专利名称：水溶性棉酚制剂及其制备方法
技术领域：
本发明属棉酚制剂及其制备方法技术领域。
棉酚(Gossypol)存在于锦葵科植物草棉(GossypiumHerbaceum L.)中。《中药大辞典》曾指出棉酚有止咳作用和抗菌及抗病毒作用，还具有抗癌作用；此外，棉酚也曾被试用作为男用杀精子抗生育药物。近些年来，对于棉酚的抗癌作用有了进一步的研究，在临床用于治疗癌症时，棉酚不但能专一性地杀灭癌细胞，在一定剂量条件下还能调节机体免疫状态，升高白细胞数，改善正常细胞的代谢，具有扶正祛邪，增强体质的作用。因而，特别适宜于因种种原因不能被化疗或手术后替代化疗的抑癌药物，例如用于肺癌、食道癌、胃癌、肠癌、肝癌、白血病等症，同时，由于药物能突破机体内多种血药屏障，因此也适用于脑癌、前列腺癌、绒癌等症，还可适用子宫肌瘤、头部良性肿瘤等。
但是，由于棉酚的脂溶性，在制备时受到了剂型的限制，最初是制成口服胶囊，后经改进制成胃溶片或肠溶片.而这类剂型也存在一些缺点，影响了药效的发挥，例如①在胃肠道中停留时间长，不容易溶解，不易被机体所吸收，不易发挥药效，导致用药剂量增加；②由于药物溶解时局部浓度过高，易刺激胃肠道而产生副反应如口干、讷呆、恶心、呕吐、腹胀和腹泻等。
本发明的目的为克服现有棉酚制剂的缺点，研制一种高效低毒的水溶性棉酚制剂。
本发明提供了一种水溶性棉酚制剂(商品名“古康”)，该制剂是以棉酚为活性成份与药用载体组成的。
本发明的水溶性棉酚制剂中，棉酚与药用载体的含量配比为含0.01-99.99％的棉酚与含99.99-0.01％的药用载体以任意比例制成100％的组成。
本发明的水溶性棉酚制剂，其中的活性成份棉酚(药用规格)可以市售得到，药用载体有电解质平衡液、缓冲剂、PH调节剂、粘结剂、润滑剂、崩解剂、助溶剂、矫味剂等。其中所述的药用载体电解质平衡液可以是氯化钠、复方氯化钠(即每100ml中含氯化钠0.82～0.90克、氯化钾0.025～0.035克、氯化钙结晶0.03～0.36克)、碳酸氢钠--生理盐水(即每100ml溶液含1.3克碳酸氢钠)、乳酸钠--生理盐水(即每100ml溶液中含1.87克乳酸钠)、直肠透析液(即每100ml溶液中含氯化钠0.6克、碳酸氢钠0.2克、氯化钾0.048克，硫酸镁0.031克、乳酸钙0.077克、葡萄糖1.5克或Krebs-Henseleit溶液(即每1 00毫升溶液中含氯化钠0.692克、氯化钾0.035克、氯化钙0.028克、磷酸二氢钾0.016克、硫酸镁·7H2O 0.029克、碳酸氢钠0.21克、葡萄糖0.21克)等；缓冲剂为甘氨酸或除碱性氨基酸以外的其它各种氨基酸；PH调节剂为盐酸；粘结剂为食用纤维素或淀粉等；润滑剂为硬脂酸镁或滑石粉等；崩解剂为干淀粉及改良型淀粉、海藻酸与胶、白陶土等；助溶剂为聚乙二醇、吐温80、丙二醇或丙三醇等；矫味剂为蔗糖等。
本发明的水溶性棉酚制剂可以为口服液、散剂、硬胶囊、软胶囊、片剂或针剂。
本发明的水溶性棉酚制剂经与现有脂溶性棉酚片剂作的药效对比试验及毒理试验，显示其优越性，见下列试验结果一、水溶性棉酚制剂(古康)与脂溶性棉酚制剂(棉酚片)的药效对比试验1.比较古康与棉酚混悬液(代表棉酚片)的抗癌效应。
2.比较古康与棉酚混悬液(代表棉酚片)对大白鼠的生物学效应。
以往对棉酚生物学效应或临床的研究，都注重于它的杀精子抗生育作用，具代表性的动物模型是大白鼠。为了评价新的剂型古康的生物学效应，故仍选择对大白鼠的杀精子效应，可与棉酚片作一直观比较。见下表。
