一种聚己内酯-胶原-丝蛋白纳米三维多孔支架及制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及尿道支架的制备领域，尤其涉及一种聚己内酯-胶原-丝蛋白纳米三维多孔支架及制备方法。
【背景技术】
[0002]二十年来，随着组织工程技术的发展，尿道重建进入了一个崭新的阶段。在经历了最初由单纯生物支架进行替代到以种子细胞与支架复合后进行重建，组织工程技术在尿道重建中的运用日趋成熟。现有技术中采用天然的细胞外基质(extra cellular matrix,ECM)框架，其生物相容性较佳，已应用于各种实验研宄，但其力学性能较差，无法调控，且难以形成产业化广泛应用于临床。
【发明内容】
[0003]本发明提供一种聚己内酯-胶原-丝蛋白纳米三维多孔支架及制备方法，解决现有技术中常规的组织工程支架的力学性能差、无法调控、难以形成产业化的技术问题。
[0004]本发明的目的是通过以下技术方案实现的:
[0005]一种聚己内酯-胶原-丝蛋白纳米三维多孔支架的制备方法，包括:
[0006]桑蚕废丝溶于0.1%的Na2CCVK溶液中，重复煮沸半小时，以提取丝素蛋白；
[0007]将丝素蛋白用三元溶液在高温下溶解，并经透析过滤后置于室温内干燥成再生丝素膜，其中，所述三元溶液为CaCl2、H2O, C2H5OH的混合液；
[0008]将所述再生丝素膜、水溶性胶原蛋白、聚己内酯共同溶于六氟异丙醇中，形成混合溶液；
[0009]将所述混合溶液通过旋转接收装置进行静电纺丝，旋转速度为300-500转/分，转轴直径为2-6毫米，以获得纳米三维多孔支架。
[0010]一种聚己内酯-胶原-丝蛋白纳米三维多孔支架，所述支架为质量比为25-60 %的丝素蛋白、30-55 %的口腔黏膜细胞以及10-30 %的口腔黏膜细胞生长因子经静电纺丝装置收集而成。
[0011]本发明提供一种聚己内酯-胶原-丝蛋白纳米三维多孔支架及制备方法，通过将桑蚕废丝溶于0.1%的Na2CCVK溶液中，重复煮沸半小时，以提取丝素蛋白；将丝素蛋白用三元溶液在高温下溶解，并经透析过滤后置于室温内干燥成再生丝素膜；将所述再生丝素膜、水溶性胶原蛋白、聚己内酯共同溶于六氟异丙醇中，形成混合溶液；将所述混合溶液通过旋转接收装置进行静电纺丝，旋转速度为300-500转/分，转轴直径为2-6毫米，以获得纳米三维多孔支架。本发明提供的支架加工制作方便、高效，便于应用，而且便于调节材料的各种性能，结构稳定，有一定力学强度以支持新生组织的生长。
【附图说明】
[0012]为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可根据这些附图获得其他的附图。
[0013]图1为本发明实施例一种聚己内酯-胶原-丝蛋白纳米三维多孔支架的制备方法的流程图；
[0014]图2为本发明实施例提供的再生丝素膜、水溶性胶原蛋白、聚己内酯的质量比为1:1:4的电纺纤维的示意图；
[0015]图3为本发明实施例提供的再生丝素膜、水溶性胶原蛋白、聚己内酯的质量比为1:1: 10的电纺纤维的示意图；
[0016]图4为本发明实施例提供的再生丝素膜、水溶性胶原蛋白、聚己内酯的质量比为1:1:8的电纺纤维的示意图；
[0017]图5为本发明实施例提供的口腔黏膜细胞在电纺纤维材料表面的示意图。
【具体实施方式】
[0018]为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图和【具体实施方式】对本发明作进一步详细的说明。
[0019]本发明实施例提供了一种聚己内酯-胶原-丝蛋白纳米三维多孔支架的制备方法，如图1所示，包括:
[0020]步骤101、桑蚕废丝溶于0.1%的Na2COyK溶液中，重复煮沸半小时，以提取丝素蛋白；
[0021]步骤102、将丝素蛋白用三元溶液在高温下溶解，并经透析过滤后置于室温内干燥成再生丝素膜；
[0022]其中，所述三元溶液为CaCl2、H2O, C2H5OH的混合液；所述再生丝素膜、水溶性胶原蛋白、聚己内酯的质量比可以为1:1: 4、1:1: 10,1: I: 8，其中，比为1:1: 4的纺丝纤维的如图2所示，比为1:1: 10的纺丝纤维的如图3所示，可见电纺纤维有明显膨大的珠状结构或者粘并现象。比为1:1: 8的纺丝纤维的如图4所示，电纺纤维没有膨大的珠状结构或者粘并现象，但直径不均一。比为1:1: 8的纺丝纤维为最优，电纺纤维表面光滑，直径均一，没有膨大的珠状结构或者粘并现象，纤维呈现相互连通的三维网络状结构。
[0023]步骤103、将所述再生丝素膜、水溶性胶原蛋白、聚己内酯共同溶于六氟异丙醇中，形成混合溶液；
[0024]步骤104、将所述混合溶液通过旋转接收装置进行静电纺丝，旋转速度为300-500转/分，转轴直径为2-6毫米，以获得纳米三维多孔支架。
