玛瑙螺在制备治疗急性肺损伤药物中的用图
【技术领域】
[0001] 本发明公开了玛瑙螺在制备治疗急性肺损伤药物中的用途，本发明还提供了对急 性肺损伤具有保护功能的玛瑙螺水提物冻干粉的制备方法，属于医学制药技术领域。
【背景技术】
[0002] 现如今，随着空气质量的日趋下降和生活环境的复杂多变，肺损伤是临床常见肺 病之一。急性肺损伤是指由心源性以外的各种肺内外致病因素导致的急性、进行性加重的 呼吸困难、难治性低氧血症和肺水肿，严重时称为急性呼吸窘迫综合征。致病因素包括严重 感染败血症、创伤、中毒、大量输血、体外循环和弥漫性血管内凝血等，其中以严重感染最为 常见。重症时可出现神志模糊、烦躁、嗜睡、昏迷等重症时可出现神志模糊、烦躁、嗜睡、昏迷 等重症时可出现神志模糊、烦躁、嗜睡、昏迷等我国近年来临床急性肺损伤的患病率日趋增 加，因此重视肺炎的防治具有重要意义。随着人们生活水平的提高，选择安全而有效的保健 食品正在逐渐走进人们的视野。
[0003] 白玉蜗牛，也称褐云玛瑙螺，玛瑙螺软体动物。褐云玛瑙螺，为我国最大的一种陆 生贝类，壳高130mm，宽54mm。壳质稍厚，有光泽，呈长卵圆形。生活于田野农作物上，森林 树和阴湿的环境中，对光刺激敏感，喜阴湿环境生长，喜钻入疏松土中，多清晨和黄昏时出 来活动，行动缓慢，嗅觉敏锐。白玉蜗牛全身是宝，综合利用价值高，需求量大，深度加工大 有可为。白玉蜗牛全身是宝，综合利用价值高，需求量大，深度加工大有可为。白玉蜗牛肉 质肥嫩、营养丰富，是一种高蛋白（含有20种氨基酸)、低脂肪、胆固醇趋向于零的高级营养 品，而多糖则是玛瑙螺体内重要的活性物质。经常食用可增加营养、增强耐力、提高身体素 质，可使皮肤保持细嫩健美，延缓衰老，益寿延年。经检索未见玛瑙螺在急性肺损伤具有医 疗作用的文献报道。
【发明内容】
[0004] 本发明提供一种玛瑙螺水提物在制备治疗急性肺损伤药物中的用途，用于对急性 肺损伤具有治疗保健功能。
[0005] 本发明所述的对急性肺损伤具有保护功能的玛瑙螺水提物冻干粉，是由如下方法 制备得到的： 将玛瑙螺肉粉碎后加15~30倍的去离子水，在80°C-100°C下提取两次，合并提取液， 减压浓缩至300mL-500mL，按体积比：1:3-1:5加入95%的乙醇，室温放置过夜；3000r/ min-4000r/min离心lOmin，收集沉淀，并以-30~_50°C冻干60~80小时，得到玛瑙螺水 提物冻干粉。
[0006] 经动物实验证明（详见实施例)，本发明玛瑙螺水提物具有保护急性肺损伤的功 能，因而可以在作为保健食品方面得到应用。其主要的功效学作用如下：经用昆明小鼠为研 宄对象，利用J19N2-SIV感染致急性肺损伤模型，服用本发明的玛瑙螺水提物冻干粉处理15 天后，观察肺脏病理特征趋于好转、炎症因子TNF-a、IL-I0、IL-6以及抗炎细胞因子等因 子IL-IO的水平发生显著变化。
[0007] 本发明的积极效果在于：提供利了玛瑙螺新的保健医用用途；制成的玛瑙螺水提 物冻干粉安全、无副作用，具有显著保健功效，可长期服用，具有很好的市场开发前景。
【附图说明】
[0008] 图1为本发明对酒精引起的小鼠肝脏TNF-a蛋白含量的影响； 图2为本发明对酒精引起的小鼠肝脏IL-I0蛋白含量的影响； 图3本发明对酒精引起的小鼠肝脏IL-6蛋白含量的影响； 图4为本发明对酒精引起的小鼠肝脏NF-KB蛋白含量的影响； 图5为本发明对急性肺损伤小鼠肝脏抗炎性因子IL-10表达的影响。
[0009] 具体实施例方式 下面结合实施例对本发明作进一步描述，但本发明不受具体实施例限制。