古康与棉酚混悬液对大白鼠精子生物学效应的影响的比较
从实验结果看出，棉酚片组中(以棉酚混悬液代表棉酚片灌服)，在低剂量的情况下，即每鼠每天一次灌胃6mg/Kg和12mg/Kg，连续灌四周，在该剂量条件下，大白鼠输精管中的精子全部存活，尚未达棉酚杀灭精子的起效剂量；但古康在该种剂量条件下便可杀灭约一半的精子(37％，53％)，大约相当于棉酚组一次灌胃18mg/Kg时的杀灭精子的效应(50％)。当一次灌胃量达30mg/Kg时，无论是古康或棉酚片均可100％杀灭精子，这即为二种剂型共同的抗生育剂量。说明古康较棉酚片有更低的生物学效应起效浓度，但抗生育浓度二者相同。说明古康在体内吸收较好。
3.古康与棉酚片在小白鼠肝脏中结合率的研究。
目的是比较在口服途径下，古康与棉酚片在小白鼠肠胃中吸收的快慢，以及药物进入肝脏后，比较游离态和结合态数量的差别。
①肝脏中棉酚含量和吸收高峰的比较。
服药后16小时中(共分7次测定)，古康进入肝脏的量(7组测定总和)与棉酚悬浮剂相比较为88.16±2.69(古康)＞67.2±1.00(棉酚片)，(P＝0.0018＜0.01)，数值相差极显著。因此推测棉酚片在肠道中可能溶解欠佳，会有一部分量在大便中被排泄而浪费。古康的肝中含量峰值约在灌服后的8小时，棉酚片约在灌服后的12小时达到高峰，棉酚片的峰值推迟4小时，表明古康在肠胃中无需花时溶解，因而吸收较棉酚为快。
②肝脏中结合率的比较。
在肝脏中棉酚的结合态与游离态含量的比值(结合态/游离态)，灌服以棉酚片时，7次测定的平均值为1.78±0.09；灌服以古康时，平均值为1.24±0.04，两者皆大于1，即在动物机体中棉酚主要以结合态的形式存在。1.24±0.04(古康)＜1.78±0.09(棉酚片)，(P＝0.0051＜0.01)，表示二者由于剂型不同，进入肝脏后，古康的结合态少于棉酚片组，即古康的游离浓度高。同时在古康组中，在吸收高峰值时(灌服后8小时)，试验数值显示游离值大于结合值，结合态/游离态＝0.79±0.02，而棉酚片组则无此种现象。即由于古康组大量棉酚的快速良好吸收，棉酚在肝脏中与组织的结合受到时空的限制，从而涌现出更多的游离棉酚，通过血液循环后，达到靶细胞的浓度也高，利于生物效应的发挥。③结论小白鼠在灌服棉酚后，前16小时中，棉酚吸收进入肝脏的量，古康大于棉酚片，即古康容易被吸收，浪费少；进入肝脏后，棉酚片的结合率大于古康。因此，古康一旦被吸收，会有更多的游离棉酚流向血液，进入靶目标。这表明古康在机体内的生物学效应优于棉酚片剂。二、水溶性棉酚制剂(古康)的毒理试验1、动物急性毒性试验棉酚片对小白鼠的半致死剂量已有明确结论1973年上海医药工业研究院和渐江人民卫生实验院对小白鼠腹腔注射棉酚，LD50值为26mg/Kg。因此为了了解古康的急性毒性大小，仍以小白鼠为实验动物，作腹腔注射的比较。结果显示古康的小白鼠半致死量LD50＝118.5mg/Kg，约为棉酚片的5倍，即毒性大大低于棉酚片。2、动物长期毒性试验以大白鼠为动物模型，研究口服古康的长期毒性。结果显示在古康杀精子的起效剂量(6mg/Kg)的2倍与5倍剂量的条件下，六个月灌服期间及停服后一个月中，大白鼠的生长均优于空白对照组，反应灵敏，体质强壮。在起效剂量10倍的剂量条件下，大白鼠前三个月体重增长高于对照组，后三个月的生长明显下降，体重不如对照组。停药后作精子存活率检查，对照组精子100％存活，药物组0％存活。表明长期口服古康，较低剂量有刺激生长，增强体质的作用，且不会影响药物的生物学效应。较高剂量不利于机体的生长。建议临床应用古康，以较低剂量为宜。上述试验结果表明本发明的水溶性棉酚制剂(古康)有下列优点
