用于头颈部肿瘤联合治疗的制剂及其用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物医药技术领域，是一种用于头颈部肿瘤联合治疗的制剂，具体地 说本发明涉及自噬抑制剂和精氨酸酶的联合制剂，以及在制备治疗头颈部肿瘤药物中的应 用。
【背景技术】
[0002] 精氨酸酶是哺乳动物肝脏中参与尿素循环的一种关键酶，在尿素循环中将精氨酸 转化为鸟氨酸和尿素。精氨酸是维持部分肿瘤细胞生长的必需氨基酸，肿瘤细胞内精氨酸 水平低于一定值后，会导致细胞死亡。精氨酸酶能在体内外特异高效的降解精氨酸。在体外 试验中，精氨酸酶能显著杀伤肝癌细胞、黑色素瘤细胞、胰腺癌细胞以及白血病细胞等（Lam TL, Wong GKj Chong HCj Cheng PNj Choi SC, Chow TL, et al. Recombinant human arginase inhibits proliferation of human hepatocellular carcinoma by inducing cell cycle arrest. Cancer letters. 2009 ;277:91-100. ；Hernandez CPj Morrow Kj Lopez-Barcons LA, Zabaleta J，Sierra R，Velasco Cj et al. Pegylated arginase I: a potential therapeutic approach in T-ALL. Blood. 2010 ；115:5214-21. ；Hsueh ECj Knebel SM, Lo WHj Leung YC，Cheng PN，Hsueh CT. Deprivation of arginine by recombinant human arginase in prostate cancer cells. Journal of hematology&oncology.2012 ； 5:17.)。精氨酸酶治疗肝癌的一期临床结果显示了其良好的成药性能（Yau T，Cheng PNj Chan Pj Chan Wj Chen Lj Yuen Jj et al. A phase Idose-escalating study of pegylated recombinant human arginase I (Peg-rhArgl)in patients with advanced hepatocellular carcinoma. Investigational new drugs. 2012.) 〇 尽管在体外显亦出良 好的效果，精氨酸酶在体内低亲和力和较短的半衰期等因素影响了药物的抗肿瘤疗效。因 此，进一步提高精氨酸酶体内的抗肿瘤活性将有助于其抗肿瘤应用。
[0003] 精氨酸在人体的正常生理功能中具有重要作用，是一种半必须氨基酸，正常体细 胞能够通过尿素循环将其他氨基酸转化为精氨酸，从而抵消外源性精氨酸缺乏；然而，对于 部分精氨酸依赖的肿瘤细胞，由于缺乏尿素循环过程中的关键酶，在外源性精氨酸剥夺时， 无法自身合成精氨酸，最终导致细胞死亡。精氨酸酶能够在体内外降解精氨酸，导致精氨 酸依赖的肿瘤细胞死亡，而对正常细胞无影响。因此，精氨酸酶是一种有很大应用前景的 蛋白酶类药物。目前，精氨酸酶用于肝癌的治疗用研宄已经完成二期临床试验，表现出良好 的应用前景（Mounier N, Heutte N, Thieblemont C，et al. Ten-Year Relative Survival and Causes of Death in Elderly Patients Treated With R-CHOP or CHOPin the GELA LNH-985Trial. Clin Lymphoma Myeloma Leuk.2012[Epub ahead of print]) 〇