[0010] 实施例1 将2kg玛瑙螺肉粉碎，用去离子水40kg在80°C提取两次，合并提取液，减压浓缩至 300mL，加入95%的乙醇(体积比：1:5)，室温放置过夜；离心（3000r/min)lOmin，收集沉淀， 并以-50°C冻干72小时，得到玛瑙螺水提物冻干粉。
[0011] 实施例2 将2kg玛瑙螺肉粉碎，用去离子水60kg在KKTC下提取两次，合并提取液，减压浓缩至 500mL，加入95%的乙醇(体积比：1:3)，室温放置过夜；离心（4000r/min)lOmin，收集沉淀， 并以-50°C冻干80小时，得到玛瑙螺水提物冻干粉。
[0012] 实施例3 将2kg玛瑙螺肉粉碎，用去离子水50kg在90°C下提取两次，合并提取液，减压浓缩至 450mL，加入95%的乙醇(体积比：1:4)，室温放置过夜；离心（4000r/min)lOmin，收集沉淀， 并以-50°C冻干80小时，得到玛瑙螺水提物冻干粉。
[0013] 通过以下试验例用于说明本发明的玛瑙螺水提物冻干粉对急性肺损伤的保护作 用的影响： 1动物分组及饲养 120只昆明小鼠（体重18~22g，饲养温度22±2°C，相对湿度40~70%)随机平分为H9N2-SIV感染组(感染组)，H9N2-SIV+实施例1~实施例3制备的玛瑙螺水提物冻干粉(治 疗组）及空白对照组。建模方法为：滴鼻接种用灭菌生理盐水10倍稀释的H9N2-SIV病毒 液（0.ImL/只），灌胃给药，实施例1、实施例2、实施例3水提物冻干粉剂量组分别按200、 600、1200mg/kg生药量灌胃给药，灌胃体积为0. 2mL，空白对照组给予0. 2mL的生理盐水；除 空白对照组，其余组均建模1次，随后剂量组给药一次，之后剂量组再持续给药14日（每日 1次)。
[0014] 2检测结果 2. 1本发明对急性肝损伤小鼠临床表现的影响 空白对照组小鼠精神状态较佳、被毛光泽、活动灵活、呼吸及进食正常，试验期间体重 增长，稳定增长趋势平缓。感染组小鼠精神状态差、背毛粗糙无光泽，行为迟钝、活动和饮食 减少、呼吸急促，小鼠感染病毒后伴随发病和耐过过程，体质量出现先降后升的趋。
[0015] 剂量组小鼠体征表现比感染组减轻，比对照组加重，即介于感染组和对照组之间， 精神状态稍差、活动稍减少、呼吸稍急促，体质量呈先降后升趋势，与感染组相比较，体质量 下降趋势较缓，而上升趋势较快，感染组从第2d末开始出现死亡，而剂量组在第4d才开始 出现死亡，死亡率较感染组明显降低。
[0016] 2. 2本发明对急性肺损伤小鼠肺系数和肺湿质量与肺干质量比值(W/D)变化 表1小鼠肺系数的变化
通过表1可知：与空白组相比，感染组小鼠肺系数明显升高，剂量组小鼠的肺系数变化 较小；并且实施例1~实施例3小鼠的肺系数已接近空白组小鼠。表1结果表明：本发明参 与了H9N2-SIV感染小鼠引起的急性肺损伤，并起到保护作用。
[0017] 2. 3本发明对急性肺损伤小鼠肝脏炎性因子表达的影响 2. 3.1本发明对酒精引起的小鼠肝脏TNF-a蛋白含量的影响 通过图1可以得出，经统计学处理，模型组有显著性差异（#:与空白组相比P〈〇. 05 ;:与空白组相比P〈〇. 01)。各剂量组与模型组相比，经统计学处理，实施例组有显著性差 异:与模型组相比P〈〇.05 :与模型组相比p〈0. 01)。图1结果表明：肿瘤坏死因子-a (TNF-a)作为参与急性肺损伤的重要炎症因子。本发明对H9N2-SIV引起的小鼠肺匀浆中TNF- a蛋白含量增加具有显著的抑制作用，减少损伤作用。
[0018] 2. 3. 2本发明对酒精引起的小鼠肝脏IL-I0蛋白含量的影响 通过图2可以得出，经统计学处理，模型组有显著性差异（#:与空白组相比p〈0. 05 ;:与空白组相比p〈〇. 01)。各剂量组与模型组相比，经统计学处理，实施例组有显著性差 异（**:与模型组相比p〈〇. 01)。图2结果表明：白介素-10 (IL-10)作为参与急性肺损 伤的重要炎症因子。本发明对H9N2-SIV引起的小鼠肺匀浆中IL-I0蛋白含量增加具有显 著的拮抗作用，说明本发明参与肺损伤的修复过程。
