gessoftware，Xenogen，Hopkinton，ΜΑ)将组织发出的光子数予以定量，将基因转殖小 鼠发出的光子数予以定量，结果如图4Α所示，其中，讯号强度的计算为组织所测到的总光 子数，讯号强度的结果以每秒光子数（photons/sec)呈现。并且比较分析各该组小鼠的荧 光值，结果如图4B所不。
[0080] 由先前文献中可知，NF-kB/Iuc异型合子基因转殖小鼠经由脂多糖体诱导后 确实能够活化其内细胞核因子κΒ，并且，细胞核因子κΒ转录因子与活化细胞核因子 κB讯号传递路径在调节免疫反应中扮演重要角色，当细胞核因子κB被活化时，会刺 激发炎反应相关因子的基因表现。由图4A及图4B的结果可看出，第一组的平均荧光 值为2. 92X107ph〇t〇ns/sec ;第二组的发光讯号强度较第一组来得强，其平均荧光值为 31.97X107ph〇t〇ns/sec ;而相较于第二组，第三组的发光强度明显降低，其平均荧光值为 19. 82X107photons/sec。因此，由上述活体影响的结果可知，脂多糖体确实能诱导基因转 殖鼠具有发炎反应，使其腹部具有明显的荧光活性，而经过本发明所揭氨基酸序列编码为 SEQIDNo. 1的多胜肽处理后，能使基因转殖鼠腹部的荧光活性下降。脂多糖体可使基因 转殖小鼠的荧光值上升10. 95倍，而本发明所揭的多胜肽可使荧光值达到约38%的抑制比 率。
[0081] 据此，本发明所揭氨基酸序列编码为SEQIDNo. 1的多胜肽能通过降低细胞核因 子κB的活性，而能有效地达到抑制生物体内由外来刺激所引起的急性全身性发炎反应的 功效。
[0082](二）动物活体外的荧光影像测定
[0083] 将实施例三（一）中的各该组小鼠，先以腹腔注射的方式给予每只含有150毫 克/公斤体重的荧光素（luciferin)，5分钟后，将各该组小鼠牺牲，并且快速取出其组织， 包含有脑、心脏、肺脏、肝脏、脾脏、胃、肾、卵巢及肠。活体影像的设定如同实施例三（一） 中所述，将自各该组小鼠取出的器官分别置于IVIS影像系统200系列（IVISImaging System_200Series，Xenogen，Hopkinton，ΜΑ)的照相舱内进行成像，并且利用生活影像软 件（Livinglmagessoftware，Xenogen，Hopkinton，ΜΑ)将组织发出的光子数予以定量，结 果如图5所示，其中，讯号强度的计算为组织所测到的总光子数，讯号强度的结果以每秒光 子数（photons/sec)呈现。根据图5的结果可知，各该组小鼠的各脏器内的荧光强度有不 同呈现，其中，除卵巢外，对照组小鼠在其余各该脏器所测得的荧光强度明显较空白组小鼠 来得增加。而相较于对照组小鼠，实验组小鼠在肺脏、肝脏、肾脏、肠等脏器中所测得知荧光 强度明显下降。
[0084] 为更进一步了解多胜肽降低发炎反应的主要标的器官，将各该组各器官的荧光值 以倍率（Foldchange)呈现，如下表二及表三所示，其中，表二的倍数变化=第二组平均荧 光值+第一组平均荧光值；表三的倍数变化=第三组平均荧光值+第二组平均荧光值。
[0085] 表二：各该组小鼠的脏器光影像倍率的结果
[0086]
[0087] 表三：各该组小鼠的脏器光影像倍率的结果
[0088]
[0089] 由上述结果可知，脂多糖确实能诱导基因转殖鼠内的脏器发生发炎现象，而使其 有明显的荧光活性，但是，通过投予本发明所揭氨基酸序列编码为SEQIDNo. 1的多胜肽能 够使如肺脏、肝脏、肾脏、肠等脏器的荧光活性下降，显示本发明所揭氨基酸序列编码为SEQ IDNo. 1的多胜肽确实能降低由脂多糖所诱导的细胞核因子κΒ的活性，达到抑制脏器发 炎的功效。
[0090] (三）免疫组织染色分析
