专利名称：：含有类视色素和脂质体的护肤组合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及含有类视色素的护肤组合物，类视色素通常能改善皮肤的质量，特别是改善人面部皮肤的质量。更具体地说，本发明涉及包含非磷脂脂质体制剂和某些类视色素的化学稳定的护肤组合物。
背景技术：
：近几年来，含有类视色素的护肤组合物已成为极受关注的焦点。视黄酸，又称作维生素A酸或tretinoin，被用来治疗如痤疮这种皮肤病已广为人知，且可从市场上买到各种形式的含视黄酸产品。这类产品包括，例如RetinA*霜，一种含有油溶性抗氧剂-丁基化羟基甲苯(BHT)的视黄酸水包油乳状液；RetinA*液，可从新泽西州的OrthoPharmaceuticalCorporationofRaritan购得，其为一种视黄酸溶于聚乙二醇/乙醇溶剂、用BHT作为抗氧剂的溶液，和RetinA*凝胶，其包含在一种含有乙醇作溶剂、羟丙基纤维素作增稠剂或胶凝剂、BHT作抗氧剂的凝胶媒介物中的视黄酸。已证明这些含视黄酸的产品是稳定的，且在延长保存期后能提供活性组分。可是近来，有人建议将类视色素扩展用于痤疮以外的治疗，如治疗皮肤的光老化和晒伤。许多幼年受日光照射多的人，到成年后期将会出现下述显著皮肤变化起皱、硬化(leatheriness)、变黄、松弛、粗糙、发干、色斑(色素沉积过度)和各种恶化前的生长(经常临床症状不明显)。这些变化对于易晒伤和晒成褐色差的薄皮肤人最为明显。日光的这些积累效应常被称作“光老化”。虽然皮肤组织退化在上年纪人中最快，但到第二个十年时，过量日光照射的破坏作用才明显。表皮和真皮的重大微小变化，在这些临床症状表现几十年之前就已发生。而起皱、变黄、硬化和失去弹性这些变化则非常晚。美国专利4,603,146建议在润肤剂媒介物中使用维生素A酸作为改善光老化作用的疗法。另外，美国专利4,877,805建议用多种类视色素恢复和逆转人体皮肤的晒伤。与视黄酸相反，某些类视色素，如视黄醇(维生素A醇)、视黄醛(维生素A醛)和视黄酯，如乙酸视黄酯和棕榈酸视黄酯，可优选用于护肤组合物中。视黄醇是一种天然存在于人体内的内源化合物，是良好生长、上皮组织分化和再生所必须的。也优选视黄醇，因为其对皮肤较其它类视色素，如视黄酸，更为安全，更少刺激。另外，过量视黄醇大批地被以非活性的酯类形式贮存在人体内，如以棕榈酸视黄酯形式，在某种程度上，以乙酸视黄酯形式。也优选醛-视黄醛形式，其为视黄醇的活性代谢物，是视觉功能所需要的。所以，已将注意力转向制备含有这些优选的、天然存在的类视色素护肤组合物，类视色素具有与现有视黄酸制剂类似的性质，即提供一种组合物，其感觉宜人，且在经历主要贮存期后，能输送活性组分。现有的含有类视色素的制剂一般为水包油乳状液，其中视黄酸附着在油相中，被由溶性抗氧剂保护以防氧化。一般认为，水包油乳状液比油包水乳状液更优选，因为其不堵塞、不油腻、能与其它这类乳状液产品相容，且易于从皮肤上除掉，被认为感觉更宜人，以及制造更经济。一般情况下，活性视黄酸组分的化学稳定性很好，因为油相可保护视黄酸，特别是当存在油溶性抗氧剂时。所以，例如上文所提到的RetinA*霜为含有视黄酸、BHT和油溶性抗氧剂的水包油乳状液。在美国专利3,906,108中，公开了一种水包油视黄酸乳状液，其包含一种油溶性抗氧剂，如BHT或dl-α-生育酚和一种螯合剂，例如乙二胺四乙酸(EDTA)。在美国专利4,466,805中，描述了一种鞣组合物，在其它组分中，该组合物可包括维生素A，其存在于含有维生素E和柠檬酸的水包油乳状液中。美国专利4,247,547还公开了另一种形式的含视黄酸组合物，即凝胶体，其被一种选自丁基化羟基甲苯、丁基化羟基茴香醚(BHA)、抗坏血酸(维生素C)、棓酸丙酯和α-生育酚(维生素E)的抗氧剂保护。许多包含其它类视色素，例如包括视黄醇、视黄醛和视黄酯如乙酸视黄酯和棕榈酸视黄酯的护肤品已经上市。不出所料，这些组合物效仿了商品视黄酸组合物的配方，它们是受油溶性抗氧剂保护的水包油乳状液。但目前还尚不十分清楚，为什么在这些组合物中除视黄酸以外的类视色素均会很快地失去活性，要么氧化，要么异构化，变成无效的化学形式，因此，实际上能提供产品有益作用的类视色素量减少了，在令人难以接受的短时期内，减少到无效量，最终减少到痕量。