一种治疗免疫性血小板减少性紫癜的中药组合物及其制备方法_2

文档序号:8463643阅读:来源:国知局
。性味甘、苦、温,归心、肺经。功效活 血通络,化瘀行血。穿山龙异名较多,各地区有明显差异[2]。《东北药植志》称之为穿骨龙、 穿地龙;《河北药材》称其为狗山药;《山东中药》命名为山常山;《中国经济植物志》取名粉 萆蘚、姜黄、土山薯;《中国药植图鉴》谓之穿山骨;《陕西中草药》起名火藤根;《东北常用中 草药手册》易名串山龙;《浙江民间常用草药》记载有竹根薯、铁根薯、雄姜、黄鞭;《河北中 药手册》叫地龙骨、山花啦、金刚骨。但在全国大部分地区其商品名系薯蓣科植物穿龙薯蓣 (Discorea nipponica Mak)和柴黄姜(Discorea nipponica Mak. var. rosthornii Pr. et Burk)的干燥根莖。而福建省历来以卫矛科植物南蛇藤(Celastrus orbiculatus Thunb. [C. articulatus Thunb])的干燥根作为穿山龙药用原材料,习称"福建穿山龙"[4]。穿山 龙的药用价值日益受到研宄者重视。根据地方用药习惯,穿山龙功效有一些差别,《东北药 植志》记载:"舒筋活血,治腰腿疼痛,筋骨麻木。"《陕西植药调查》认为穿山龙可"制虐,止 疼,消肿。"《陕西中草药》描述"治咳嗽,风湿性关节炎,大骨节病关节痛,消化不良,疟疾, 跌打损伤,痈肿恶疮。"《山东中药》则认为穿山龙能够"治风寒湿痹。"《中药大辞典》中记 载穿山龙功能"活血舒经,消食利水,祛痰,截疟"。
[0025] 近年来,由于穿山龙在中药制剂得到广泛应用,继中国药典1977年版收载了该品 种之后,中国药典2010年版一部再次收载该品种,明确规定穿山龙药材的功效为祛风湿, 止痛,舒筋活络,止咳平喘祛痰。用于风湿性关节炎,腰腿疼痛、麻木,大骨节病,跌扑损伤, 闪腰岔气,慢性支气管炎,咳嗽气喘等症。
[0026] (4)丹参:出自于《神农本草经》。别名红根。为唇形科多年生草本植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的根,又称紫丹参。性味苦、微寒。归心、心包、肝经。功效活血祛瘀, 凉血消痈,养血安神。《本经》记载"主心腹邪气,……寒热积聚,破癥除瘕,止烦满,益气。" 《录别》谓"养血,去心腹痼疾结气,腰背强,脚痹,除风邪留热。"《日华子本草》称丹参有"养 神定志,通力关脉。治冷热劳,骨节疼痛,四肢不遂。排脓止痛,生肌长肉。……止血崩带 下,调妇人经脉不匀。血邪心烦,恶疮疥癣,瘿赘肿毒,丹毒。"《本草纲目》曰:"活血,通心 包络"。综合上述,丹参可用于月经不调,经闭痛经,癥瘕积聚,胸腹刺痛,热痹疼痛,疮疡肿 痛,心烦不眠,血液虚少等症[7]。
[0027] (5)断血流:断血流为唇形科植物荫风轮Cliropodoium polycephalum(vaniot) C.Y. Wu et Hsuanex Hsuan或风轮菜Cliropodoium chinense(Benth)0· Kuntze 的干燥地上 部分。性味微苦、辛,凉。归肝经。功效止血。主要用于崩漏,子宫肌瘤出血,尿血,鼻衄,牙 龈出血,创伤性出血等。
[0028] (6)熟地黄:熟地黄甘,微温。归肝、肾经。入血分。具有补血滋润;益精填髓的作 用;熟地能补血滋阴而养肝益肾,凡血虚阴亏、肝肾不足所致的眩晕,均可应用。补血常与 当归、白芍等同用;《本草正》:熟地黄性平,气味纯静,故能补五脏之真阴,而又于多血之脏 为最要,得非脾胃经药那且夫人之所以有生者,气与血耳。气主阳而动,血主阴而静,补气以 人参为主,而芪、术但可为之佐辅一卜血以熟地为主,而人参、熟地,则气血之必不可无,故 凡诸经之阳气虚者,非人参不可,诸经之明血虚者,非熟地不可。凡诸真阴亏损者,有力发 热,为头疼,为焦渴,为喉痹,为嗽痰,为喘气,或脾肾寒逆为呕吐,或虚火载血于口鼻,或水 泛于皮肤,或阴虚而泄利,或阳浮而狂躁,或阴脱而仆地,阴虚而神散者,非熟地之守不足以 聚之;阴虚而火升者,非熟地之重不足以降之;阴虚而躁动者,非熟地之静不足以镇之;阴 虚而刚急者,非熟地之甘不足以缓之;阴虚而水邪泛滥者,舍熟地何以自制;阴虚而真'气 散失者,舍熟地何以归源;阴虚而精血俱损,脂膏残薄者,舍熟地何以厚肠胃。此方中取熟地 黄之滋阴补血之功。
