前列腺特异性膜抗原抗体药物结合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及包含至少一个非天然编码氨基酸的前列腺特异性膜抗原（PSM)抗体 药物结合物。
【背景技术】
[0002] 前列腺癌是在发达国家中在男性中最常诊断的非皮肤相关性恶性肿瘤。据估计每 六个男性中将有一个诊断患有前列腺癌。在使用基于血清的标记物作为前列腺特异性抗原 (PSA)后，前列腺癌的诊断已极大地改进。另外，前列腺肿瘤相关抗原为肿瘤显像、诊断和 靶向疗法提供标靶。前列腺特异性膜抗原（PSM)(-种前列腺肿瘤相关标记物）是这种标 靶。
[0003] PSMA为高度限制于前列腺分泌上皮细胞膜的糖蛋白。其表达水平已与肿瘤侵袭性 相关。各种免疫组织学研究已表明相比于良性前列腺上皮细胞中的PSMA水平，在前列腺癌 的几乎所有情况下的PSM水平的增加。在包括定位到淋巴结、骨、软组织和肺的前列腺上 皮内瘤形成、晚期雄激素非依赖性前列腺癌和继发性前列腺肿瘤的所有阶段的疾病中发现 剧烈的PSM染色。
[0004] PSMA形成一种非共价同型二聚体，所述同型二聚体基于其处理神经肽N-乙酰天 冬氨酰谷氨酸和谷氨酸结合叶酸衍生物的能力而具有谷氨酸羧肽酶活性。尽管PSM在疾 病发病机制中所起的精确生物作用仍为未知的，但其在前列腺肿瘤中的过度表达为众所周 知的。已表明PSMA执行多个与细胞存活和迁移相关的生理功能。
[0005] 已出现作为用于在如肿瘤学、炎症和传染病的所述领域中增加人类恶性肿瘤数量 的疗法的重要组成部分的基于抗体的疗法。在大多数情况下，治疗功能的基础为基于抗体 的药物对其靶抗原所具有的高程度的特异性和亲和性。以药物、毒素或放射性核素武装单 克隆抗体为mAb可以诱发治疗效果的另一策略。通过组合抗体的精致靶向特异性与毒性效 应分子的肿瘤杀伤力，免疫结合物准许在标靶与正常组织之间进行灵敏的辩别，进而导致 比大部分常规的化学治疗药物较少的副作用。
[0006] 鉴于PSMA的物理性质和其关于前列腺癌进展的表达模式，PSMA为开发用于显 像、诊断和治疗用途的抗体-药物结合物的极好的标靶。随后以诊断剂形式开发首先报导 的PSMA特异性MAb 7E11并且商品化以用于肿瘤显像（ProstaScint,新泽西州普林斯顿 赛托根（Cytogen, Princeton, N. J.))。但是，这种抗体识别将PSMA的有用性限制为作为检 测PSM的显像剂的PSM的细胞内抗原决定基。最近，已鉴别出识别PSM的细胞外部分的 MAb，如J591。可以用于显像、诊断和/或治疗用途的抗PSM抗体-药物结合物因此为所需 的。本发明提供用于前列腺癌中的所述抗体-药物结合物。
【发明内容】
[0007] 本文揭示通过一或多个具有一或多个连接子的非天然氨基酸连接于毒性部分的 PSM抗体，和制造所述非天然氨基酸和多肽的方法。
[0008] 本发明的一些实施例描述一种毒性部分或其盐，其包含式（I):
[0009]
【主权项】
1. 一种包含式（VIII)或（IX)的化合物： 其中：
A为任选的并且当存在时为低碳数亚烷基、经取代低碳数亚烷基、低碳数亚环烷基、经 取代低碳数亚环烷基、低碳数亚烯基、经取代低碳数亚烯基、亚炔基、低碳数亚杂烷基、经取 代亚杂烷基、低碳数亚杂环烷基、经取代低碳数亚杂环烷基、亚芳基、经取代亚芳基、亚杂芳 基、经取代亚杂芳基、亚烷芳基、经取代亚烷芳基、亚芳烷基或经取代亚芳烷基； B为任选的并且当存在时为选自由以下组成的群组的连接子：低碳数亚烷基、经取代 低碳数亚烷基、低碳数亚烯基、经取代低碳数亚烯基、低碳数亚杂烷基、经取代低碳数亚杂 烷基、-〇-、-0-(亚烷基或经取代亚烷基）-、-S-、-S-(亚烷基或经取代亚烷基）-、-S(0) k_(其中k为1、2或3)、_S(0)k(亚烧基或经取代亚烧基）-、_C(0)-、-C(0)-(亚烧基或经取 