[0025]其中，静电纺丝的条件为电压12千伏，电场距离为60-200毫米；纺丝速率为3.2
晕升/小时。
[0026]本发明提供一种聚己内酯-胶原-丝蛋白纳米三维多孔支架及制备方法，通过将桑蚕废丝溶于0.1%的Na2CCVK溶液中，重复煮沸半小时，以提取丝素蛋白；将丝素蛋白用三元溶液在高温下溶解，并经透析过滤后置于室温内干燥成再生丝素膜；将所述再生丝素膜、水溶性胶原蛋白、聚己内酯共同溶于六氟异丙醇中，形成混合溶液；将所述混合溶液通过旋转接收装置进行静电纺丝，旋转速度为300-500转/分，转轴直径为2-6毫米，以获得纳米三维多孔支架。本发明提供的支架加工制作方便、高效，便于应用，而且便于调节材料的各种性能，结构稳定，有一定力学强度以支持新生组织的生长。
[0027]本发明实施例中静电纺丝技术所获得的纤维，具有纤维细度小、比表面积高、孔隙率高的特点，能够很好地模拟天然细胞外基质的结构。此外，静电纺丝技术工艺简单，能够通过调节纺丝液的种类及浓度、粘度、电压、距离等纺丝参数来控制纤维产品的各种性能，满足不同研宄类型的需要。
[0028]聚己内酯具有良好的生物降解性、力学性能和生物相容性；胶原是细胞外基质的主要结构成分，拟生性好；丝素蛋白是从蚕丝中提取出的天然高分子蛋白，作为缝合材料已有很长的临床历史，它能够为细胞提供丰富的粘附位点，促进细胞增殖，并可增强纳米纤维的强度和柔性。
[0029]为了证明本发明的优点，将口腔黏膜细胞种植在一种聚己内酯-胶原-丝蛋白纳米三维多孔支架上，如图5为口腔黏膜细胞在电纺纤维材料表面的示意图，可见支架上的口腔黏膜细胞贴附良好，生长旺盛，细胞形态均一，细胞轴突相互连接，并且向孔洞内呈立体三维生长，证实其是口腔黏膜细胞生长增殖的良好载体。
[0030]本发明实施例还提供了一种聚己内酯-胶原-丝蛋白纳米三维多孔支架，所述支架为质量比为25-60 %的丝素蛋白、30-55 %的口腔黏膜细胞以及10-30 %的口腔黏膜细胞生长因子经静电纺丝装置收集而成。
[0031]以上对本发明进行了详细介绍，本文中应用了具体个例对本发明的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想；同时，对于本领域的一般技术人员，依据本发明的思想，在【具体实施方式】及应用范围上均会有改变之处，综上所述，本说明书内容不应理解为对本发明的限制。
【主权项】
1.一种聚己内酯-胶原-丝蛋白纳米三维多孔支架的制备方法，其特征在于，包括: 桑蚕废丝溶于0.1%的Na2CCVK溶液中，重复煮沸半小时，以提取丝素蛋白； 将丝素蛋白用三元溶液在高温下溶解，并经透析过滤后置于室温内干燥成再生丝素膜，其中，所述三元溶液为CaCl2、H2O, C2H5OH的混合液； 将所述再生丝素膜、水溶性胶原蛋白、聚己内酯共同溶于六氟异丙醇中，形成混合溶液； 将所述混合溶液通过旋转接收装置进行静电纺丝，旋转速度为300-500转/分，转轴直径为2-6毫米，以获得纳米三维多孔支架。
2.根据权利要求1所述的聚己内酯-胶原-丝蛋白纳米三维多孔支架的制备方法，其特征在于，所述再生丝素膜、水溶性胶原蛋白、聚己内酯的质量比为1:1: 8。
3.根据权利要求1所述的聚己内酯-胶原-丝蛋白纳米三维多孔支架的制备方法，其特征在于，静电纺丝的条件为电压12千伏，电场距离为60-200毫米；纺丝速率为3.2毫升/小时。
4.一种聚己内酯-胶原-丝蛋白纳米三维多孔支架，其特征在于，所述支架为质量比为25-60 %的丝素蛋白、30-55 %的口腔黏膜细胞以及10-30 %的口腔黏膜细胞生长因子经静电纺丝装置收集而成。
【专利摘要】本发明涉及尿道支架的制备领域，公开了一种聚己内酯-胶原-丝蛋白纳米三维多孔支架及制备方法，通过将桑蚕废丝溶于0.1％的Na2CO3水溶液中，重复煮沸半小时，以提取丝素蛋白；将丝素蛋白用三元溶液在高温下溶解，并经透析过滤后置于室温内干燥成再生丝素膜；将所述再生丝素膜、水溶性胶原蛋白、聚己内酯共同溶于六氟异丙醇中，形成混合溶液；将所述混合溶液通过旋转接收装置进行静电纺丝，旋转速度为300-500转/分，转轴直径为2-6毫米，以获得纳米三维多孔支架。本发明提供的支架加工制作方便、高效，便于应用，而且便于调节材料的各种性能，结构稳定，有一定力学强度以支持新生组织的生长。
【IPC分类】D01F8-02, A61L27-24, A61L27-18, D01F8-14, A61L27-56, A61L27-38, D01D5-00, A61L27-22
【公开号】CN104874018
【申请号】CN201510319606
【发明人】李超, 吴登龙, 徐月敏, 乐威
【申请人】李超
【公开日】2015年9月2日
【申请日】2015年6月12日