从此后，含类视色素的产品一般限于水包油乳状液，除含视黄酸的产品外，均遭遇了化学不稳定的厄运。但也有几种场合，所生产的产品和或提出的一些制备产品的建议，其中把类视色素，如视黄醇、乙酸视黄酯和棕榈酸视黄酯，制成油包水乳状液。因此，如美国专利4,826,828描述了一种稳定的、包含视黄醇、乙酸视黄酯和棕榈酸视黄酯的组合物，其可包括存在于油包水乳状液中的视黄醇，其中乳状液还包含两种油溶性抗氧剂BHT和BHA。还有，AvonProducts，Inc.，美国专利4,826,828的受让人，出售了两种叫做Bioadvance和Bioadvance2000的护肤品。每种产品以两只瓶子提供，只是在使用前，才取各瓶的一部分混在一起。第一只瓶子装有称作“皮肤洗剂”的物质，而第二只瓶子装有称作“增强剂”的物质。“皮肤洗剂”为油包水乳状液，拥有多种组分，包括水、乳化剂、硅氧烷和植物油、防腐剂、柔软剂和丁基化羟基甲苯(BHT)。“增强剂”为一非水溶液，其包含多种组分，包括环甲聚硅氧烷(一种硅油)、变性乙醇、乳化剂(吐温20)、视黄醇、乙酸视黄酯、棕榈酸视黄酯、BHT和BHA。当将一定量的“增强剂”加到一定量的“皮肤洗剂”中并混合时，就会形成一种油包水乳状液，其包含视黄醇、乙酸视黄酯、棕榈酸视黄酯、BHT和BHA，后者为油溶性抗氧剂。其中供应Bioadvance的外包装上印有这样一段陈述，＂由于BIOADVANCE一月后开始失效，为获益最大，每月请用新品＂。从陈述可知，＂皮肤洗剂＂和＂增强剂＂混合物中类视色素的化学稳定性很有限。在BIOADVANCE和BIOADNANCE2000两种产品中，“增强剂”组分必须在即刻使用前与“皮肤洗剂”组分混合的事实表明所得用于皮肤的油包水乳状液，也存在一种或多种上文所提及的视黄醇、乙酸视黄酯和棕榈酸视黄酯的化学稳定性有限问题。另外，授予Bell的美国专利4,270,353还描述了拟局部用于皮肤的各种药剂和药物的油包水乳状液载体。水溶的、可混合的或可分散的药物可被掺入到乳状液水相中。油溶的、可混合的或可分散的药物可掺入到油相中。可掺入到乳状液中的药物包括视黄酸衍生物。可任选地加入到乳状液中的组分包括防腐剂如羟苯甲酸甲酯、羟苯甲酸丙酯或咪唑烷基脲或抗氧剂如丁基化羟基茴香醚和水或油溶性维生素如维生素C、生育酚亚油酸酯等。还有，授予Siemer等人的欧洲专利0343444A2公开了基于棕榈酸视黄酯的化妆品制剂。实施例3公开了一种油包水型乳状液晚霜，其包含棕榈酸视黄酯和丁基化羟基茴香醚(BHA)。实施例4公开了一种油包水乳状液，其包含乙酸视黄酯和α-生育酚(维生素E)。还有，授予Batt的欧洲专利0330496A2描述了皮肤处理组合物，其包含一种局部可接受的碱和一定有效量的至少一种视黄醇酯，所述组合物可用于治疗光老化皮肤。实施例6公开了一种油包水乳状液，其包含维生素A丙酸酯和BHT，一种油溶性抗氧剂。令人遗憾的是，用除视黄酸以外的类视色素，这些努力赶超含视黄酸组合物稳定性的上述试图，均没有获得成功，每种情况下均导致其中使用的视黄醇、视黄醛或视黄酸酯的大体的和令人不满意的化学不稳定性。所以，需要制备一种组合物，其以化学稳定形式提供这类非视黄酸类视色素。1993年11月15日JonasC.T.Wang等人提交的未决专利申请USSN719,764公开了油包水乳状液中视黄醇的稳定化，其中视黄醇被分散在油相中，并被油相保护。但依化妆品的性能考虑，更优选水包油乳状液而非油包水乳状液。这是由于一般情况下，水包油乳状液较少堵塞，较不油腻，可与其它化妆品相容，且易从皮肤上除去，可产生更宜人的感觉。另外，考虑到组合物组分和生产方法，水包油制剂成本更低。所以希望开发出有效且化妆优雅的含类视色素护肤品，类视色素包括视黄酸、视黄醛、视黄醇和视黄酯，以扩展视黄醇的对皮肤处理的用途。本发明的另一目的是提供含有类视色素、具有令人满意贮存期的护肤组合物。本发明还有一个目的是提供一种含类视色素的护肤组合物，其使活性组分随时间的延续控释到皮肤上。本发明的另一目的是提供一种生产含有类视色素的稳定护肤组合物，长时间后仍能保持活性。本发明还有一个目的是提供相对无刺激、而又能有效地向皮肤传递活性组分的护肤组合物。通过下文所提供的描述，本发明的其它目的也将清楚。附图简述图1描述的是pH对非磷脂脂质体制剂中视黄醇稳定性的影响。