将研制的支架嵌于球囊表面，银杏内酯B-西罗莫司不对称复合药物洗脱支架经过12个大气压扩张12秒后扫描电镜观察支架表面均勾光滑(图la)，在100倍电子扫描镜下(图lb)，支架表明涂层没有出现明显撕裂，涂层能稳定的应用于裸金属支架表面。
[0026](2)银杏内酯B-西罗莫司不对称复合药物洗脱支架涂层厚度检测:
采用扫描电镜测量支架涂层厚度，支架涂层厚度大约在5-10um，在支架表面均匀覆盖。
[0027](3)银杏内酯B-西罗莫司不对称复合药物洗脱支架聚乳酸涂层的可降解实验:
采用加速降解实验表明，喷涂到支架管材表面的聚乳酸在70°C、降解3天后，质量损失约20-40%，数均分子量由56000降低到了 5000，而降解7天后，降解率达到了 90%，基本完全降解为小分子，见图2。
[0028](4)银杏内酯B-西罗莫司不对称复合药物洗脱支架药物释放实验:
本试验采用韩国英麟ACem9000高效液相色谱(HPLC)及质谱检测系统进行测定，测定结果提示，银杏内酯B-西罗莫司不对称复合药物洗脱支架具有良好的药物生物释放度，在28天时，药物基本完全释放，释放率达到85%左右，见图3。
[0029]实施例3
制备方法同实施例1，除了步骤I中，银杏内酯B与聚乳酸以1:0.7的质量比例混合为“浆液”备用。将西罗莫司与聚乳酸以1:0.7的质量比例混合成为“浆液”备用。
[0030]制得的不对称复合药物洗脱支架采用实施例2同样的方法检测，结果显示:支架表明涂层没有出现明显撕裂，涂层能稳定的应用于裸金属支架表面。该支架的聚乳酸的降解率达到了 90%，药物释放率达到82%。
[0031]实施例4
制备方法同实施例1，除了步骤I中，银杏内酯B与聚乳酸以1:2的质量比例混合为“浆液”备用。将西罗莫司与聚乳酸以I '2的质量比例混合成为“浆液”备用。
[0032]制得的不对称复合药物洗脱支架采用实施例2同样的方法检测，结果显示:支架表明涂层没有出现明显撕裂，涂层能稳定的应用于裸金属支架表面。该支架的聚乳酸的降解率达到了 90%，药物释放率达到86%。
[0033]综上所述，通过滚涂与喷涂结合的方法制造出的银杏内酯B-西罗莫司不对称复合药物洗脱支架具有良好的支架生物稳定性。
[0034]进一步实验表明，银杏内酯B有较强的促进猪髂动脉内皮细胞增殖的作用，在1X10_9 mo 1-Γ1 ~ 2.4Χ10_7 mol七1范围内呈浓度依赖性促进内皮细胞增殖(与正常对照比较，增殖率在1.7% ~ 72.1%)，尤其在OXLDL等氧化因子损伤的环境下，银杏内酯B有较强的促内皮细胞增殖作用，在细胞实验中证实其能下调P38MAPK的表达拮抗西罗莫司对内皮细胞的抑制作用。这提示了银杏内酯B作为涂层药物有利于促进支架内皮化，快速内皮化的本身不仅从根本上预防晚期支架内血栓，还有助于抑制再狭窄的发生。采用聚乳酸(PLA)作为控释载体成功制备银杏内酯B-西罗莫司不对称复合药物支架，并对银杏内酯B和西罗莫司药物释放度进行了检测，发现其呈现稳定且合乎生物学要求的释放度曲线。银杏内酯B-西罗莫司复合药物支架与裸金属支架在动静脉血栓模型，银杏内酯B-西罗莫司复合药物支架在I小时的血液灌流中未有血栓出现，而裸金属支架满布血栓。I周的动物实验结果显示，银杏内酯B/西罗莫司复合药物支架较裸金属支架更快速内皮化，电镜及激光共聚焦显示，银杏内酯B-西罗莫司复合药物支架几乎完全内皮化，而裸金属支架仅为64.3%。因此银杏内酯B与西罗莫司制成复合药物洗脱支架较单纯的西罗莫司具有一定的优势。