[0004] 头颈部恶性肿瘤（head and neck cancer)是威迫人类健康的常见的恶性肿瘤之 一，约占全身恶性肿瘤的4%~10%，90%头颈部恶性肿瘤为鳞状细胞癌（head and neck squamous cell carcinoma，HNSCC) D依据全球流行病学研究机构提供的数据，我国近几年 来头颈部肿瘤的每年平均发病率为25. 22/10万，每一年新发病例约为50万。我国是高发国 家，约占人体恶性肿瘤的10%。目前，对于HNSCC的治疗方法主要以手术为主，综合放疗、 化疗及靶向药物治疗。放射线对肿瘤和正常组织都产生了严重的损害，在杀伤肿瘤的同时， 也损伤了正常组织和细胞，引发一系列副作用，如口干，食欲减退，免疫力降低，可能导致严 重的体力不支。尽管HNSCC的治疗方法不断改进，但HNSCC细胞已经对放化疗产生了抵抗 力，以及放化疗所产生的副作用，HNSCC患者的5年生存率有明显下降。喉癌是最常见的头 颈部恶性肿瘤之一，放疗对于局部早期的Tl和T2型喉癌具有较大优势，但由于喉癌有较高 的复发率和转移率，喉癌的总体生存率及术后喉功能效果并未得到明显改善。因此，寻找一 种新的治疗方法来改善和增强对HNSCC的治疗效果很有必要。
[0005] 细胞自卩莖（autophagy)又叫 II 型程序性死亡（type II programmed cell death)， 是真核生物体内常见的"自我消化"（cellular degradation)的现象，能分解细胞内受 损或多余的细胞器和蛋白产生核苷酸，氨基酸等小分子物质供细胞合成新的蛋白质，并能 维持细胞内微环境的稳定。近年来随着分子生物学及基因技术的发展和对细胞自噬的深 入认识，发现其与多种疾病，尤其是肿瘤的发展关系密切。根据细胞内底物运送到溶酶体 腔内方式的不同，哺乳动物细胞自可分为三种方式：大自卩莖（macroautophagy)、小自· (microautophagy)和分子伴侣介导的自 (chaperone-mediated autophagy，CMA)。主 要概述的大自(以下简称自)与肿瘤发展及治疗关系最为密切（Sridhar S, Botbol Yj Macian Fj et al.Autophagy and disease:always two sides to a problem. J Pathol. 2012 ;226(2) :255-73.)。自噬是胞浆大分子物质和细胞器在双层膜包囊泡中 大量降解的生物学过程。该过程大致能分为4个阶段：1、在饥饿、缺氧、药物干扰等某 些因素的刺激下，自噬泡的双层膜结构开始逐渐形成并包围在被降解物的周围。2、自噬 泡完全成型并将要被降解的物质完全隔离于细胞质。3、自噬体与溶酶体融合形成自噬 溶酶体。4、自噬溶酶体最终被溶酶体中的水解酶溶解，降解产物可以在细胞内再循环利 用(Martlnez-Borra J,Lopez-Larrea C. Autophagy and self-defense. Adv Exp Med Biol. 2012 ;738:169-84.)。自噬能对细胞对外部环境改变及各种刺激产生应激反应。细 胞在生长条件下能发生较低水平的自噬，称基础自噬。然而，一旦受到外界的刺激，如饥 饿、缺氧、高温、高细胞密度或是生长因子剥夺等，细胞自噬的水平将会迅速上调。如在营 养物质缺乏的情况下，细胞自噬能分解体内坏死细胞器产生氨基酸等供细胞合成新的蛋 白质，维持细胞的存活（Piacentini M，D'Eletto M, Falasca L，et al. Transglutaminase 2at the crossroads between cell death and survival. Adv Enzymol Relat Areas Mol Biol. 2011 ；78:197-246. ；Cook KL，Shajahan AN, Clarke R. Autophagy and endocrine resistance in breast cancer. Expert Rev Anticancer Ther.2011 ；11(8):1283-94.； Wirawan E，Vanden Berghe T，Lippens S，et al. Autophagy: for better or for worse. Cell Res. 2012 ;22(1) :43-61.)。
[0006] 自噬能降解折叠错误的蛋白质、损伤的细胞器等，延缓机体衰老的发生。集体衰 老相关疾病一神经退行性疾病可以被归类为蛋白构象错误疾病，一般是由于大量折叠错 误的蛋白质在细胞内堆积从而引发细胞毒性而造成的。研究表明，大量衰老性疾病，如 神经退行性疾病和恶性肿瘤都与细胞自密切相关（Martinez-Borra J，L0pez_Larrea C.Autophagy and self-defense. Adv Exp Med Biol. 201