和胃粘膜C0X-2阳性细胞表达药效学作用。
[0045] 表1各组大鼠NO含量和胃粘膜C0X-2阳性细胞表达比较（n= 10)
[0046]
[0047] 注：与模型对照组比较，"*"P〈0. 05, "**"P〈0. 01。
[0048] 3. 3、大鼠胃黏膜病理变化
[0049] 3. 3.1肉眼观察：
[0050] 空白对照组大鼠胃黏膜呈粉/淡红色，表面沟回明显、平滑光泽，胃肌层丰厚；模 型对照组大鼠胃黏膜呈暗红或灰白色，胃肌层可见显露的血管，表面沟回变浅、失去光泽， 偶见大鼠胃黏膜溃疡病灶；各治疗组，大鼠胃黏膜表面均较模型组好转。
[0051] 3. 3. 2光镜观察：
[0052] 治疗结束后，各组大鼠胃组织病理学观察结果见图1-6所示：空白对照组，如图1 所示，胃粘膜腺管排列整齐，大小形状一致，呈单柱状，粘膜层内未见炎性细胞浸润，粘膜下 层无水肿。模型对照组，如图2所示，胃腺管紊乱或疏密不均，粘膜层呈充血性水肿，可见上 皮细胞坏死脱落，同时粘膜固有层变薄，粘膜肌层紊乱、下缘缺损且变薄，另外粘膜下层水 月中，炎细胞多见且向粘膜层迀移，胃粘膜层内固有层出现炎细胞浸润，符合慢性浅表性胃炎 的病理表现，说明本实验的造模是成功的，炎症细胞分级与空白组比较具有显著性差异（P < 0. 01)。兰索拉唑对照组，如图3所示胃腺管疏密不均，排列不整齐，可见轻微上皮细胞坏 死脱落，粘膜固有层变薄，下缘缺损且变薄，炎细胞可见。本发明中药组合物高、中、低剂量 组，如图4-6所示，胃固有层炎性细胞数目减少，胃腺排列稍整齐平整，黏液增厚且腺管构 造逐渐规则。与模型对照组比较，受试药物各剂量组胃组织病理学检查明显优于模型对照 组，炎症程度明显减轻，差异具有统计学意义（P< 0. 01)，结果如表2所示，证明本发明的中 药组合物具有改善模型大鼠胃粘膜炎性病变的药效学作用。
[0053] 表2各组大鼠胃粘膜炎症程度比较（n= 10)
[0054]
[0055] 注：与模型组比较"林"P〈0. 01。
[0056] 结论：本发明的中药组合物作用于慢性浅表性胃炎模型大鼠，可明显改善大鼠一 般状况；与模型对照组比较，本发明中药组合物各剂量组NO含量显著降低，COX-2阳性数量 表达明显减少；病理组织学观察可见，本发明中药组合物各剂量组给药30天后，胃固有层 炎性细胞数目减少，胃腺排列稍整齐平整，黏液增厚且腺管构造逐渐规则，与模型对照组相 比，炎症程度明显减轻；以上结果表明，本发明中药组合物具有明确的保护慢性浅表性胃炎 模型大鼠的药效学作用。
[0057] 二、本发明中药组合物在小鼠体内抗幽门螺杆菌（HP)的药效学作用：
[0058] 1、材料
[0059] 1. 1、动物、环境及饲料：
[0060] 动物：KM小鼠，SPF级，雌雄各半，体重18~20g，由济南朋悦实验动物繁育 有限公司提供，合格证号SCXK(鲁）20140007 ;环境：山东省实验动物中心，许可证号： SYXK(鲁）20140010 ;大鼠维持饲料：北京华阜康生物科技股份有限公司提供，生产许可证 号：SCXK(京）20090008。
[0061] 1.2、药物：
[0062] 受试药：本发明实施例1制备的药物组合物，成人一日用量为4g/d，按照人与大鼠 体表面积换算法，计算大鼠一日用药量为4X0. 0026X50g/kg= 0. 52g/kg，给药量三个剂 量组分别按照临床等效量的4、2、1倍，即分别为2. 08g/kg(实验高剂量组）、1. 04g/kg(实 验中剂量组）、〇. 52g/kg(实验低剂量组），给药容积为20ml/kg，临用前分别配制成含生药 量浓度为〇?l〇4g/ml、0. 052g/ml、0. 026g/ml的水煎液备用。
[0063]对照药：阿莫西林（珠海联邦制药股份有限公司，批号：01400208)，阿莫西林对照 组给药0. 4mg/kg(相当于成人等效临床用药量），将片剂研磨成细粉，用蒸馏水溶解为混悬 液，混悬液浓度为〇? 02mg/ml。
[0064] 1.3、试剂：
[0065] 幽门螺旋杆菌试纸，珠海市克迪科技开发有限公司，批号：140801;幽门螺旋杆 菌尿素酶抗体检测试剂盒，北京康美天鸿生物科技有限公司，批号：140652;菌株HP，美国 标准菌种保藏中心（AmericanTypeCultureCollection)，菌株编号为ATCC43504,批号： 3965862。
[0066] I. 4、仪器：