图2描述的是实施例8C中制剂与油包水制剂所释放的视黄醇量的对照。图3描述的是实施例8C和6中制剂与油包水制剂所释放的活性组分渗入表皮和真皮量的对照。图4描述的是本发明某些制剂与其它护肤组合物相对照的感觉判别。发明概述根据本发明，现已意外地发现，用专门定义的稳定体系和方法将某些类视色素掺入到非磷脂脂质体中，可成功地使其保持稳定而不发生化学降解。根据本发明的原理，能保持稳定而不发生降解的类视色素包括视黄醇(维生素A醇)、视黄醛(维生素A醛)、乙酸视黄酯、棕榈酸视黄酯及其混合物。正如本发明所用的，类视色素的＂化学稳定性＂或＂稳定性＂是根据组合物在某一指定温度贮存一定时间后，指定类视色素保留其原始化学形式的百分比而定义的。所以，如果无水乙醇溶液中的全反式视黄醇起始浓度为0.20％(重量)，在室温下(21℃±1℃)贮存两(2)周后，全反式视黄醇的浓度为0.18％(重量)，则在无水乙醇中全反式视黄醇的起始溶液在室温下贮存两周后的特征为视黄醇的化学稳定性为90％。同样，如果含有全反式视黄醇的非磷脂脂质体制剂起始浓度为0.30％(重量)，50℃贮存13周后，全反式视黄醇的浓度为0.24％(重量)，则起始乳状液50℃贮存13周后的特征为视黄醇的化学稳定性为80％。对于为本发明主题的具体类视色素，非磷脂脂质体形式，与本发明所描述的选定稳定体系相结合，将会生产出在50℃贮存13周后化学稳定性为80％的组合物。本发明还提供了一个稳定类视色素体系，意外的是，不需存在水溶性抗氧剂。所以，根据本发明所教导的方法，可提供一种包含非磷脂脂质体和类视色素的护肤组合物，类视色素选自视黄醇、视黄醛、乙酸视黄酯、棕榈酸视黄酯及其混合物，所述组合物还包含一个稳定体系，其选自a)一种油溶性抗氧剂，和b)一种螯合剂和至少一种油溶性抗氧剂；其中，所述组合物的pH至少为约5～约10，所述组合物在50℃贮存13周后，保留至少约80％的所述类视色素。还意外地发现，可赋予本发明组合物导致脂质体载体上活性剂控释的材料变化。可调节本发明组合物，以增强或降低活性组分对皮肤的渗透。令人惊奇的是，与人们所体验到的涂抹含有2％表面活性剂相同量油包水霜的感觉相比，含有相对较高量表面活性剂(例如，＞8％)的本发明组合物表现出刺激性。发明详述如上所述，本发明组合物为特殊形式的脂质体，即非磷脂脂质体。大多数商品护肤组合物如含有视黄酸的组合物为水包油乳状液体系。这类水包油乳状液体系中，某些类视色素化合物，特别是视黄醇、视黄醛和视黄酯，均有化学不稳定倾向，即其要么通过氧化作用，要么通过异构化作用而降解，所以不可能以所期望的方式发挥作用。尽管对此了解尚不清楚，但认为发生该降解现象是由于氧通过外部水相快速扩散入了含有类视色素的油相内部。氧能轻易地降解类视色素。因为氧的扩散在水相中比在油相中大，水包油体系更易发生这种降解。本发明组合物克服这些困难，取而代之的是提供含有至少一种类视色素化合物的非磷脂脂质体组合物，其中脂质体的物理稳定性和活性组分的化学稳定性均保持在高水平。脂质体为球形、自封闭结构，由包埋了部分溶剂的弧形脂类双层构成，其中脂质体可自由地漂移入其内部。脂质体由一张或几张同心膜构成。脂质体主要由两亲物、一种特殊的表面活性分子组成，其特征为在同一分子上有一亲水基和一憎水基。这些分子不溶于水，更不形成溶液，而是形成胶体状分散体。近来，由磷脂构成胶团脂质体的技术受到强烈关注。磷脂不稳定，纯化和合成费用高。另外磷脂脂质体制备困难，放大规模成本高。出于这些原因，人们对非磷脂脂质体的兴趣日渐增强。某些具有非离子极性头的双链合成表面活性剂和单链表面活性剂与胆固醇混合，可形成非离子脂质体。它们比天然磷脂的化学稳定性高，且易于大规模进行商业化生产。由于其稳定性，这些聚集体的结构包括脂类分子排列亲水部分倾向于与水接触，而憎水烃链优选藏匿于结构内侧不与水接触。最常见的聚集体结构之一是脂双层。其中一侧的表面为极性头，其将片层内侧的非极性尾与水隔开。脂类浓度较高时，这些双层形成层状晶体相，其中二维平面脂类双层与水双层交替排列。一经稀释，这些脂双层将形成脂质体。这些脂质体可截留水层中的亲水物质和双层中的亲脂物质。双层中被截留的分子有时被称作“负荷分子(cargomolecule)”。亲脂截留严重地受双层俘获负荷分子能力的约束。脂质体可大可小，其可由一百到几百个同心膜组成。