成的两层分离。有机层用2×10毫升水洗涤，干燥，蒸发，粗的产物在Sephadex LH-20柱(72×6.3厘米)上色谱法精制，使用氯仿作流动相。收集1545-1950毫升流分，蒸发，残渣从二氯甲烷-石油醚沉淀得341毫克1′-乙氧羰氧乙基6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)-双(氧)〕雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸酯。高效液相测定纯度为99.2%，差向异构体A/B的比为56/44。
F.将6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸(200毫克)及氯化三辛基甲基铵(tricapryl-methylammonium chloride)(200毫克)加到5毫升饱和的碳酸氢钠水液中。将10毫升二氯甲烷中有100毫克1-溴乙基碳酸乙酯的溶液加入。此混合物在45℃搅拌20小时，以10毫升二氯甲烷稀释，以同于规程E的方法分离精制，得254毫克1′-乙氧羰氧乙基6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸酯。纯度(高效液相)为97.4%，差向异构体A/B比为60/40。
G.将6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸(200毫克)，1-溴乙基碳酸乙酯(135毫克)及三乙胺(275毫克)溶于20毫升二甲基甲酰胺中。将此混合物在80℃搅拌3小时，用200毫升二氯甲烷稀释，以水洗涤，干燥，蒸发。粗产物用与规程A相同的方法精制，得69毫克1′-乙氧羰氧乙基6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸酯。纯度(高效液相)97.8%，差向异构体A/B之比为48/52。
实例5.1′-乙酰氧乙基6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕-雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸酯。
将6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸(500毫克)及碳酸氢钾(575毫克)溶于40毫升二甲基甲酰胺中。加入(1毫升)1-氯乙基乙酸酯并将此反应混合物在室温搅拌40小时。将反应混合物倾入50毫升水中，用二氯甲烷提取，提取物以碳酸氢钠水溶液及水洗涤，干燥并蒸发。残留物在Sepha-dex LH-20柱(72×6.3厘米)上色谱法分离，用氯仿作流动相。收集1755-2025毫升及2026-2325毫升流份并蒸发。
从1755-2025毫升流份所得固体产物在Sephadex LH-20柱(76×6.3厘米内径)上色谱分离再精制，使用庚烷-氯仿-乙醇以20∶20∶1的混合物作流动相。收集2505-2880毫升流份，蒸发。残留物溶于二氯甲烷中以石油醚沉淀得167毫克固体产物(A)。高效液相测定纯度为99.1%。熔点238-59℃。〔α〕25D＝+94°(C＝0.192;二氯甲烷)。分子量524。
得自上述2026-2325毫升的固体用与上相同的色谱法精制。收集5100-5670毫升流份，蒸发。残留物溶于二氯甲烷中以石油醚沉淀得165毫克固体产物(B)。高效液相测定纯度99.4%。熔点261-65℃。〔α〕25D＝+34°(C＝0.262;二氯甲烷)分子量524。
A和B的1H核磁谱除了其酯基团的次甲基四重峰外几乎是一致的，化合物B中的次甲基四重峰比化合物A中的向低磁场移动0.16ppm。电子碰撞质谱中除了在质量峰的强度以外A和B的碎片形式是一致的。A和B的光谱学性质表明它们是由于酯基的手性中心而造成的差向异构体。
实例6-88 在后面的表1-3所给的化合物其制备，分离及精制与在实例4和5中所述的是相类似的。
实例89 药物的制剂下面举出的非限制性处方实例是为不同的局部给药剂型用的。在经皮给药处方中活性甾族化合物的量一般为0.001-0.2%(重量/重量)，最好0.01-0.1%(重量/重量)。