[0067] SW-CJ-2FD双人单面超净工作台，苏州苏洁净化设备公司；DHZ-D冷冻恒温振 荡器，太仓实验设备厂；LeicaTP1020生物组织自动脱水机，EG1140石蜡包埋机，Leica RM2235全自动轮转石蜡切片机，LeicaTP1020型全自动脱水机，LeicaST5010自动染色 机，均为德国莱卡公司产品；雅博200型摊烘烤片机，中国江苏常州市雅博电子设备有限公 司；OlympusBX-51型病理图像采集系统，日本奥林巴斯公司。
[0068] 2、方法：
[0069] 2. 1、分组、模型复制及给药：
[0070] 取KM小鼠，雌雄各半，随机分为6组：空白对照组、模型对照组、阿莫西林组、实验 高剂量组、实验中剂量组和实验低剂量组，每组20只小鼠（空白对照组10只）。
[0071] 从第1天开始，各组小鼠灌胃抗生素混合液0. 5mL/只，连续3d，空白对照组给予 等量生理盐水；从第4天开始，各组小鼠每天禁食不禁水12h后，灌胃给予新鲜HP混悬液 (浓度为108CFU/mL)每天每只0. 5mL，连续7d，空白对照组给予等量生理盐水。
[0072] 第11天开始，各组小鼠开始灌胃给药，空白对照组和模型对照组给予等量生理盐 水，每次0. 3mL，每日1次，连续8周。
[0073] 其中，抗生素混合液包括0.25mL的氨苄青霉素（20mg/mL)、0.15mL的庆大霉素 (4mg/mL)和 0?ImL的阿奇霉素（50mg/mL)。
[0074] 2. 2、检测指标与方法：
[0075] 末次给药后禁食12h，之后，眼眶取血并离心取血清，检测幽门螺旋杆菌尿素酶抗 体（根据试剂盒说明书方法进行）；
[0076] 处死动物，先取胃窦部黏膜组织进行快速尿素酶测定，观察时间为3min，结果判定 标准：组织边缘Imin内由黄色变成红色为强阳性，3min内变成红色为弱阳性，不变色为阴 性；
[0077] 其余胃组织用10%甲醛固定，包埋、切片后采用石碳酸-碱性品红法染色，观察胃 黏膜HP感染、定植情况。
[0078] 3、结果：
[0079] 3. 1快速尿素酶检测结果：
[0080] 与空白对照组比较，模型对照组HP感染的弱阳性率、强阳性率及总阳性率明显上 升，差异有显著性意义（P< 0.05,P<0.01)，提示模型复制成功。与模型对照组比较，本 发明实验低、中、高剂量组，HP感染的强阳性率均明显降低，差异有统计学意义（P< 0.05， P< 0. 01)，实验中剂量组弱阳性率明显降低，具有非常显著性差异（P〈0. 01)。阿莫西林对 照组亦明显降低HP感染率（P〈0. 05,P〈0. 01)，结果如表3所示，证明本发明的中药组合物 具有改善模型小鼠幽门螺旋杆菌感染的药效学作用。
[0081] 表3各组小鼠感染幽门螺旋杆菌后尿素酶比较
[0082]
[0083] 注：与模型对照组比较，"*"P〈0. 05，"**"P〈0. 01。
[0084] 3. 2血清幽门螺旋杆菌尿素酶抗体检测：
[0085] 与空白对照组比较，模型对照组HP感染的阳性率明显增高，差异有显著性意 义（P〈〇. 01)，提示模型复制成功；与模型对照组比较，实验高、中、低剂量组，HP感染阳性 率均明显降低（P〈〇. 01)，阿莫西林对照组亦明显降低HP感染率，具有非常显著性差异 (P〈0. 01)，结果见表4,证明本发明的中药组合物具有降低小鼠HP感染的药效学的作用。
[0086] 表4各组小鼠感染幽门螺旋杆菌后尿素酶抗体比较
[0087]
[0088] 注：与模型组比较，"*"P〈0. 05，"**"P〈0. 01。
[0089] 3. 3胃病理切片检查结果：
[0090] 胃组织经石碳酸-碱性品红法染色后，可见HP呈紫蓝色，形状弯曲或棒杆状，主 要位于胃腺小凹表面和黏液内。空白对照组，胃小凹内未见HP(0/10)，感染率为0 ;模型对 照组，胃小凹黏液内见大量紫蓝色的HP(16/16)，感染率为100% ;阿莫西林对照组，胃小凹 内未见HP(0/18)，感染率为0 ;实验高剂量组，胃小凹内见少量HP粘附（2/18)，感染率为 5. 56%;实验中剂量组，胃小凹内见少量HP粘附（5/17)，感染率为10. 52%;实验低剂量组， 胃小凹内见少量HP粘附（8/17)，感染率为33. 33%。
[0091] 与空白对照组比较，模型对照组HP感染的阳性率明显增高，差异有显著性意义 (P〈〇. 01)，提示模型复制成功；与模型对照组比较，实验低、中、高剂量组HP感染的阳性率 均明显减少（P〈〇. 05,P〈0.01);阿莫西林对照组HP感染率亦明显减少，具有非常显著性差 异（P〈0. 01)，结果如表5所示，证明本发明的中药组合物具有降低小鼠HP感染率的药效学 的作用。