就其大小和片层的数目而言，可将其划分为大多层胶团(MLV′s)、和大小单层胶团(分别为LUV′s和SUV′s)。迄今为止的大部分研究均集中于上文所提及的胶团类型上。近来，DonaldF.H.Wallach的美国专利4,911,928描述了另一类型的脂类胶团，少层脂类胶团(PLV)。本发明描述了由2～8个围绕大的非结构化中心空穴的周边双层构成的PLV′s，空穴可用非极性油或蜡全部或部分填充。多脂双层和PLV′s的非极性核使PLV′s具有输送更大量亲脂物质的能力。还有授予DonaldF.H.Wallach的美国专利5,147,723描述了非磷脂表面活性剂，其可形成少层脂类胶团。表面活性剂可选自聚氧乙烯脂肪酯，其化学式为R1-COO(C2H4O)nH，其中R1为月桂酸基、肉豆蔻酸基、十六烷酸基、硬脂酸基或油酸基，n为2～10的整数；聚氧乙烯脂肪酸醚，其化学式为R2-CO(C2H4O)mH，其中R2为月桂酸基、肉豆蔻酸基或十六烷酸基、单不饱和或双不饱和十八烷酸基或双不饱和二十双烯(eicodienic)酸基，m为2～4的整数；聚氧乙烯(2O)脱水山梨糖醇单油酸酯或三油酸酯；和具有1～10个聚氧乙烯基团的聚氧乙烯单硬脂酸甘油酯。所有这些结构均有许多有趣的物理和化学性质，如渗透活性、其膜对不同溶质的渗透力、溶解力、与各种憎水和亲水溶质的相互作用，或依赖于温度、膜的化学组成和表面特性以及各种试剂的存在的聚集性能。用于本发明组合物中的油溶性抗氧剂包括丁基化羟基甲苯(BHT)、抗坏血酸棕榈酸酯、丁基化羟基茴香醚(BHA)、α-生育酚、苯基-α-萘胺、氢醌、棓酸丙酯、去甲二氢愈创木酸及其混合物，以及能与其它组合物组分相容的任何其它已知的油溶性抗氧剂。用于本发明组合物中的油溶性抗氧剂必须以一稳定的有效量使用，以组合物总重量计，其量为约0.001～约5％，优选为约0.01～约1％。用于本发明组合物中的抗氧剂量部分取决于所选定的具体抗氧剂、被保护的类视色素量和具体的类视色素以及加工条件。例如，一种视黄醇制剂必须包含BHT，其量为约0.01％～约1％(重量)。一种视黄醛制剂必须包含BHT，其量为约0.01％～约1％(重量)。本发明在某些方面，为使金属离子的污染减至最小，在放大生产中，组合物中可包含一种螯合剂。本发明的类视色素化合物对金属离子敏感，特别是对二价和三价阳离子，某些场合当金属离子存在时，类视色素会快速降解。螯合剂和金属离子形成复合物，由此使金属离子钝化，防止其影响类视色素化合物。可用于本发明组合物中的螯合剂包括乙二胺四乙酸(EDTA)及其衍生物和盐、二羟乙基甘氨酸、柠檬酸、酒石酸及其混合物。螯合剂必须以一稳定的有效量使用，以组合物总重量计，其量为约0.01～约2％，优选为约0.05～约1％。用于本发明组合物中的类视色素化合物包括维生素A醇(视黄醇)、维生素A醛(视黄醛)和维生素A酯(油酸视黄酯和棕榈酸视黄酯)。以一定的治疗有效量将这些类视色素用于本发明组合物中，其量为组合物总重量的约0.001～约5％，优选为约0.001～约1％。正如所期望的，通过改变脂类的相对量和乳状液的水相，包括一种非磷脂的本发明的护肤组合物可为膏霜制剂型或洗剂制剂型。组合物的pH范围至少为约5～约9，优选为约5～约7。只要当前用于护肤制剂中的多种膏霜类或洗剂类制剂或组合物中的任何一种物质为非磷脂，且其与类视色素化合物化学相容，就可以采用这种物质。非磷脂脂质体的油相与水相的比值可为约5∶95～约40∶60。两相的实际比值取决于期望得到的成品。本发明的优点、根据本发明所制备的护肤组合物的具体实施方案、以及与申请专利保护的本发明范围以外的组合物的比较，均以下述实施例说明。但是要知道，本发明并不限于各种实施例中所给出的具体限定，而是限于所附权利要求的范围。比较实施例1制备了三种视黄醇(维生素A醇)水包油乳状液，其具有表1所列的重量百分比组成。在表1中，符号“O/W”表示水包油组合物。这些乳状液的制备按下述步骤进行。将标题“水相组分”下所列的组分加到第一个装有不锈钢搅拌器的玻璃容器内，在氩气层的保护下加热搅拌到75℃～85℃。将标题“油相组分”下所列的组分加到第二个装有不锈钢搅拌器的玻璃容器内，在氩气层下加热搅拌到约85℃～90℃。将标题“类视色素混合物”下所列的组分加到第三个装有不锈钢搅拌器，并于室温在氩气层下搅拌的玻璃容器内。