1、本发明的水溶性棉酚制剂(古康)进入肠胃道不会产生肠胃刺激反应，这是因为它是以水溶液形式存在，且浓度很低，服用时可进一步用水稀释成稀溶液，机体对药物的吸收迅速且充分，因此药物扩散均匀。同时水溶液还具有相对片剂独特的优点，这便是可以按需任意控制口服药物的剂量，从而避免用药不足或由无必要的药量过大而引起的对机体的损害。
2、本发明的水溶性棉酚制剂(古康)较棉酚片更易为机体吸收。从“对大白鼠生物学效应的影响的比较”的试验结果显示它较棉酚片有更低的生物学起效剂量，因而口服剂量亦可降低，副反应也随之减小。从“在小白鼠肝脏中的结合率的研究”的试验结果便可解释上述现象相对棉酚片，古康中的棉酚可被机体快速良好地吸收，而进入肝脏后与组织的结合率却小于棉酚片，从而游离浓度较高。这是因为大量古康中的棉酚被快速吸收，棉酚在肝脏中与组织的结合受时空的限制，从而涌现出更多的游离棉酚进入血液循环，达到靶细胞的浓度也高，利于生物效应的充分发挥。以棉酚的抗肿瘤效应为例，以往的临床适用量为30～60mg/日，现以古康抗肿瘤，临床对小孩的口服试用量是6mg/日、12mg/日两种和对成人12mg/日、24mg/日、36mg/日三种剂量。由于低剂量的滋补作用，增强免疫机能的效应，致使可以兼治各种病理症状如止痛、止血、消胸腹水、增强睡眠与食欲、增加正常血球和血小板的量、降低发热病人的体温等。
3、体内外的试验结果显示本发明的水溶性棉酚制剂杀灭癌细胞的能力有提高。体外细胞培养试验，由于它在水中的溶解大大改善，药效增加10至20倍；对于动物体内的抑癌试验，也显示药物使半数癌细胞死亡的半致死剂量LD50，古康约为棉酚片的1/3，即药效提高三倍。有利于用较少的药物来达到治疗的目的。同时，由于新剂型相对老剂型的毒副作用更小，药效更高，因此对提高棉酚原有的所有治疗功效，如抗菌、止咳、治疗子宫出血、烫伤，以及男用杀精子抗生育等，都可起到一定的作用。
本发明的另一个目的是提供水溶性棉酚制剂的制备方法。本发明的水溶性棉酚制剂的制备方法是取总量9/10体积的水，煮沸后加入135～150mM量的电解质平衡液和10％的助溶剂，搅拌冷却至60℃～80℃，然后加入0.4～0.8mM量的棉酚和24mM量甘氨酸，搅拌1～2小时，冷却至40℃，用盐酸调节PH至6.0～7.0，最后以水稀释至总量，经冷却、过滤及灭菌过滤后制成剂型。
本发明的水溶性棉酚制剂的制备中，棉酚可以市售得到，所述的水可以是去离子水、三蒸馏水或注射用水；所述的助溶剂为聚乙二醇、吐温80、丙二醇或丙三醇等；所述的电解质平衡液可以为氯化钠溶液、复方氯化钠溶液(含氯化钠、氯化钾、氯化钙)、碳酸氢钠--生理盐水、乳酸钠--生理盐水、直肠透析液(含氯化钠、碳酸氢钠、氯化钾、硫酸镁、乳酸钙、葡萄糖)或仿血清的离子浓度电解质平衡液如Krebs-Henseleit溶液；所述的缓冲剂为甘氨酸或除碱性氨基酸以外的其它各种氨基酸。
用本发明的方法可以制备水溶液棉酚日服液、针剂、散剂、硬胶囊、软胶囊、片剂等。
本发明的水溶液棉酚制剂制备方法简便，宜于规模型工业化生产。