[0019] 2. 3. 3本发明对酒精引起的小鼠肝脏IL-6蛋白含量的影响 通过图3可以得出，经统计学处理，模型组有显著性差异（#:与空白组相比p〈0. 05 ;:与空白组相比p〈〇. 01)。各剂量组与模型组相比，经统计学处理，实施例组有显著性差 异:与模型组相比P〈〇. 05 :与模型组相比p〈0. 01)。图3结果表明：白介素-6(IL-6) 是参与急性肺损伤的重要炎症因子。本发明可显著降低J19N2-SIV引起的小鼠肺匀浆中IL-6蛋白含量的增加，抑制炎症的发生。
[0020] 2. 3. 4本发明对酒精引起的小鼠肝脏NF-KB蛋白含量的影响 通过图4可以得出，经统计学处理，模型组有显著性差异:与空白组相比p〈0. 05 ;)。 各剂量组与模型组相比，经统计学处理，实施例组有显著性差异（*:与模型组相比 p〈0. 05)。图4结果表明：核因子-KB(NF-kB)是参与急性肺损伤的重要炎症因子。本发 明可显著降低H9N2-SIV引起的小鼠肺匀浆中NF-kB蛋白含量的增加，抑制细胞凋亡的发 生。
[0021] 2. 4本发明对急性肺损伤小鼠肝脏抗炎性因子IL-10表达的影响 通过图5可以得出，经统计学处理，模型组有显著性差异（#:与空白组相比p〈0. 05 ;与空白组相比P〈〇. 01)。各剂量组与模型组相比，经统计学处理，实施例组有显著性 差异:与模型组相比P〈〇. 05 :与模型组相比p〈0. 01)。图5结果表明：白介素-10 (IL-10)是参与急性肺损伤的重要抗炎症因子，可抑制炎症的发生。本发明可显著增加H9N2-SIV引起的小鼠肺匀浆中IL-10蛋白含量的降低，起到保护肺组织的作用。
[0022] 综合上述，本发明连续建模、灌胃15天后，对H9N2-SIV引起的小鼠的急性肺组织 系数、炎症因子的变化具有明显的保护作用，具有很大的市场潜力。
【主权项】
1. 玛瑙螺在制备治疗急性肺损伤药物中的用途。2. -种对急性肺损伤具有保护功能的玛瑙螺水提物冻干粉，其特征在于：玛瑙螺 肉粉碎后加15~30倍的去离子水，在80°C-100°C下提取两次，合并提取液，减压浓缩至 3001^-5001^，按体积比：1:3-1:5加入95%的乙醇，室温放置过夜 ；（3000~4000)17^11离 心lOmin，收集沉淀，并以-30~-50°C冻干60~80小时，得到玛瑙螺水提物冻干粉。
【专利摘要】本发明公开了玛瑙螺在制备治疗急性肺损伤药物中的用途，本发明还提供了对急性肺损伤具有保护功能的玛瑙螺水提物冻干粉的制备方法，经动物实验证明，本发明玛瑙螺水提物具有保护急性肺损伤的功能，因而可以在作为保健食品方面得到应用。其主要的功效学作用如下：经用昆明小鼠为研究对象，利用H9N2-SIV感染致急性肺损伤模型，服用本发明的玛瑙螺水提物冻干粉处理15天后，观察肺脏病理特征趋于好转、炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6以及抗炎细胞因子等因子IL-10的水平发生显著变化。
【IPC分类】A61P11/00, A61K9/19, A61K35/618
【公开号】CN104887712
【申请号】CN201510306267
【发明人】杨东生, 王立英, 滕利荣, 张瑶, 付晶, 江连海, 刘燕隔
【申请人】吉林大学珠海学院
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年6月8日