验
[0140] 各剂量组按0. 2ml/10g · BW经口连续给予不同浓度受试样品，阴性对照组给予同 等容量的蒸馏水，每天一次，连续给予30天。于末次灌胃后1小时，将各组小鼠分别放入盛 有5g钠石灰的250ml磨口瓶内（每瓶1只），用瓶塞盖严，凡士林密封瓶口，立即计时，以呼 吸停止为指标，记录小鼠因缺氧而死亡的时间。
[0141] 3. 2亚硝酸钠中毒存活实验
[0142] 各剂量组按0. 2ml/10g · BW经口连续给予不同浓度受试样品，阴性对照组给予 同等容量的蒸馏水，每天一次，连续给予30天。于末次灌胃后1小时，各组小鼠按240mg/ kg · BW剂量腹腔注射亚硝酸钠（注射量为0. lml/lOg · BW)，注射完毕立即计时，记录小鼠 中毒后存活时间。
[0143] 3. 3急性脑缺血性缺氧实验
[0144] 各剂量组按0. 2ml/10g · BW经口连续给予不同浓度受试样品，阴性对照组给予同 等容量的蒸馏水，每天一次，连续给予30天。于末次灌胃后1小时，各组小鼠自颈部逐只快 速断头，立即按秒表记录小鼠断头后至张口喘气停止时间。
[0145] 4结果分析与判定
[0146] 用SPSSdL 0)软件进行数据转化和统计分析。分析时，先对数据进行方差齐性检 验，如方差齐，采用单因素方差分析进行总体比较，发现异常再用Dunnett法进行多剂量组 与一个对照组均数间的两两比较。若方差不齐，则对原始数据进行适当的数量转换，满足方 差齐性检验后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到方差齐的目的，改用秩和 检验进行统计，发现总体比较有差异，则采用不要求方差齐性的Tamhane' s T2检验进行两 两比较。
[0147] 常压耐缺氧实验、存活实验、急性脑缺血性缺氧实验中的任二项试验结果阳性，可 判定该受试药物具有提高缺氧耐受力功能的作用
[0148] 5实验结果
[0149] 5. 1中药组合物对小鼠常压下因缺氧而死亡时间的影响
[0150] 表8各药物对小鼠常压下因缺氧而死亡时间的影响
[0151]
[0152] 注：表中表示与空白组比较具有显著差异（P< 0.05)林"表示与空白组比 较具有显著差异（P< 0.01)。
[0153] 5. 2中药组合物对小鼠在亚硝酸钠中毒后的存活时间的影响
[0154] 表9各药物对小鼠在亚硝酸钠中毒后的存活时间的影响
[0155]
[0156] 注：表中表示与空白组比较具有显著差异（P< 0.05)林"表示与空白组比 较具有显著差异（P< 0.01)。
[0157] 5. 3中药组合物对小鼠急性脑缺血性缺氧存活时间的影响
[0158] 表10各药物对小鼠急性脑缺血性缺氧存活时间的影响
[0159]
[0160]
[0161] 注：表中表示与空白组比较具有显著差异（P< 0.05)林"表示与空白组比 较具有显著差异（P< 0.01)。
[0162] 6实验结论
[0163] 本发明的中药组合物能显著延长小鼠常压下因缺氧而死亡时间、小鼠亚硝酸中毒 后存活时间和小鼠急性脑缺血性缺氧喘气时间，与阴性对照组比较，具有显著差异，由此， 本发明的中药组合物具有显著提高缺氧耐受力的作用。并且，中药组合物提高耐缺氧的功 效优于阿司匹林、复方丹参片、补阳还五汤和其他配比中药组合物组。
[0164] 效果例5 :心肌缺血保护的实验
[0165] 1试验目的：考察中药组合物对心肌缺血的保护作用
[0166] 2实验材料
[0167] 2.1药品与试剂
[0168] 药品：同实施案例1 2. 1
[0169] 盐酸异丙肾上腺素注射液（上海禾丰制药有限公司，国药准字H31021344)
[0170] 2. 2仪器与设备
[0171] 7170型自动生化分析仪（日本日立有限公司）
[0172] 2. 3 动物
[0173] 雄性 SD 大鼠，180_200g
[0174] 3实验方法
[0175] 3· 1动物分组及给药
[0176] 将大鼠随机分为9组：空白对照组、阿司匹林对照组、复方丹参片对照组、补阳还 五汤对照组、中药组合物高中低剂量组和其他配比中药组合物组。灌胃给药，连续14天，模 型组、正常组给予等体积生理盐水。
[0177] 3. 2动物造模
[0178] 从灌胃第12天开始，每天除继续灌服药物外，模型组及给药组大鼠腹腔注射异丙 肾上腺素3mg/kg/d，；连续3d。正常对照组大鼠腹腔注射等体积的生理盐水。
[0179] 3. 3 血清 LDH、CK、AST 活性测定
[0180] 收集血液，分离血清，按试剂盒说明书操作，在日立-7170型全自动生化仪上按速 率法测定LDH、CK和AST活性。
[0181] 4结果分析与判定
[0182] 用SPSSdL 0)软件进行数据转化和统计分析。分析时，先对数据进行方差齐性检 验，如方差齐，采用单因素方差分析进行总体比较，发现异常再用Dunnett法进行多剂量组 与一个对照组均数间的两两比较。若方差不齐，则对原始数据进行适当的数量转换，满足方 差齐性检验后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到方差齐的目的，改用秩和 检验进行统计，发现总体比较有差异，则采用不要求方差齐性的Tamhane' s T2检验进行两 两比较。
[0183] 5实验结果
[0184] 5. 1中药组合物对心肌缺血大鼠血清LDH、CK、AST活性的影响