实例1、制备水溶性棉酚口服液在二颈烧瓶中加入去离子水(或三蒸馏水)900毫升，煮沸。溶入9克氯化钠(或相当量的其它电解质平衡液)，再加入100克聚乙二醇2000，不断搅拌溶液，略候冷至80℃，加入0.62克棉酚和1.8克甘氨酸，在不断搅拌中维持温度80℃两小时，至棉酚全部溶解。待冷至40℃，用1N盐酸调pH至6.0～6.5，徐徐加入去离子水至总体积1000毫升。冷却，布氏漏斗过滤，滤液再用细菌漏斗过滤。滤液装瓶，100℃水浴20分钟消毒。最后经质量检测。实例2、制备水溶性棉酚口服液按实例一相同方法制备。不同之处是以直肠透析液即每100毫升中含氯化钠0.6克、碳酸氢钠0.2克、氯化钾0.048克、硫酸镁0.031克、乳酸钙0.077克、葡萄糖1.5克来替代氯化钠溶液。实例3、制备水溶性棉酚口服液按实例一相同方法制备。不同之处是以Krebs-Henseleit溶液即每100毫升溶液中含氯化钠0.692克、氯化钾0.035克、氯化钙0.028克、磷酸二氢钾0.016克、硫酸镁·7H2O0.029克、碳酸氢钠0.21克、葡萄糖0.21克来替代氯化钠溶液。实例4、制备水溶性棉酚针剂除以下三点外，按实例一相同方法制备(1)水为预先制备的注射用水。(2)上述口服液中棉酚投料为0.62克，针剂改为0.12克。制得棉酚的浓度为0.1mg/ml。(3)滤液装瓶用安培瓶。实例5、制备水溶性棉酚针剂按实例四相同方法制备。不同之处是以复方氯化钠注射液，即每100ml中含氯化钠0.82～0.9克、氯化钾0.025～0.035克、氯化钙结晶0.03～0.36克来替代氯化钠溶液。实例6、制备水溶性棉酚针剂按实例四相同方法制备，不同之处是以碳酸氢钠-生理盐水即每100毫升溶液中含1.3克碳酸氢钠来替代氯化钠溶液。实例7、制备水溶性棉酚针剂按实例四相同方法制备，不同之处是以乳酸钠-生理盐水即每100毫升溶液中含1.87克乳酸钠来替代氯化钠溶液。实例8、制备水溶性棉酚散剂在二颈烧瓶中加入去离子水(或三蒸馏水)900毫升，煮沸。溶入9克氯化钠(或相当量的其它电解质平衡液)，再加入100克聚乙二醇2000，不断搅拌溶液，略待冷至80℃，加入1.23克棉酚和1.8克甘氨酸，在不断搅拌中维持温度80℃两小时，至棉酚全部溶解。待冷至40℃，用1N盐酸调pH至6.0～6.5，徐徐加入去离子水至总体积1000毫升。冷却，布氏漏斗过滤，滤液再用细菌漏斗过滤。滤液装瓶。将以下配方(氯化钠0.30克，枸橼酸钾0.69克(或氯化钾0.15克)，碳酸氢钠0.25克，无水葡萄糖20克)混匀，粉碎并过80目筛。在混匀粉末中加入上述滤液10毫升，混匀。在冷冻干燥机中干燥，装入铝箔塑料袋或瓶中，密封瓶口。实例9、制备水溶性棉酚硬胶囊在二颈烧瓶中加入去离子水(或三蒸馏水)900毫升，煮沸。溶入9克氯化钠(或相当量的其它电解质平衡液)，再加入100克聚乙二醇2000，不断搅拌溶液，略待冷至80℃，加入2.45克棉酚和1.8克甘氨酸，在不断搅拌中维持温度80℃两小时，至棉酚全部溶解。待冷至40℃，用1N盐酸调pH至6.0～6.5，徐徐加入去离子水至总体积1000毫升。冷却，布氏漏斗过滤，滤液再用细菌漏斗过滤。滤液装瓶。在1000毫升滤液中，徐徐溶入甘氨酸20～100克，再加入食用纤维素50～200克，使成触变流体药物，灌注入已准备的明胶药用胶囊中，然后用冷冻干燥机冷冻干燥成冷冻干燥胶囊。实例10、制备水溶性棉酚软胶囊按实例九相同方法制得同量触变流体药物向其中加入10～100克甘油或丙二醇，混匀，可防止软胶囊的硬化作用。在全自动或半自动的压模机内，将混匀药液置于已准备的软性明胶胶片中，于钢板模内进行压丸，经表面清洗、干燥和检验后，即可包装为成品。实例11、制备水溶性棉酚片剂在二颈烧瓶中加入去离子水(或三蒸馏水)900毫升，煮沸。溶入9克氯化钠(或相当量的其它电解质平衡液)，再加入100克聚乙二醇2000，不断搅拌溶液，略候冷至80℃，加入2.45克棉酚和1.8克甘氨酸，在不断搅拌中维持温度80℃两小时，至棉酚全部溶解。待冷至40℃，用1N盐酸调pH至6.0～6.5，徐徐加去离子水至总体积1 000毫升.冷却，布氏漏斗过滤，滤液再用细菌漏斗过滤。滤液装瓶。按下列组方配料