代亚烷基）-、_C(S)-、-C(S)-(亚烷基或经取代亚烷基）-、-N(R'）-、-NR' -(亚烷基或经取代 亚烷基）_、-C(0)N(R'）-、-CON(R'）-(亚烷基或经取代亚烷基）-、-CSN(R'）-、-CSN(R'）-(亚 烷基或经取代亚烷基）_、-N(R'）C〇-(亚烷基或经取代亚烷基）-、-N(R'）C(0)0-、-S(0) kN(R'）-、-N(R'）C(0)N(R'）-、-N(R'）C(S)N(R'）-、-N(R'）S(0)kN(R'）-、-N(R'）-N=、-C(R'） =N-、-C(R，）=N-N(R，）-、-C(R，）=N-N=、-C(R，）2-N=N-以及-C(R，）2-N(R，）-N(R，）-， 其中每个R'独立地为H、烷基或经取代烷基； R为H、烷基、经取代烷基、环烷基或经取代环烷基； 札为H、氨基保护基、树脂、至少一个氨基酸、多肽或多核苷酸； 馬为0H、酯保护基、树脂、至少一个氨基酸、多肽或多核苷酸； 馬和R4各自独立地为H、卤素、低碳数烷基或经取代低碳数烷基，或R3和R4或两个R3 基团任选地形成环烷基或杂环烷基； Z具有以下结构：
尺5为H、COR8、CrC6烷基或噻唑； 馬为〇H; &为OH或H; Ar为苯基或吡啶； 1?7为Ci-Cj；烧基或氢； L为选自由以下组成的群组的连接子：_亚烷基_、_亚烷基-C(0)-、-(亚烷基-0) n-亚烧基-、-(亚烧基-〇)n-亚烧基-c(o)-、-(亚烧基-〇)n-(CH2)n，-nhc(o)-(ch2) n"-C(Me)2-S_S-(CH2)n，〃-NHC(0)-(亚烧基-〇)n〃〃-亚烧基-、-(亚烧基-〇)n_ 亚烧基-W-、-亚 烷基-C(〇) -w-、-(亚烷基-〇) n-亚烷基-u-亚烷基-c(〇)-和-(亚烷基-〇) n-亚烷基-u-亚 烧基_ ; W具有以下结构： U具有以下结构：
每个n、n'、n〃、n' 〃以及n〃〃独立地为大于或等于1的整数；或其活性代谢物或药学上 可接受的前药或溶剂合物。
2. 根据权利要求1所述的化合物，其中1^为多肽。
3. 根据权利要求2所述的化合物，其中所述多肽为抗体。
4. 根据权利要求3所述的化合物，其中所述抗体为抗前列腺特异性膜抗原（aPSMA)抗 体。
5. 根据权利要求4所述的化合物，其中所述aPSMA抗体包含一或多个非天然编码氨基 酸。
6. 根据权利要求4所述的化合物，其中所述aPSMA抗体包含至少一个但不超过十个非 天然编码氨基酸。
7. 根据权利要求1所述的化合物，其中1?2为多肽。
8. 根据权利要求7所述的化合物，其中所述多肽为抗体。
9. 根据权利要求8所述的化合物，其中所述抗体为aPSMA抗体。
10. 根据权利要求9所述的化合物，其中所述aPSMA抗体包含一或多个非天然编码氨 基酸。
11. 根据权利要求9所述的化合物，其中所述aPSMA抗体包含至少一个但不超过十个 非天然编码氨基酸。
12. -种包含式（X)、（XI)、（XII)或（XIII)的化合物或其盐：
其中：
A为任选的并且当存在时为低碳数亚烷基、经取代低碳数亚烷基、低碳数亚环烷基、经 取代低碳数亚环烷基、低碳数亚烯基、经取代低碳数亚烯基、亚炔基、低碳数亚杂烷基、经取 代亚杂烷基、低碳数亚杂环烷基、经取代低碳数亚杂环烷基、亚芳基、经取代亚芳基、亚杂芳 基、经取代亚杂芳基、亚烷芳基、经取代亚烷芳基、亚芳烷基或经取代亚芳烷基； B为任选的并且当存在时为选自由以下组成的群组的连接子：低碳数亚烷基、经取代 低碳数亚烷基、低碳数亚烯基、经取代低碳数亚烯基、低碳数亚杂烷基、经取代低碳数亚杂 烷基、-〇-、-0-(亚烷基或经取代亚烷基）-、-s-、-S-(亚烷基或经取代亚烷基）_、-S(0) k_(其中k为1、2或3)、_S(0)k(亚烧基或经取代亚烧基）-、_C(0)-、-C(0)-(亚烧基或经取 