[0029] 主要药效学试验资料:
[0030] 1、实验目的:
[0031] 通过免疫造模法建立ITP小鼠动物模型,观察芪芍生血胶囊对其外周血小板计 数、骨髓巨核细胞数及分类、免疫器官的影响,评价该药治疗效果,为新药研发提供药理学 资料和临床用药依据。
[0032] 2、实验材料
[0033] 2. 1实验药物
[0034] (1)芪芍生血胶囊原膏:临床成人用量为33克生药/60kg/d。本次试验采用固定制 备工艺中试生产的膏剂,由陕西郝其军制药股份有限公司提供;每克包衣颗粒含生药6. 63 克,批号为20140501,将胶囊内容物用生理盐水溶解配成适当浓度,冰箱保存备用。
[0035] (2)血康口服液:由大连金港制药有限公司生产,批号140121 ;使用时用生理盐水 稀释至所需浓度。③醋酸泼尼松:由天津力生制药有限公司生产,批号140203 ;使用时用生 理盐水稀释至所需浓度。
[0036] 2. 2实验试剂:
[0037] (1)小牛血清白蛋白:购于北京同正化学试剂公司,由sigma公司生产,批号: 2508-19-2。
[0038] (2) PBS :购于博士德生物技术有限公司。
[0039] (3)瑞氏染色液与瑞氏缓冲液:购于北京天合力恩化学试剂公司。
[0040] (4) EDTA_Na2抗凝剂:购于博士德生物技术有限公司。
[0041] (5)抗小鼠血小板血清(APS):由中国中医研宄院西苑医院血液病实验室制 备,-20度冰箱保存,使用时用无菌生理盐水稀释。
[0042] (6)其他试剂:血小板稀释液、血小板缓冲液、血小板清洗液:均购于北京兰桥化 学试剂公司。
[0043] 2. 3实验仪器:
[0044] (1)全自动血液分析仪:由中国兰桥医学仪器有限公司生产,型号:M-2100。
[0045] (2)荧光显微镜:日本国生产,型号:0LYMPUS-CHB型。
[0046] (3)细胞离心机:英国SHAND0N生产,型号:Cytospin2型。
[0047] (4)其他仪器:微量天平、数码照相机及手术器材等均系国内制造。
[0048] 2. 4实验动物:
[0049] 选用BALB/c小鼠,体重为18-22g,8周龄,雌雄各半,共84只,由北京维通利华实 验动物技术有限公司提供,许可证编号:SCXK(京)2013-0007。小鼠饲养和实验均在清洁级 动物实验室内进行,合格证号为:京动许号(2010)第039号,医动字第01-2094号(2010)。 小鼠饲料为消毒饲料,由北京科澳协力饲料有限公司供给。小鼠垫料为消毒垫料。笼具用 过氧乙酸溶液消毒。饮用水为净化水。
[0050] 3、实验方法:
[0051] 3. 1抗小鼠血小板血清制备:
[0052] 参考相关文献[1],APS按下列制备方法:①取BALB/C小鼠,乙醚麻醉后,以 EDTA-Na2抗凝从心脏取全血,分离血小板并洗涤,用生理盐水稀释;②取已分离的血小板分 别与等量完全福氏佐剂和不完全福氏佐剂混合成油包水状作好抗原,以含完全福氏佐剂抗 原于0周注射于豚鼠足掌、背及皮下至少四点;以含不完全福氏佐剂抗原分别于1,2,4周注 射于豚鼠足掌、背及腹部皮下至少四点。第5周从豚鼠心脏取不抗凝全血,560gX 10分钟 离心后取上清,即得豚鼠抗小鼠血小板抗血清(GP-APS),并贮存于-20°C冰箱待用;③参照 ELISA法加以改进,用国产冻干酶联A蛋白纯品(上海荣盛制剂厂)代替碱性磷酸酶-蛋白 A酶标抗体检测抗血清效价;④将APS从-20 °C中取出,置56 °C水浴30分钟,用等量BALB/ C小鼠红细胞吸附至少两次,用生理盐水稀释成1 : 4浓度APS待用。
[0053] 3. 2造模方法:
[0054] 参考文献略加改进[2],将84只BALB/C小鼠按外周血小板计数随机分为正常、模 型、血康口服液、醋酸泼尼松、芪芍生血胶囊大剂量、中剂量、小剂量共7组,每组12只。分 组后除正常对照组给同等体积的生理盐水,不予特殊处理外,其余各组均按100 μ l/20g剂 量向小鼠腹腔内注射I : 1稀释的APS,每2天一次重复注射,造模第8天ITP
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