在所有情况下继续进行搅拌，直到达到均匀。然后将75℃～85℃的水相组分加到油相组分中。加入过程中，油相组分保持在85℃～90℃，同时在氩气层下搅拌。在90℃温度和氩气层保护下，将水相组分和油相组分的混合物搅拌到形成均一的水包油乳状液。将所得乳状液冷却到约50℃～53℃后，在搅拌下加入类视色素混合物。添加类视色素混合物过程中，将乳状液用氩气覆盖，温度保持在约50℃～53℃，在类视色素混合物添加完毕后，将乳状液在氩气层下搅拌逐渐冷却到室温(约21℃)。将乳状液成品在氩气层下转移到即刻弯曲并紧紧盖顶的封端的铝管内(2盎司大小)。然后将封闭的管放置一边，测定不同温度下贮存不同时间段后视黄醇的稳定性。视黄醇在紫外光影响下会降解。所以，在乳状液制备过程的全部阶段均需注意，以防止视黄醇暴露在紫外光下。关闭操作区的灯或让各种处理步骤和加工步骤在黄色光下进行，可达到这一目的。表1样品设计ABC油相组分</tables>类视色素混合物</tables>在上表1中，设计为混合物A的油相组分中的组分由1.50克肉豆蔻酸肉豆蔻酯；1.25克油酸(Emersol228)；1.25克硬脂酸甘油酯(Emerest2400)；1.25克硬脂酸(Emersol132)；1.00克棕榈酸异丙酯；1.00硬脂氧基三甲基硅烷(DowCornmg580Wax)；0.50合成蜂蜡；0.50克硬脂醇和0.50克十六烷醇组成。通过在一玻璃容器内搅拌所指定组分制备混合物A，在加热下搅拌直到所有组分液化混匀；将液化混合物倒入浅容器中；让混合物冷却到室温。在不同温度贮存不同时间后，测定表1中水包油样品A、B和C的所有反式视黄醇浓度。可用任何适宜的分析方法测定视黄醇和其它类视色素如视黄醛(维生素A醛)、乙酸视黄酯和棕榈酸视黄酯的浓度。正如本发明所报导的，我们通过表明稳定性的高压液相色谱(HPLC)法来测定类视色素的浓度，其中色谱仪装有一反相5微米C-8柱(长25厘米×直径4.6厘米)和一340纳米的紫外检测器。待分析样品用50％(重量)甲醇溶液和50％(重量)乙酸乙酯稀释到浓度为18微克/毫升，然后在340纳米处检测类视色素。梯度移动相由5％在乙腈中的四氢呋喃构成的有机相部分和0.05N乙酸铵构成的水相部分组成。溶剂程序起始组成为70％有机相/30％水相，13分钟时直线增加到80％有机相/20水相，随后又在15分钟时直线增加到100％有机相，在此停留到19分钟。当向色谱仪中注入15微升样品溶液后，开始运作流速为2毫升/分钟的分析条件，控制恒温40℃。视黄醇(维生素A醇)的停留时间为约6.4分钟。视黄醛(维生素A醛)、乙酸视黄酯和棕榈酸视黄酯的停留时间分别为约7.5分钟、10.1分钟和18.7分钟。据发现，HPLC结果的重现性好于3％标准误差。结果如下样品A室温下(21℃±1℃)老化26周后，在乳状液中仅发现起始量的30％的全反式视黄醇。40℃老化26周后，在乳状液中仅发现起始量的3％的全反式视黄醇。由此可以得出结论，含有视黄醇和丁基化羟基甲苯(BHT)-一种油溶性抗氧剂的水包油乳状液不具有令人可接受的视黄醇化学稳定性。样品B室温下老化13周后，在乳状液中发现起始量的87％的全反式视黄醇。40℃老化13周后，在乳状液中仅发现起始量的4％的全反式视黄醇。50℃老化13周后，在样品B中未检出全反式视黄酸。室温下老化26周后，在乳状液中发现起始量的57％的全反式视黄醇。由此可以得出结论，包含全反式视黄醇、BHT和EDTA二钠(一种螯合剂)的水包油乳状液中全反式视黄醇的化学稳定性不令人满意。样品C室温下老化13周后，在乳状液C中发现起始量的60％的全反式视黄醇。40℃老化13周后，发现23％的全反式视黄醇。50℃贮存13周后，样品C中未发现全反式视黄醇。室温下老化26周后，在样品C中发现起始量的42％的全反式视黄醇。室温下老化52周后，在样品C中剩下起始浓度的31％的全反式视黄醇。从上述老化结果可以得出结论，在包含全反式视黄醇和油溶性抗氧剂(BHT)、水溶性抗氧剂(抗坏血酸)和螯合剂(乙二胺四乙酸)的水包油乳状液中，全反式视黄醇的化学稳定性不令人满意。比较实施例2制备了一种视黄醇(维生素A醇)的磷脂脂质体制剂，其具有在CILAGAG制表2中所列的重量百分比组成。50℃老化4周后，制剂中仅发现起始量的64.87％的视黄醇，其不满足稳定性标准。