处方1，软膏剂微粒化的甾族化合物 0.025克液体石腊 10.0克白软石腊 加至100.0克处方2，软膏剂甾族化合物 0.025克丙二醇 5.0克脱水山梨醇二分之三油酸酯 5.0克液体石腊 10.0克白软石腊 加至100.0克处方3，水包油霜剂甾族化合物 0.025克十六烷醇 5.0克甘油基单硬脂酸酯 5.0克液体石腊 10.0克聚乙二醇1000单鲸蜡醚 2.0克(Cetomacrogol 1000)柠檬酸 0.1克柠檬酸钠 0.2克丙二醇 35.0克水 加至100.0克处方4，水包油霜剂微粒化的甾族化合物 0.025克白软石腊 15.0克液体石腊 5.0克十六烷醇 5.0克缩聚山梨醇硬脂酸酯 2.0克(Sorbimacrogol stearate)脱水山梨醇单硬脂酸酯 0.5克山梨酸 0.2克柠檬酸 0.1克柠檬酸钠 0.2克水 加至100.0克处方5，油包水霜剂甾族化合物 0.025克白软石腊 35.0克液体石腊 5.0克脱水山梨醇二分之三油酸酯 5.0克山梨酸 0.2克柠檬酸 0.1克柠檬酸钠 0.2克 克水 加至100.0克处方6，洗剂甾族化合物 0.25毫克异丙醇 0.5毫升羧乙烯聚合物 3毫克氢氧化钠 适量水 加至1.0克处方7，悬浮注射剂微粒化甾族化合物 0.05-10毫克羧甲基纤维素钠 7毫克氯化钠 7毫克聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单油酸酯 0.5毫克苯甲醇 8毫克灭菌的水 加至1.0毫升处方8，口的和鼻的吸入气雾剂微粒化的甾族化合物 0.1%重量/重量脱水山梨醇三油酸酯 0.7%重量/重量三氯氟甲烷 24.8%重量/重量二氯四氟乙烷 24.8%重量/重量二氯二氟甲烷 49.6%重量/重量处方9，雾化液甾族化合物 7.0毫克丙二醇 5.0克水 加至10.0克处方10，吸入粉剂以如下混合物装入一个明胶胶囊微粒化甾族化合物 0.1毫克乳糖 20.0毫克用一个吸入装置吸入该粉剂。
药理新的雄甾烷-17β-羧酸酯类对糖皮质激素受体的亲合力依照本发明的所有甾族化合物均为具生理活性的化合物。这种新的雄甾烷-17β-羧酸酯类对糖皮质激素受体的亲合力已作为测定抗炎强度的一种模型来使用。已经将其受体亲合力与丁醛缩羟强龙(bu de sonide)(〔22R，S〕-16α，17α-亚丁基二氧-11β，21-二羟孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮)相比，丁醛缩羟强龙(budesonide)为一种具有更佳的局部与系统作用比例的高活性糖皮质激素(Thalen和Brattsand，Arzneim，-Forsh.29卷，1687-90页(1979))。
研究过程中使用一至二个月龄的雄性Sprague-Dawley大鼠。摘出其胸腺并放于冰冷的生理盐水中，将此组织在Potter Elveh-jem匀浆器中在10毫升含20毫克分子的三羟甲基氨基甲烷((Tris)，pH7.4，10%(重/容)甘油，1毫克分子乙二胺四乙酸(EDTA)，20毫克分子NaMoO4，10毫克分子巯基乙醇的缓冲液中匀浆化。将匀浆液在20000×克离心15分钟。将在20，000×克的上清液的部分(230微升)与100微升苯甲基磺酰氟(一种酯化酶抑制剂，最后浓度0.5毫克分子)，20微升未标记的竞争物及50微升3H-标记的地赛米松(dexamethasone)(最后浓度3毫微克分子)在0℃保温24小时。将此混合物与60微升2.5%(重/容)活性碳及0.25%(重/容)葡聚糖170悬浮在20毫克分子三羟甲基氨基甲烷(Tris)，pH7.4，1毫克分子乙二胺四乙酸(EDTA)及20毫克分子NaMoO4在0℃保温10分钟使结合的与游离的甾族化合物分离。在500×克离心分离10分钟之后，将230微升上清液在10毫升Insta-Gel中用Packard闪耀分光光度计计数。将上清液与a)〔3H〕地赛米松，b)〔3H〕地赛米松加1000倍过量的未标记的地赛米松及c)〔3H〕地赛米松加0.03-300倍“过量”的竞争物一起保温。当将1000倍过量的未标记的地赛米松加到〔3H〕-标记的地赛米松时测定其非特异结合。
有竞争物存在的结合受体的放射性除以无竞争物存在的结合受体的放射性再乘以100得到标记的地赛米松的特异结合的百分数。每个浓度的竞争物以其特异结合放射性的百分数与竞争物浓度的对数作为图。将曲线在50%特异结合水平进行比较并以丁醛缩羟强龙为比较基准，后者的相对结合亲合力(relative binding affi-nity<RBA>)定为1。
表4.一些已被研究的化合物的对糖皮质激素受体的相对结合亲合力(RBA)总计表按实例号的化合物 相对结合力(RBA)丁醛缩羟强龙(Budesonide) 14差向异构体B 0.305差向异构体B 0.1727 0.5038 0.04
续表4.