将以上材料搅拌均匀，制成软材，通过14目筛制粒和整粒，湿颗粒应均匀结实，入冷冻干燥机干燥，以φ6m/m深弧度冲模压片。经筛选合格的片剂用外包衣包裹。包衣材料用半薄膜衣的方式比较适合。即先按糖衣层方式，包隔离层、粉衣层，然后减少包糖衣的层次，2～3层即可，再包上薄膜衣料2～3层，这样衣层牢固，保护性能好。薄膜衣料可选用各种甲基、乙基、丙基纤维素均可。经外包衣包裹的药片经质量检查合格后，以铝塑复合膜或金属箔膜进行单片包装为宜，可再次与外界隔绝。每片含水溶性棉酚12mg。
权利要求
1.一种水溶性棉酚制剂，其特征在于该水溶性棉酚制剂是由棉酚作为活性成分与药用载体组成的，其中棉酚与药用载体的含量配比为含0.01～99.99％的棉酚与99.99～0.01％的药用载体以任意比例制成100％的组成。
2.一种如权利要求1所述的水溶性棉酚制剂的制备方法，其特征在于该制备方法是取总量9/10体积的水，煮沸后加入135～150mM量的电解质平衡液和10％的助溶剂，搅拌冷却至60℃～80℃，然后加入0.4～0.8mM量的棉酚和24mM的量甘氨酸，搅拌1～2小时，冷却至40℃，用盐酸调节pH至6.0～7.0，最后以水稀释至总量，经冷却、过滤及灭菌过滤后制成剂型。
3.根据权利要求1和2所述的水溶性棉酚制剂，其特征在于其中所述的药用载体为电解质平衡液、缓冲剂、PH调节剂、粘结剂、润滑剂、崩解剂、助溶剂、矫味剂。
4.根据权利要求1、2和3所述的水溶性棉酚制剂，其特征在于其中所述的药用载体电解质平衡液可以是氯化钠、复方氯化钠(即每100ml中含氯化钠0.82～0.90克、氯化钾0.025～0.035克、氯化钙结晶0.03～0.36克)、碳酸氢钠-生理盐水(即每100ml溶液含1.3克碳酸氢钠)、乳酸钠-生理盐水(即每100ml溶液中含1.87克乳酸钠)、直肠透析液(即每100ml溶液中含氯化钠0.6克、碳酸氢钠0.2克、氯化钾0.048克、硫酸镁0.031克、乳酸钙0.077克、葡萄糖1.5克或KREBS-HENSELEIT溶液(即每100毫升溶液中含氯化钠0.692克、氯化钾0.035克、氯化钙0.028克、磷酸二氢钾0.016克、硫酸镁·7H2O 0.029克、碳酸氢钠0.21克、葡萄糖0.21克)；缓冲剂为甘氨酸或除碱性氨基酸以外的其它各种氨基酸；PH调节剂为盐酸；粘结剂为食用纤维素或淀粉；润滑剂为硬脂酸镁或滑石粉；崩解剂为干淀粉及改良型淀粉、海藻酸与胶、白陶土；助溶剂为聚乙二醇、吐温80、丙二醇或丙三醇；矫味剂为蔗糖。
全文摘要
本发明涉及水溶性棉酚制剂及其制备方法。该制剂是由作为活性成分的棉酚与药用载体组成，它们是以含棉酚0.01～99.99％与含药用载体99.99～0.01％以任意比例制成100％的组成。本发明的棉酚制剂具有良好的水溶性，利于机体吸收，降低胃肠道副反应，提高药效，减少用药剂量。本发明提供了水溶性棉酚的口服液、针剂、散剂、片剂、胶囊等制剂的制备方法。
文档编号A61K31/045GK1144089SQ9511174
公开日1997年3月5日 申请日期1995年9月1日 优先权日1995年9月1日
发明者柯一保, 陈小章, 柯欣永 申请人:上海古康生物实业有限公司