专利名称：继发性白内障抑制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及可用作继发性白内障抑制剂的药物组合物。
更具体地，本发明涉及用于白内障手术后继发性白内障的抑制剂，它含有下式表示的N-(3,4-二甲氧基肉桂酰)氨茴酸或其药学上可接受的盐作为活性成分
背景技术：
白内障是一种难治的眼科疾病，该病会因多种因素而发病和发展，随后因晶状体浑浊而导致视力下降。绝大多数是与年龄有关的高龄白内障。白内障的发病率在60多岁者中据信为60-70％，在80多岁或更高龄者接近100％。在逐渐迈向由大部分老年人所构成的社会过程中，预防和治疗白内障将会变得更加重要。然而，在目前，还没有对白内障的发展有确实抑制活性的治疗剂。因此，需要开发有效的治疗剂。所以，目前白内障的治疗最终取决于用眼镜、隐性眼镜等来矫正视力，或者用手术治疗，例如在囊外白内障摘除术之后将人工晶体插入到晶状体囊中。
在白内障手术中，已指出手术后的继发性白内障是一大问题。继发性白内障是指在囊外白内障摘除术之后残留的后囊层(posterior capsule)表面的浑浊。继发性白内障的机理基本如下所述。即，在切除了晶状体上皮细胞(前囊层)之后，会因残留晶状体上皮细胞(在摘除晶状体皮质时没有完全被去除)迁移到后囊层并增生而导致后囊层浑浊化，从而导致继发性白内障。此外，继发性白内障可起源于残留的晶状体上皮细胞在赤道部异常增生，并随后形成Elschnig珠。
在白内障手术中，不可能完全去除晶状体上皮细胞，因此难以完全防止继发性白内障。据称，上述后囊层浑浊化的发生率在无晶状体眼中为40-50％，在人工晶状体眼(pseudophakic eye)中为7-20％。
另一方面，在白内障的药疗法领域，广泛的研究已经积极地进行，以便找到能够抑制继发性白内障的物质。迄今为止，例如已证实代谢拮抗剂如丝裂霉素、柔红霉素、5-氟尿嘧啶和秋水仙素均是有效的。然而，这些药物存在问题，例如严重的副作用[Atarashii Ganka,Vol.12,No.pp451-452(1995)；Japanese Journal ofOphthalmic Surgery,Vol.8,No.3,pp439-446(1995)]，而且在临床上还不足以应用。此外，已报道，当插入的人工晶体涂有吲哚美辛(indometacin)时，可显著抑制继发性白内障的形成，而且乙二胺四乙酸(EDTA)对继发性白内障也是有效的[Japanese Journal of Ophthalmic Surgery,Vol.8,No.3,pp439-446(1995)；IOL&RS,Vol.19 No.2 pp.78-82(1995)；日本专利申请出版(公开)No.Hei.8-175984]。然而，还未开发出防止和抑制继发性白内障的在临床上令人满意的药物。
本发明的由上式(Ⅰ)表示的N-(3,4-二甲氧基肉桂酰)氨茴酸(一般名称曲尼司特(Tranilast))，已经广泛地被用作药物治疗变态反应病如支气管哮喘、过敏性鼻炎、特异反应性皮炎和变态反应性结膜炎，以及治疗皮肤疾病如疤痕疙瘩和肥大性疤痕(hypertrophic scar)。例如，已知道曲尼司特对下列现象有抑制作用变态反应造成的化学中介物释放，在皮肤组织中成纤维细胞造成的胶原过度堆积，和在冠状动脉血管中平滑肌细胞的过度增生。
然而，没有公开过曲尼司特对继发性白内障形成有抑制活性，而且也根本不知道曲尼司特可用作继发性白内障的抑制剂。
发明公开内容本发明涉及一种继发性白内障抑制剂，它含有下式表示的N-(3,4-二甲氧基肉桂酰)氨茴酸或其药学上可接受的盐作为活性成分
本发明涉及一种预防或治疗继发性白内障的方法，它包括施用上式(Ⅰ)所表示的N-(3,4-二甲氧基肉桂酰)氨茴酸或其药学上可接受的盐。