按实例号的化合物 相对结合力(RBA)55 0.2064 0.0567 0.0469 0.4484 1.0387 0.63
权利要求
1.一个制备下式化合物或其立体异构物的方法 在结构式中1，2一位为饱和键或双键X1选自氢，氟，氯及溴X2选自氢，氟，氯及溴R1选自氢或一具有1-4碳原子的直的或分支的烃链R2选自氢或具有1-10碳原子的直的或分支的烃链且R3选自 Y为氧或硫R4选自氢或具有1-10碳原子的直的或分支的烃链或选自苯基R5选自氢或甲基且R6选自氢，具有1-10碳原子的直的或分支的，饱和的或不饱和的烃链，至少有一个卤原子取代的烷基，一种在环中含有3-10原子的杂环体系，-(CH2)m (m=0，1，2；n=2，3，4，5，6)，被一个或多个烷基，硝基，羰基，烷氧基，卤基，氰基，烷酯基或三氟甲基基团取代的或无取代基的苯基或苄基，若当R2为氢时R1为甲基，该方法的特征是使下式化合物或其盐 与一具下式的化合物反应， 在结构式中X1，X2，R1，R2，Y，R4，R5，R6及
具有前给的含义，Z为-卤原子或-等价的官能团，若所得的酯为差向异构体混合物而想要纯的差向异构体，可将混合物拆分成立体异构体成分。
2.依照权利要求
1的方法，其特征是所制得的化合物为1′-乙氧羰氧乙基6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕-雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸酯，1′-异丙氧羰氧乙基9α-氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕-雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸酯，1′-丙氧羰氧乙基6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕-雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸酯，1′-异丙氧羰氧乙基6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-〔(1-甲基亚乙基)双(氧)〕雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸酯，1′-乙酰氧乙基(20R)-9α-氟-11β-羟基-16α，17α-丙基亚甲基二氧雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸酯，1′-乙氧羰氧乙基(22R)-9α-氟-11β-羟基-16α，17α-丙基亚甲基二氧雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸酯，1′-异丙氧羰氧乙基(20R)-9α-氟-11β羟基-16α，17α-丙基亚甲基二氧雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸酯，1′-乙氧羰氧乙基(20R)-6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-丙基亚甲基二氧雄甾-1，4-二烯-3-酮-17β-羧酸酯。
3.一种制备下式化合物或其立体异构体化合物的方法， 在结构式中1，2-位为饱和键或双键X1选自氢，氟，氯及溴X2选自氢，氟，氯及溴R2选自具有1-10碳原子的直的及分支的烃链R7为氢或一个具有1-10碳原子按直的或分支排列的酰基，其特点在于a)具有下式的一种化合物 在有一种酸催化剂存在下与下式化合物反应， 其中X1，X2，R2，R7及
的定义如前所述。或者b)具有下式的一种化合物 与下式化合物在有一种酸催化剂存在下反应， 其中X1，X2，R2，R7及
的定义如前所述。
专利摘要
本发明是关于一类具有抗炎活性的化合物，以结构式(I)或其立体异构体化合物。为特征在结构式中，各基团的定义均与说明书中的相同，1，2—位为饱和键或一双键，以及若当R本发明还涉及这些化合物的制备方法及其中间体，含有这类化合物中的一种化合物的药物制剂以及对炎症状态的治疗方法。
文档编号C07J1/00GK86102193SQ86102193
公开日1987年9月2日 申请日期1986年4月4日
发明者保罗·哈尔坎·安德森, 佩图尔·安德森, 本特·英杰马·阿克塞尔 申请人:得拉科公司导出引文BiBTeX, EndNote, RefMan