生物医学组合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种生物医学组合物，且特别涉及一种生物医学组合物（biomedical composition),其包含透明质酸衍生物，具有接枝于至少一个伯轻基（primary hydroxyl group)的经修饰组胺酸。
【背景技术】
[0002] 目前已上市的纳米载体抗癌药物皆有药物释放率太慢的问题，使得其虽然可以降 低抗癌药物的副作用，但并无法明显提高药物的治疗效果。
[0003] 而由于肿瘤组织与发炎组织由于其新生血管较不完整，因此造成经由细胞代谢 的产物无法顺利排至全身血液循环，所以此类组织的酸碱值较一般正常组织来的低，约 6. 8-7. 2左右。此外，胞内的核内体（endosome)与溶酶体（Iysosome)环境的酸碱值约为 pH4. 0-6. 5左右，若能调控纳米载体在这些环性下能够快速释放，将可解决现有药物载体药 物释放率太低的问题；同时针对某些生物技术类药物如胜肽、蛋白质、与基因片段等，将这 类生物技术药物于核内体中释放至细胞质中，而不被传送至溶酶体中分解，也将能提升此 类药物的活性。
[0004] 透明质酸是一种由双糖单位D-葡萄糖醛酸及N-乙酰葡糖胺所组成高分子的聚合 物。于透明质酸中，D-葡萄糖醛酸及N-乙酰葡糖胺之间是藉由β-1，3-配糖键来键结，而 双糖单位之间则藉由β-1，4-配糖键来键结。一般而言，透明质酸的分子量从5千到2千万 道尔顿。商品化的透明质酸一般为其钠盐，即透明质酸钠 （Sodium hyaluronate)。
[0005] 而天然透明质酸为水溶性高分子，具有多种适宜作为药物载体的优良特性，例如， 生物兼容性，非免疫原性，在体内可由酶作用而天然降解，并携带大量的-0H、_C00H和-CH， OH等多种功能基团，可进行共价修饰。因此，由上述可知，透明质酸可作为优良的药物载体。
[0006] 目前亟需，生物兼容性高，且可将其设计在适合的环境下才快速释放药物的新颖 药物传送系统。
【发明内容】
[0007] 本发明提供一种生物医学组合物，包括：透明质酸；经修饰的组胺酸；以及聚合物 或C4-C 2tl烷类，其中该经修饰的组胺酸，与该聚合物或C4-C2tl烷类，接枝于该透明质酸的至 少一个伯轻基（primary hydroxyl group)上以与该透明质酸形成透明质酸衍生物,且其中 该经修饰的组胺酸的接枝率为约1-100%，而该聚合物或C4-C 2tl烷类的接枝率为约0-40%。
【附图说明】
[0008] 图IA示出了 HA16k-g-40%B〇CHis材料在ρΗ7· 4的临界微胞浓度结果。
[0009] 图IB示出了 HA16k-g-40%B〇CHis材料在ρΗ5· 0的临界微胞浓度结果。
[0010] 图2Α示出了 HA16k-g-(45%BocHis-c〇-12%Cn)材料在ρΗ7· 4的临界微胞浓度结果。
[0011] 图2Β示出了 HA16k-g-(45%BocHis-c〇-12%Cn)材料在ρΗ5. 0的临界微胞浓度结果。
[0012] 图3示出了以激光散射粒径分析仪测定HA16k-g-40%BocHis材料于pH8、pH7. 4、 pH6. 5、pH6和pH5下所形成的微胞粒径的结果。
[0013] 图4示出了透明质酸衍生物的理论解离方程式。
[0014] 图5示出了透明质酸衍生物/阿霉素纳米复合载体（配方DHC1902)的穿透式电 子显微镜照片。
[0015] 图6示出了将配方DHC2101与DHC2501所形成的透明质酸衍生物/阿霉素纳米复 合载体在PH7. 4与pH5. 0进行累计药物释放分析的结果。
[0016] 图7示出了将配方DHC2101与DHC2501所形成的透明质酸衍生物/阿霉素纳米复 合载体以及阿霉素与微脂体包覆的阿霉素以U87MC细胞进行细胞毒性分析的结果。
[0017] 图8示出了 LC-MS/MS分析配方DHC2101与DHC2501所分别形成的透明质酸衍生 物/阿霉素纳米复合载体与阿霉素于大鼠中的血液浓度的结果。
[0018] 图9示出了测定以配方DHC2101所形成的透明质酸衍生物/阿霉素纳米复合载体 (5mg阿霉素/kg)、配方DHC2501所分别形成的透明质酸衍生物/阿霉素纳米复合载体（5mg 阿霉素/kg)或PBS处理经U87-MG人类多型性神经胶母细胞瘤细胞株植入的裸小鼠的肿瘤 大小的结果。
[0019] 图10示出了透明质酸/DACHPt (PtHClOl)与透明质酸衍生物/DACHPt纳米复合载 体（PtHC305)的穿透式电子显微镜照片。
[0020] 图11示出了将配方PtHClOl所形成的透明质酸/DACHPt纳米复合载体、配方 PtHC201、PtHC301与PtHC401所分别形成的透明质酸衍生物/DACHPt纳米复合载体在 PH7. 4进行累计药物释放分析的结果。
[0021] 图12示出了以感应偶合电楽-原子放射光谱（Inductively coupled plasma with atomic emission spectroscopy, ICP-AES)分析奥沙利钼（oxaliplatin)、配方 PtHClOl 所 形成的透明质酸/DACHPt纳米复合载体、配方PtHC305与配方PtHC603所分别形成的透明 质酸衍生物/DACHPt纳米复合载体于大鼠中的血液浓度的结果。以及
[0022] 图13示出了测定以与配方PtHC604所形成的透明质酸衍生物/DACHPt纳米复合 载体（2mg Pt/kg)、奥沙利钼（2mg Pt/kg)或10%蔗糖处理经HT-29人类大肠癌细胞株植入 的裸小鼠的肿瘤大小的结果。
【具体实施方式】
[0023] 在本发明一实施例中，本发明提供一包含透明质酸衍生物的生物医学组合物。
[0024] 本发明生物医学组合物可包括，但不限于，透明质酸、经修饰的组胺酸，以及聚合 物或C 4-C2tl烷类，其中上述经修饰的组胺酸，与上述聚合物或C4-C2tl烷类，接枝于透明质酸 的至少一个伯羟基上，且其中经修饰的组胺酸与聚合物或C 4-C2tl烷类与该透明质酸形成透 明质酸衍生物。
[0025] 上述经修饰的组胺酸对透明质酸的接枝率可为约1-100%，然需注意的是，上述聚 合物与C 4-C2tl烷类对透明质酸的接枝率则为约0-40%。因此，可以了解的是，上述透明质酸 衍生物为可具有或不具有聚合物或C 4-C2tl烷类接枝于其上。换言的，本发明的生物医学组 合物为，视需要而定包括聚合物或C 4-C2tl烷类。
[0026] 在一实施例中，经修饰的组胺酸的接枝率为约1-100%，而该聚合物或C4-C