本发明还涉及上式(Ⅰ)所表示的N-(3,4-二甲氧基肉桂酰)氨茴酸或其药学上可接受的盐的用途，它们被用于制造用于预防或治疗继发性白内障的药物组合物。
此外，本发明涉及上式(Ⅰ)所表示的N-(3,4-二甲氧基肉桂酰)氨茴酸或其药学上可接受的盐作为继发性白内障抑制剂的用途。
本发明人进行了广泛研究，以寻找对继发性白内障形成有抑制作用的化合物。结果，发现本发明由上式(Ⅰ)表示的N-(3,4-二甲氧基肉桂酰)氨茴酸对晶状体上皮细胞增生有显著的抑制作用，因而可极为有效地作为继发性白内障抑制剂，由此构成了本发明的基础。
相应地，本发明人证实，在用大鼠晶状体上皮细胞进行体外试验中，证实了曲尼司特可明显地抑制晶状体上皮细胞的增生，从而证实了对细胞增生的抑制活性。
结果，曲尼司特对晶状体上皮细胞增生有优异的抑制作用，因而是极为有用的可用作继发性白内障抑制剂的化合物。
因此，可用作继发性白内障抑制剂的药物组合物可这样制备，即，使其含有曲尼司特或其药学上可接受的盐作为活性成分。
用作活性成分的曲尼司特及其盐的各种制备方法是已知的，这些化合物可方便地根据文献中所述的方法制得(日本专利申请出版物(kokoku)No.Sho.56-40710；同上(ibid)No.Sho.57-36905；同上No.Sho.58-17186；同上No.Sho.58-48545；同上No.Sho.58-55138；同上No.Sho.58-55139；同上No.Hei.01-28013；同上No.Hei.01-50219；同上No.Hei.03-37539等)。
作为曲尼司特的药学上可接受的盐的例子，可以例举的有与无机碱形成的盐如钠盐和钾盐，与有机胺(如吗啉、哌嗪和吡咯烷)形成的盐，以及与氨基酸形成的盐。
当本发明的药物组合物被用于实际治疗时，可根据使用情况而采用各种不同剂型的药物组合物。较佳地，可以例举的有眼药水、针剂、眼药膏，或者例如在掺入药丸或微囊后进行植入(plantation)，以及在预先涂于人工晶体之后再插入晶体的方法。
这些药物组合物可根据常规方法通过混合、稀释或溶解而进行配制，并且偶尔添加合适的药物添加剂，如赋形剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、稀释剂、缓冲剂、等渗剂(isotonicities)、防腐剂、润湿剂、乳化剂、分散剂、稳定剂和助溶剂，而且该配制过程可根据剂型用惯常方式进行。
例如，眼药水的配制可这样进行将曲尼司特或其药学上可接受的盐与碱性物质(basic substance)一起通过加热溶解于无菌水(在无菌水中溶解有表面活性剂)中，加入聚乙烯吡咯烷酮，并可任意地加入合适的药物添加剂如防腐剂、稳定剂、缓冲剂和等渗剂、抗氧化剂和增粘剂，然后使其完全溶解。
可通过细针，将针剂直接注射入病理组织如角膜、晶状体和玻璃质中，或它们相邻的组织中。针剂还可被用作眼内灌注液。
本发明的药物组合物可以缓释剂形式给药。例如，曲尼司特或其盐可被掺入以缓释聚合物为载体的药丸或微囊中，然后将该药丸或微囊通过手术植入待治疗的组织。此外，曲尼司特或其盐还可通过插入预先涂有药物的人工晶体而得以应用。作为缓释聚合物的例子，可例举的有乙烯-乙烯基乙酸酯共聚物、聚羟基甲基丙烯酸酯(polyhydrometaacrylate)、聚丙烯酰胺、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素、乳酸聚合物、乳酸-乙醇酸共聚物等，较佳地可例举的是可生物降解的聚合物如乳酸聚合物和乳酸-乙醇酸共聚物。
当本发明的药物组合物被用于实际治疗时，作为活性成分的曲尼司特或其药学上可接受的盐的剂量，可根据待治疗的每个病人的体重、年龄、性别、症状程度而合理地加以确定。例如，当滴注入眼内时，这些化合物的给药量约为每个成人10微克-50毫克/天。