代亚烷基）-、_C(S)-、-C(S)-(亚烷基或经取代亚烷基）-、-N(R'）-、-NR' -(亚烷基或经取代 亚烷基）_、-C(0)N(R'）-、-CON(R'）-(亚烷基或经取代亚烷基）-、-CSN(R'）-、-CSN(R'）-(亚 烷基或经取代亚烷基）_、-N(R'）C〇-(亚烷基或经取代亚烷基）-、-N(R'）C(0)0-、-S(0) kN(R'）-、-N(R'）C(0)N(R'）-、-N(R'）C(S)N(R'）-、-N(R'）S(0)kN(R'）-、-N(R'）-N=、-C(R'） =N-、-C(R，）=N-N(R，）-、-C(R，）=N-N=、-C(R，）2-N=N-以及-C(R，）2-N(R，）-N(R，）-， 其中每个R'独立地为H、烷基或经取代烷基； R为H、烷基、经取代烷基、环烷基或经取代环烷基； 札为H、氨基保护基、树脂、至少一个氨基酸、多肽或多核苷酸； 馬为0H、酯保护基、树脂、至少一个氨基酸、多肽或多核苷酸； 馬和R4各自独立地为H、卤素、低碳数烷基或经取代低碳数烷基，或R3和R4或两个R3 基团任选地形成环烷基或杂环烷基； Z具有以下结构： 尺5为H、CO2H、Q-C；烷基或噻唑；
&为0H或H; Ar为苯基或吡啶； 1?7为Ci-Cj；烧基或氢； U、L2、L#PL4各自为独立地选自由以下组成的群组的连接子：一键、-亚烷基-、-(亚 烷基-〇)n-亚烷基-J-、-亚烷基' -j-(亚烷基-〇)n-亚烷基-、-j-(亚烷基-〇)n-亚烷 基-、-(亚烷基-0)n-亚烷基-J-(亚烷基-0)n，-亚烷基-J' -、-(亚烷基-0)n-亚烷基-J-亚 烷基' -、-W-、_亚烷基-W-、亚烷基' -J-(亚烷基-NMe) n-亚烷基-W-、-J-(亚烷基-NMe)n-亚 烷基-W-、-J-亚烷基-NMe-亚烷基' -NMe-亚烷基"-W-和-亚烷基-J-亚烷基' -NMe-亚 烷基〃-NMe-亚烷基'〃-W-; W具有以下结构：
? 链个T和T'妯立他亘有W下结抝.
每个n和n'独立地为大于或等于1的整数。
13. 根据权利要求12所述的化合物，其中1^为多肽。
14. 根据权利要求13所述的化合物，其中所述多肽为抗体。
15. 根据权利要求14所述的化合物，其中所述抗体为aPSMA抗体。
16. 根据权利要求12所述的化合物，其中1?2为多肽。
17. 根据权利要求16所述的化合物，其中所述多肽为抗体。
18. 根据权利要求17所述的化合物，其中所述抗体为aPSMA抗体。
19. 一种用于衍生包含式（I)、（III)、（IV)、（V)或（VI)的海兔毒素类似物的方法，所 述方法包含使所述海兔毒素类似物与式（XXXVII)试剂接触，其中式（I)、（III)、（IV)、（V) 或（VI)对应于：
CN104619349A 权利要求书 7/20页
* 其中： Z具有以下结构：
尺5为H、COR8、CrC6烷基或噻唑； R8为 〇H或-NH-(亚烧基-〇)n_NH2; &为OH或H; Ar为苯基或吡啶； 1?7为Ci-Ce烧基或氢； Y为NH2-〇-或甲基； L、Lp L2、LjPL4各自为选自由以下组成的群组的连接子：一键、-亚烷基-、-亚烷 基-C(0)-、-(亚烧基-〇)n-亚烧基-、-(亚烧基-〇)n-亚烧基-C(0)-、-(亚烧基-〇)n-(CH2) 11，-順0(0)-(012)11〃-(](]\16) 2-3-3-(012)11，〃-順(](0)-(亚烧基-〇)11〃〃-亚烧基-、-(亚烧基-〇) n-亚烷基-W-、-亚烷基-c(〇)-w-、-(亚烷基-〇)n-亚烷基-j-、-亚烷基'-j-(亚烷基-〇) n-亚烷基-、-(亚烷基-o)n-亚烷基-j-亚烷基'、-j-(亚烷基-o)n-亚烷基-、-(亚