表2</tables>比较实施例3根据美国专利4,485,054和4,761,288，BioZone制备了视黄醇(维生素A醇)的一种磷脂脂质体制剂。50℃老化4周后，制剂中只发现原始量的64.61％的视黄醇，其不满足稳定性标准。比较实施例4根据美国专利4,911,928，位于新泽西州的MicroVesicularSystems，Inc.制备了视黄醇(维生素A醇)的一种非磷脂脂质体制剂。50℃、40℃和室温下老化12周后，制剂中分别仅发现为原始量的58.1％、79.4％和89.3％的视黄醇，其不满足稳定性标准。结果清楚地证实，视黄醇在磷脂和非磷脂脂质体型制剂中，比在水包油乳状液中更稳定。虽然视黄醇从水包油制剂型转变为非磷脂脂质体制剂型被部分稳定，但其在室温下的贮存期限仅为12周，其化学上仍不令人满意。实施例5和6根据下文所阐述的方法用下列组合物将视黄醇包胶于非磷脂脂质体制剂中。最终制剂的pH为约5.6。实施例5实施例6油相％(重量)％(重量)辛基癸酸三甘油酯10.00％10.00％胆固醇5.56％6.80％二硬脂酸甘油酯4.33％5.30％十八烷醇3.90％4.75％Steareth-103.28％4.00％单硬脂酸甘油酯2.08％2.55％多山梨醇酯801.00％1.05％生育酚乙酸酯0.15％0.34％丁基化羟基甲苯0.05％0.05％水相去离子水68.14％63.90％柠檬酸0.13％0.12％氢氧化钠0.03％0.07％羟苯甲酸甲酯0.20％0.20％羟苯甲酸丙酯0.03％0.03％活性组分视黄醇(45％(重量))1.12％0.34％在黄色光下和氩气层内操作，以减少制剂中的氧量，将油相组分混合在一起并加热到约85℃的温度。将水相组分混合在一起并加热到约85℃的温度，然后在定相前，将其冷却到60℃。用氩气吹洗水相除去氧。通过把水相泵抽通过购自新泽西州MicroVesicularSystems，并被描述于美国专利4,895,452的Novosome脂质体制造机，使该设备平衡到约为60℃的温度。将1.13％的视黄醇(45％活性物)加到油相中。将水相和油相一起泵抽通过Novosome制造机，用带夹套、已被氩气层保护的不锈钢釜(由fryma制造)收集产品。该釜装有刮刀式搅拌器、齿式胶体磨、溶解器和真空脱气系统。将产品抽真空，直到釜内压力降到0.8毫巴。在氩气层保护下，将产品分装入适宜的包装内。适宜的包装其选自铝管、罐、唧筒和/或喷雾装置。示于表3和表4中的稳定性结果清楚地表明视黄醇在实施例5和6中比在实施例4中更稳定，也满足50℃贮存13周后，余量80％的稳定性标准。当视黄醇浓度由0.153％变为0.504％时，其稳定性无明显区别。表3在不同温度下，实施例5中视黄醇的稳定性表4在不同温度下，实施例6中视黄醇的稳定性实施例7为进一步改善本发明制剂，在暗室内没有下文所述的氩气层保护，制备了具有水溶性抗氧剂抗坏血酸和螯合剂EDTA二钠的制剂。表5中所概括的数据表明实施例7中视黄醇的稳定性可与实施例5相比，实施例5是在黄色光下用氩气层保护而不加抗坏血酸和EDTA二钠制备的。结果还表明不需使用氩气层，添加抗坏血酸/EDTA二钠可能会提高Novosome脂质体中视黄醇的化学稳定性。所以，水溶性抗氧剂也可用在本发明的组合物中，如抗坏血酸、亚硫酸钠、偏亚硫酸氢钠、亚硫酸氢钠、硫代亚硫酸钠、甲醛化次硫酸钠、异抗坏血酸、硫甘油、硫代山梨糖醇、硫脲、巯基乙酸、半胱氨酸盐酸盐、1，4-重氮二环-(2，2，2)辛烷及其混合物。％(重量)二硬脂酸甘油酯2.80％胆固醇1.00％POE-10十八烷醇1.40％十八烷醇和Ceteareth-201.50％Cetearyl醇和Ceteareth-201.00％乙酸十六烷酯和乙酰化羊毛脂醇1.00％DowCorning344流体硅油5.00％生育酚0.15％丁基化羟基甲苯0.05％甘油10.00％羟苯甲酸甲酯0.20％羟苯甲酸丙酯0.03％氯化钠0.10％多山梨醇酯800.75％抗坏血酸0.10％EDTA二钠0.10％丁二醇10.00％C12～15烷基苯甲酸酯6.70％视黄醇(45％(重量))1.12％10毫摩尔/升柠檬酸缓冲液57.00％表5实施例7中视黄醇的稳定性实施例8为改善视黄醇配方的化妆优雅性，将视黄醇(实施例8A)的非磷脂脂质体制剂与不同份数、载有非磷脂脂质体(实施例8B)的30％(重量)环甲聚硅氧烷物理混合。