[0035]尽管本发明的内容已经通过上述优选实施例作了详细介绍，但应当认识到上述的描述不应被认为是对本发明的限制。在本领域技术人员阅读了上述内容后，对于本发明的多种修改和替代都将是显而易见的。因此，本发明的保护范围应由所附的权利要求来限定。
【主权项】
1.一种银杏内酯B-西罗莫司不对称复合药物洗脱支架，其特征在于，该支架的内表面涂覆有银杏内酯B-聚乳酸涂层；其外表面依次涂覆有银杏内酯B-聚乳酸涂层和西罗莫司-聚乳酸涂层。
2.如权利要求I所述的支架，其特征在于，所述的银杏内酯B-聚乳酸涂层中，银杏内酯B与聚乳酸以质量比计为I :0. 7-2 ;所述的西罗莫司-聚乳酸涂层中，西罗莫司与聚乳酸以质量比计I ：0. 7-2O
3.如权利要求2所述的支架，其特征在于，所述的银杏内酯B-聚乳酸涂层中，银杏内酯B与聚乳酸以质量比计为I :1 ;所述的西罗莫司-聚乳酸涂层中，西罗莫司与聚乳酸以质量比计1:1。
4.如权利要求I所述的支架，其特征在于，所述的支架中，平均每IOmm支架包含6~15ug银杏内醋B，及，5~12ug西罗莫司。
5.如权利要求4所述的支架，其特征在于，所述的支架中，平均每IOmm支架包含IOug银杏内酯B，及IOug西罗莫司。
6.如权利要求I所述的支架，其特征在于，所述的复合药物洗脱支架能够促进血管内皮细胞生长、抗血栓以及抗血管再狭窄。
7.如权利要求I所述的支架，其特征在于，所述的药物涂层的药物缓释时间大于或等于28天，所述的药物涂层的药物释放率能够达到85%。
8.—种根据权利要求I所述的银杏内酯B-西罗莫司不对称复合药物洗脱支架的制备方法，其特征在于，该方法包含以下步骤： 步骤1，涂层药物的配置：将银杏内酯B与聚乳酸以质量比计I :0. 7-2比例混合为浆液备用；将西罗莫司与聚乳酸以质量比计I :0. 7-2比例混合成为浆液备用； 步骤2，为不对称支架内外表面上药：采用喷涂法，将银杏内酯B与聚乳酸的混合浆液喷涂于支架内外表面，然后，低温烘干保存； 步骤3，为不对称支架外表面上药：采用滚涂法，将西罗莫司与聚乳酸的混合浆液涂于支架外表面，然后，低温烘干保存，得到银杏内酯B-西罗莫司不对称复合药物洗脱支架。
9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述的银杏内酯B-西罗莫司不对称复合药物洗脱支架的涂层厚度为5-10um。
10.如权利要求8所述的方法，其特征在于，步骤I中，所述的银杏内酯B与聚乳酸以质量比计为I: I ;所述的西罗莫司与聚乳酸以质量比计为1:1。
【专利摘要】本发明公开了一种银杏内酯B-西罗莫司不对称复合药物洗脱支架及其制备方法。该支架的内表面涂覆有银杏内酯B-聚乳酸涂层；其外表面依次涂覆有银杏内酯B-聚乳酸涂层和西罗莫司-聚乳酸涂层。该制备方法包含：步骤1，将银杏内酯B与聚乳酸以质量比计1：0.7~2比例混合为浆液备用；将西罗莫司与聚乳酸以质量比计1：0.7~2比例混合成为浆液备用；步骤2，将银杏内酯B与聚乳酸的混合浆液喷涂于支架内外表面，低温烘干；步骤3，将西罗莫司与聚乳酸的混合浆液滚涂于支架外表面，低温烘干，得到银杏内酯B-西罗莫司不对称复合药物洗脱支架。本发明的不对称复合药物洗脱支架，具有良好的抗血栓、促进血管支架内皮化及抗再狭窄的作用，可作为新一代冠脉药物支架。
【IPC分类】A61L31-14, A61L31-16, A61L31-10, A61K31-365, A61P9-14, A61P7-02, A61K31-436
【公开号】CN104707186
【申请号】CN201510156496
【发明人】郜俊清, 刘宗军, 殷佩浩, 于文, 陈弢
【申请人】上海市普陀区中心医院
【公开日】2015年6月17日
【申请日】2015年4月3日