[0185] 表11各药物对心肌缺血大鼠血清LDH、CK、AST活性的影响
[0186]
[0187] 注：表中表示与模型组比较具有显著差异（P < 0. 05) 表示与模型组比 较具有显著差异（P< 0.01)。
[0188] 6实验结论
[0189] 本发明的中药组合物能显著降低血清中LDH、CK、AST活性，与模型对照组比较，具 有显著差异，由此，本发明的中药组合物具有心肌缺血保护的作用。并且，中药组合物心肌 缺血保护的功效优于阿司匹林、复方丹参片、补阳还五汤和其他配比中药组合物组。
[0190] 效果例6 :脑缺血保护的实验
[0191] 1试验目的：考察中药组合物对脑缺血的保护作用
[0192] 2实验材料
[0193] 2. 1药品与试剂
[0194] 药品：同实施案例1 2. 1
[0195] 多聚赖氨酸、水合氯醛（国药集团，分析纯）
[0196] 2. 2仪器与设备
[0197] 电子天平、GPS型双极电凝器
[0198] 2. 3 动物
[0199] 雄性 SD 大鼠，180_200g
[0200] 3实验方法
[0201] 3. 1动物分组及给药
[0202] 将大鼠随机分为9组：空白对照组、阿司匹林对照组、复方丹参片对照组、补阳还 五汤对照组、中药组合物高中低剂量组和其他配比中药组合物组。灌胃给药，连续14天，模 型组、正常组给予等体积生理盐水。
[0203] 3. 2动物造模
[0204] 术前禁食12h，自由饮水。实验前ip 10%水合氯醛（0. 35g/kg)麻醉，保留自主呼 吸，仰卧位固定，术中体温由肛温计监测，并用白炽灯加热维持肛温在36. 5~37°C，防止低 温对脑缺血的影响。大鼠颈正中切口，分离暴露左侧颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉和翼腭 动脉，分离过程中电凝血管小分支以防出血。结扎翼腭动脉，在距颈总动脉分叉Icm处结扎 颈外动脉，并于结扎处远心端用电凝器灼断以游离颈外动脉。动脉夹夹闭颈总动脉，提起颈 外动脉游离端使其与颈内动脉成一直线，于颈外动脉结扎处近心端约〇. 5cm处剪一切口， 将线栓蘸取肝素后，由切口向颈内动脉插入至有阻力感停止（18. 0±0. 5mm)，固定线栓。尼 龙线插入深度从颈总动脉分叉处计。手术后动物保温（28°C左右）饲养，阻闭6h后处死动 物。假手术组仅结扎颈外动脉、翼腭动脉，不插入线栓。
[0205] 4结果分析与判定
[0206] 用SPSSdL 0)软件进行数据转化和统计分析。分析时，先对数据进行方差齐性检 验，如方差齐，采用单因素方差分析进行总体比较，发现异常再用Dunnett法进行多剂量组 与一个对照组均数间的两两比较。若方差不齐，则对原始数据进行适当的数量转换，满足方 差齐性检验后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到方差齐的目的，改用秩和 检验进行统计，发现总体比较有差异，则采用不要求方差齐性的Tamhane' s T2检验进行两 两比较。
[0207] 5实验结果
[0208] 5. 1各组大鼠脑梗死体积和神经功能行为评分比较
[0209] 表12各组大鼠脑梗死体积和神经功能行为评分比较
[0210]
[0211]
[0212] 注：表中表示与模型组比较具有显著差异（P < 0. 05) 表示与模型组比 较具有显著差异（P< 0.01)。
[0213] 6实验结论
[0214] 本发明中药组合能够显著降低相对脑梗死体积和神经功能行为评分，与模型对照 组相比具有显著差异，由此，本发明的中药组合物具有脑缺血保护的作用。并且，中药组合 物中高剂量组脑缺血保护的功效优于阿司匹林、复方丹参片、补阳还五汤和其他配比中药 组合物组。
[0215] 效果例7 :中药组合物和小剂量阿司匹林所致大鼠胃黏膜损伤的实验研究
[0216] 1试验目的：观察中药组合物和阿司匹林对胃黏膜损伤的实验研究
[0217] 2实验材料
[0218] 2.1药品与试剂
[0219] 甲醛（国药集团，分析纯）
[0220] 2. 2仪器与设备
[0221] 游标卡尺
[0222] 2. 3 动物
[0223] 健康雄性SD大鼠，体重200_250g
[0224] 3实验方法
[0225] 3. 1动物分组及给药
[0226] 清洁级SD大鼠，随机分为对照组、阿司匹林组、中药组合物高、中、低剂量组，每组 60只，空白组给予生理盐水，灌胃给药28天。对照组、中药组合物高、中、低剂量组、阿司匹 林组分别于给药前以及给药后3d、7d、14d、21d、28d(依照灌胃次数依不同时间点分为0、3、 7、14、21、28次）依不同时间点处理大鼠，腹主动脉取血，并取胃进行观察进行有关指标的 观察和测定，各时相点均为10只。
[0227] 3. 2动物造模
[0228] 配置1.0mg/ml的阿司匹林溶液，参照人类长期口服剂量（lOOmg/d)折算长大鼠口 服剂量：l〇.41mg/kg/d灌胃每日一次。
[0229] 3. 3检测指标及方法
[0230] 3. 3. 1胃黏膜大体损伤评分
[0231] 大鼠禁食不禁水24h，麻醉后，分别结扎责门和胃十二指肠交界处后取胃，沿胃大 弯剪开胃壁并使胃腔勃膜外翻，生理盐水漂洗胃薪膜3遍后，以游标卡尺测定溃疡指数，按 Guth等标准详细记分：斑点糜烂记1分；糜烂长度<