其稳定性结果被概括于表6～8中。实施例8A％(重量)水54.95％辛基癸酸三甘油酯6.00％96％甘油10.00％丁二醇10.00％胆固醇3.95％二硬脂酸甘油酯3.15％十八烷醇2.85％Steareth-102.50％生育酚乙酸酯2.00％单硬脂酸甘油酯1.58％多山梨醇酯801.00％视黄醇(45％(重量))0.75％柠檬酸0.50％氢氧化钠0.25％羟苯甲酸甲酯0.20％EDTA二钠0.10％丁基化羟基甲苯0.10％抗坏血酸0.10％羟苯甲酸丙酯0.03％实施例8B(载有非磷脂脂质体的30％(重量)环甲聚硅氧烷)％(重量)水40.10％环甲聚硅氧烷30.00％二硬脂酸甘油酯7.95％96％甘油7.00％1，3-丁二醇7.00％Steareth-103.98％胆固醇1.97％柠檬酸钠0.95％多山梨醇酯800.52％柠檬酸0.16％羟苯甲酸甲酯0.14％生育酚乙酸酯0.11％抗坏血酸0.07％EDTA二钠0.07％羟苯甲酸丙酯0.02％表6.实施例8C(50％样品8A和50％样品8B)</tables>表7实施例8D(60％样品8A和40％样品8B)</tables>表8.实施例8E(70％样品8A和30％样品8B)</tables>为把化妆优雅性调到原始配方，当将非磷脂脂质体视黄醇制剂与30～50％载有非磷脂脂质体制剂的30％(重量)环甲聚硅氧烷混合时，数据显示其稳定性无明显变化。这点有很大的意义，因为优雅性特色对于顺应消费者极其重要。实施例9pH对非磷脂脂质体制剂中视黄醇稳定性的影响为定义本发明含有视黄醇组合物的最有效pH范围，用稀盐酸或稀氢氧化钠将实施例8D的pH调到3.6～7.4。将样品贮存在不同温度下(4℃、30℃、40℃和50℃)。定期取样做物理和化学评价。图1结果清楚地表明在50℃时，视黄醇霜的最佳pH范围为大于5。实施例9脂质体制剂的体外生物利用率通过由制剂所释放的药物的利用率以及使用后皮肤渗透的程度而定义的皮肤的生物利用率，通常被用作药效的良好标志。通过使用FRANZ扩散细胞的标准体外释放试验和皮肤渗透试验测定视黄醇的体外生物利用率。为了释放研究，称取一定量霜施于架在每个FRANZ扩散细胞上面的合成膜上。合成膜的作用是作霜的载体，不对药物释放产生明显阻力。每间隔预定时间，从受体室采样。用高压液相色谱(HPLC)测定由制剂释放到受体溶液中的视黄醇量。图2结果清楚地表明非磷脂脂质体实施例8C中视黄醇的释放比RoCs.a(油包水，0.15％视黄醇)制剂中视黄醇的释放快得多，RoCs.a是一种根据在市场上的、Wang等人的未决专利所生产的稳定油包水霜。在7小时末时，从非磷脂脂质体和RoCs.a中分别释放出约10％和5％的视黄醇。除用人尸体皮肤替代合成膜外，还用类似方案作为释放研究进行体外皮肤渗透的研究。在48小时末时，彻底清洁皮肤表面，用HPLC分析渗透的视黄醇量。发现，可将非磷脂脂质体制剂工程化，以提供广范的生物利用率。例如，与RoCs.a产品相比，实施例8C(其为载有非磷脂脂质体的0.34％视黄醇与载有非磷脂的30％环甲聚硅氧烷的50∶50混合物)具有更高的视黄醇皮肤渗透性。另一方面，实施例6(载有非磷脂的0.15％视黄醇)提供了与RoCs.a产品(图3)相类似的皮肤渗透性。实施例10皮肤刺激试验评价了含有视黄醇的非磷脂脂质体制剂的皮肤刺激性，还将其与油包水视黄醇制剂进行比较。范围和方法改进的Draize兔原发性皮肤刺激试验，是预测试样经与未损伤和故意擦伤的新西兰白兔皮长期封闭接触时，试样诱发炎症反应能力的一种方法。暴露一定时间后，移去试样，评价施样位置。由此数据，计算每个试样的原发性皮肤刺激(PDI)指数，并分类。取0.25～0.30克试样施于25毫米含有非织造魏布里衬垫的山顶室(HilltopChambers)。然后将该室施予适宜的试验位置，用Dermicel带条固定。将动物的躯干缠住，以封闭试验位置和保持试样在原处。暴露4小时后，移去试样，在1小时后读数以使皮肤达到平衡。平衡期后，检查试验处的皮肤刺激症状，施样72小时后，再复查一次，并用如下标准评级。PDI指数类别0.0无刺激0.1～2.0柔和刺激2.1～5.0中度刺激5.1～8.0重度刺激表9局部制剂的刺激性一般是由活性物和表面活性剂引起。