[0091] 依据本发明所属技术领域且具通常知识者的周知技术，将自各组小鼠所取出的器 官进行石蜡包埋，将石蜡包埋的器官切为5-μπι的切片，以二甲苯脱蜡，再以梯度酒精进 行脱水后，并以3%的过氧化氢溶液作用15分钟，用以消除内源性过氧化物酶的活性，然 后，在室温下以1 %牛血清白蛋白作用1小时，用以阻断非专一性的连结，而后以稀释50 倍的针对p56、TNF-a或IL-Ιβ的小鼠单株抗体在4°C下作用16-18小时，隔天，以已加 上生物素（biotinylated)的二级抗体（ZymedLaboratories，SouthSanFrancisco，CA) 置于室温下作用20分钟。最后，各该切片置于卵白素-生物素复合物（avidin-biotin complex)试剂中，依据操作手册（HistOstainJC.-plusKit,ZymedLaboratories,South SanFrancisco,CA)的步骤以3, 3' -二氨基联苯胺进行染色，结果如图6所示。
[0092] 由图6的结果可知，相较于空白组小鼠的组织切片，经脂多糖体诱导的对照组，其 组织切片内具有许多呈棕色的与TNF-α及IL-Ιβ反应的细胞，并且棕色区域明显增加。然 而在实验组小鼠的组织切片中，与TNF-α及IL-Ιβ反应的棕色区域明显较对照组小鼠的 组织切片少。先前文献中已经揭露TNF-α及IL-Ιβ为急性发炎期及导致发炎反应的促发 炎激素，因此，由上述结果显示本发明所揭氨基酸序列编码为SEQIDNo. 1的多胜肽通过抑 制促发炎细胞激素的产生，达到有效抑制由脂多糖体诱导的发炎现象。
[0093] 实施例四：多胜肽用于抑制肝脏脂肪沉积的病症
[0094] 在本实施例中采用如下材料：
[0095] (A)实验对象：使用FVB品系的小鼠以进行实验，此等小鼠均由国家实验动物中心 (NationalLaboratoryAnimalCenter)所提供。
[0096] (B)多胜肽：使用实施例一中所制得氨基酸序列编码为SEQIDNo. 1的多胜肽。
[0097] 取三十只FVB品系的小鼠，随机均分为三组，其中，第一组为空白组；第二组为对 照组，喂食高脂饲料；第三组为实验组，喂食高脂饲料；并且，每周以腹腔注射的方式投予 各该小鼠含有10毫摩尔/公斤体重（mm〇l/kg)的本发明所揭氨基酸序列编码为SEQID No. 1的多胜肽溶液（100微升）两次，连续四周，而第一组及第二组中的各该小鼠则被给予 100微升的磷酸盐缓冲液。
[0098] 试验结束后，将各该组小鼠的肝脏组织取出后，依据本发明所属技术领域且具通 常知识者的一般知识，将各该组小鼠肝脏组织分别以H&E染色及油红0(oilred0)染色 观察其内脂肪堆积的情形，结果分别如图7A及图7B所示。并且，如上述实施例三中所 述免疫组织染色的流程，分别以4-羟基壬稀酸（4-hydroxynonenal，HNE)抗体及丙二醛 (malonaldehyde，MDA)抗体对各该组小鼠肝脏组织进行免疫组织染色，用以侦测各该组小 鼠肝脏细胞中脂质过氧化产物，结果如图8A及图8B所示。
[0099] 由图7A及图7B的结果可知，相较于第一组的小鼠，第二组的小鼠的肝脏组织中有 明显脂肪空泡产生，并且有大量脂肪堆积。而第三组的小鼠的肝脏组织较第二组的小鼠来 说，具有较少脂肪堆积的情形。
[0100] 由图8A及图8B的结果可知，第二组小鼠的肝脏组织中较第一组小鼠有较多如 4-羟基壬烯酸及丙二醛的脂质过氧化产物，而相较于第二组小鼠，第三组小鼠的肝脏组织 中脂质过氧化产物则明显减少。
[0101] 由先前文献中可知，当细胞内脂肪过氧化产物过多时，会导致细胞病变、纤维化等 细胞损伤的情形产生，而4-羟基壬烯酸及丙二醛皆为脂质过氧化产物，并且为细胞氧化损 伤的检测指标。是以，由上述结果可知通过投予本发明所揭所揭氨基酸序列编码为SEQID No. 1的多胜肽能有效改善肝脏组织内脂肪堆积的情形，并且能够降低肝脏细胞内脂质过氧 化产物的含量，换言之，本发明所揭所揭氨基酸序列编码为SEQIDNo. 1的多胜肽能用以治 疗或改善脂肪肝或肝脏损伤所引起的病症。
[0102] 实施例五：多胜肽用于抑制脂肪堆积的功效
[0103] (A)在本实施例中采用如下材料：实验对象：使用基因缺损而导致腹部脂肪大量 堆积的小鼠以进行实验，此等小鼠均由国家实验动物中心（NationalLaboratoryAnimal Center)所提供。
[0104] (B)多胜肽：使用实施例一中所制得而具表1所示氨基酸序列的多胜肽。
[0105] 将小鼠均分为对照组和实验组两组，每周以腹腔注射的方式，给予实验组的小鼠 每