取决于待治疗病人的症状程度和治疗效果，曲尼司特或其药学上可接受盐的剂量可以适当地增加或减少。
实施例接着，通过以下实施例更详细地阐述本发明。
实施例对晶状体上皮细胞增生的抑制活性(1)培养大鼠晶状体上皮细胞采集大鼠晶状体，将其切成细长条。将细长条粘附于培养皿上并在含10％胎牛血清(FBS)的Dulbecco改进的Eagle培养基(DMEM)上，在含5％二氧化碳的空气中，于37℃继代培养4天。在第4天时(在晶状体上皮细胞从晶状体组织中迁移出并增生时)，培养基被吸去，用磷酸盐缓冲液(PBS(-))轻柔地洗涤细胞。然后，吸去PBS(-)，将一份含0.02％EDTA的0.25％胰蛋白酶溶液加至培养皿，在相差显微镜下观察细胞形态。当细胞变圆时，将等量的含10％FBS的DMEM加至胰蛋白酶溶液中以终止胰蛋白酶的作用。通过用细长的巴氏吸管吸取培养基，将贴壁细胞(attached cell)从培养皿上收集下来。细胞悬浮液被转移至一锥形容器(spit)，然后向该锥形容器中加入培养基，通过用巴氏吸管吸取而剧烈地混合细胞悬浮液约20次，然后100-110×g离心1分钟。在弃去上清液之后，向沉淀物加入新鲜的培养基，然后通过用巴氏吸管吸取而制备晶状体上皮细胞的悬浮液。该悬浮液在含10％FBS的DMEM中进一步进行继代培养，以备试验之用。
(2)制备测试药物将曲尼司特加至1％碳酸氢钠水溶液中，在70℃下加温溶解而制备成1.0％溶液。溶液通过微孔滤器过滤而灭菌，并用含10％FBS的DMEM培养基稀释至最终的规定浓度。
(3)实验方法将细胞悬浮液(2×104细胞/0.1毫升)以及含有各种浓度曲尼司特和10％FBS的DMEM培养基(1.9毫升)加至培养皿(60毫米)中，在含5％二氧化碳的空气中，于37℃进行培养。4天后，吸去培养基，用PBS(-)洗涤细胞，然后将1毫升含0.02％EDTA的0.25％胰蛋白酶溶液加至培养皿中。在通过巴氏吸管吸取而从培养皿收获细胞之后，用血细胞计数器对活细胞的数目进行计数。
(4)结果评估计算每组的平均值和标准差数值。用单向方差分析方法进行显著性的统计分析，证实了统计显著性。之后，用Dunnett氏多重测试法对组之间的显著性进行分析。
(5)结果如
图1所示，曲尼司特以依赖于浓度的方式显著地抑制晶状体上皮细胞的增生。
附图简述图1阐述了曲尼司特对大鼠晶状体上皮细胞增生的抑制活性。纵坐标显示了大鼠晶状体上皮细胞的数目(×104细胞)，横坐标显示了加入的曲尼司特浓度(微克/毫升)。在图中，符号*和**分别表示差异显著性为p＜0.05和p＜0.01。
工业应用性含有曲尼司特或其药学上可接受盐作为活性成分的药物组合物，对晶状体上皮细胞增生有显著的抑制活性，因而适合用作继发性白内障的抑制剂。
权利要求
1．一种继发性白内障抑制剂，其特征在于，它含有下式表示的N-(3,4-二甲氧基肉桂酰)氨茴酸或其药学上可接受的盐作为活性成分
2．一种预防或治疗继发性白内障的方法，其特征在于，包括施用下式所表示的N-(3,4-二甲氧基肉桂酰)氨茴酸或其药学上可接受的盐
3．一种下式所表示的N-(3,4-二甲氧基肉桂酰)氨茴酸或其药学上可接受的盐的用途，其特征在于，被用于制造用于预防或治疗继发性白内障的药物组合物
4．一种下式所表示的N-(3,4-二甲氧基肉桂酰)氨茴酸或其药学上可接受的盐的作为继发性白内障抑制剂的用途
全文摘要
一种继发性白内障的抑制剂,它含有右式表示的N－(3,4－二甲氧基肉桂酰)氨茴酸或其药学上可接受的盐作为活性成分:该化合物对白内障手术后发生的后囊层浑浊化有抑制作用,因而可用于预防或治疗继发性白内障。
文档编号A61K31/196GK1233172SQ97198769
公开日1999年10月27日 申请日期1997年10月9日 优先权日1996年10月14日
发明者伊佐治正幸, 宫田广志, 味泽幸义 申请人:橘生药品工业株式会社