表9的结果说明含有约2％表面活性剂的0.15％视黄醇油包水制剂，表现出柔和或接近中度的刺激性。意外的是，含有多于8％表面活性剂的0.15％视黄醇非磷脂脂质体制剂，表现出与所检测的油包水制剂相类似的刺激性。结果指出非磷脂脂质体制剂具有减少由制剂组分所引起的刺激性的功效。实施例11化妆性能的评价对三种非磷脂脂质体制剂和一种含有0.15％视黄醇的油包水乳状液(一种由RoCs.a市售的稳定视黄醇产品)进行定量描述分析(QDA)。将Procter&Gamble的商品NightofOlay作对照。评价的目的是测定视黄醇霜的总体化妆特性。评价由一组经过训练的科学家来进行。评价参数为置于杯中的外观、手指间的感觉、使用过程中的感觉和使用后的皮肤感觉。施用后各要素的结果和用于简单比较的NightofOlay结果一并示于图4中。结果指出视黄醇脂质体制剂优于油包水视黄醇。结果还指出不破坏视黄醇的稳定性，对脂质体制剂稍做改进可控制油脂性，油脂性是油包水乳状液的大缺陷。实施例6、8的制剂和两种商品组合物的比较结果列于图4中。根据上述观察可知，本发明的产品出人意料地提高了化学稳定性、提供了类视色素对皮肤的生物利用率程序控制能力(bioavailabilityprogrammability)，且改善了媒介物的化妆优雅性，这些改进均可用一种非磷脂脂质体制剂来实现。权利要求1.一种包含非磷脂脂质体和选自视黄醇、视黄醛、乙酸视黄酯、棕榈酸视黄酯及其混合物的类视色素的护肤组合物，所述组合物还包含一个选自下列的稳定体系a)一种油溶性抗氧剂；和b)一种螯合剂和至少一种油溶性抗氧剂；其中，所述组合物的pH至少为约5～约10，50℃贮存13周后，所述组合物至少保持80％的所述类视色素。2.一种根据权利要求1的组合物，其中，所述类视色素为维生素A醇3.一种根据权利要求1的组合物，其中，所述类视色素为维生素A酸。4.一种根据权利要求1的组合物，其中，所述类视色素为维生素A醛。5.一种根据权利要求1的组合物，其中，所述油溶性抗氧剂选自丁基化羟基甲苯、抗坏血酸棕榈酸酯、丁基化羟基茴香醚、α-生育酚、苯基-α-萘胺及其混合物。6.一种根据权利要求1的组合物，其中，所述螯合剂选自乙二胺四乙酸及其衍生物和盐、二羟乙基甘氨酸、柠檬酸、酒石酸及其混合物。7.一种根据权利要求6的组合物，其中，所述螯合剂选自乙二胺四乙酸及其衍生物和盐。8.一种根据权利要求1的组合物，其中，所述组合物的pH为约5～约7。9.一种包含非磷脂脂质体和选自视黄醇、视黄醛、乙酸视黄酯、棕榈酸视黄酯及其混合物的类视色素的护肤组合物，所述组合物还包含一个含有油溶性抗氧剂的稳定体系，其中，所述组合物的pH至少为约5～约10，所述组合物在50℃贮存13周后，保留至少80％的所述类视色素。10.一种根据权利要求9的组合物，其中，所述的油溶性抗氧剂选自丁基化羟基甲苯、抗坏血酸棕榈酸酯、丁基化羟基茴香醚、α-生育酚、苯基-α-萘胺及其混合物。11.一种包含非磷脂脂质体和选自视黄醇、视黄醛、乙酸视黄酯、棕榈酸视黄酯及其混合物的类视色素的护肤组合物，所述组合物还包含一个含有至少一种油溶性抗氧剂和一种螯合剂的稳定体系，其中，所述组合物的pH至少为约5～约10，所述组合物在50℃贮存13周后，保持至少80％的所述类视色素。12.一种根据权利要求11的组合物，其中，所述的油溶性抗氧剂选自丁基化羟基甲苯、抗坏血酸棕榈酸酯、丁基化羟基茴香醚、α-生育酚、苯基-α-萘胺及其混合物。13.一种根据权利要求11的组合物，其中，所述的螯合剂选自选自乙二胺四乙酸及其衍生物和盐、二羟乙基甘氨酸、柠檬酸、酒石酸及其混合物。14.一种根据权利要求9的组合物，其中，所述的类视色素为维生素A醇。15.一种根据权利要求11的组合物，其中，所述的类视色素为维生素A醇。16.一种根据权利要求9的组合物，其中，pH为约5～约7。17.一种根据权利要求11的组合物，其中，pH为约5～约7。全文摘要本发明涉及一种护肤组合物,其含有作为活性组分的类视色素化合物,该化合物被包胶在非磷脂脂质体中,并且长时间化学稳定。文档编号A61K8/67GK1185729SQ96194264公开日1998年6月24日申请日期1996年4月3日优先权日1995年4月3日发明者刘主成,M·优素福,王嘉宗申请人:庄臣消费品有限公司