[0032] "C NMR(125MHz，DMS0-d6)S211.39(s),208.98(s),169.80(s),160.73(s),143.02 (s),131.42(s),127.05(s),85.91(s),82.25(s),66.70(s),65.63(s),58.62(s),56.55 (s),56.61(s),53.30(s),52.45(s),51.52(s),45.29(s),40.06(s),38.52(s),38.17(s), 34.73(s),33.17(s),29.35(s),28.38(s),26.34(s),25.00(s),23.45(s),22.05(s),20.67 (s)，20.07(s)，19.31(s)，18.41(s)，17.73(s)，14.59(s).
[0033] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcd for C42出3N2〇io:765.5265;found:765.5261。
[OO%] Schiglautone A的〇-(二径乙胺基）乙基衍生物
[0036] 实施例5 Schiglautone A的0-(二氯乙胺基）乙基衍生物（IV)的合成
[0037] 将实施例4所获得的Schiglautone A的0-(二径乙胺基）乙基衍生物（382mg， 0.5mmol)溶于8mL氯仿，逐滴加入氯化亚讽(0.238g，2mmol)，反应物加热回流化。将反应物 冷却至室溫，滴加甲醇分解过量的氯化亚讽，减压浓缩除去溶剂。产物经硅胶柱层析纯化 (石油酸/丙酬100:1，v/v)，得到化合物IV的淡黄色胶状固体(0.297g，71 % )。
[003引 Ih 醒R(500MHz，DMS0-d6)Sl3.87(s，lH)，6.01(s，lH)，5.50(d，J = 8.4Hz，2H)， 3.61(s，4H)，3.55(s，4H)，3.45(s，2H)，3.40(s，2H)，2.98(s，lH)，2.73(d J=17.4Hz，4H), 2.67-2.57(m,6H),2.54(s,2H),2.40(s,lH),2.10(s,lH),1.99(s,2H),1.78(s,lH),1.73 (d，J=16.9Hz，4H)，1.58(d，J = 3.0Hz，2H)，1.46(d，J = 3.0Hz，2H)，1.43(s，lH)，1.37(s， lH)，1.22(s，lH)，1.17(dd，J=18.9，ll.lHz，4H)，0.95-0.83(m，10H)，0.80(d J = 20.0Hz, 3H)，0.78(d J = 20.0Hz，3H)，0.73(d J = 20.0Hz，3H).
[0039] "C NMR(125MHz，DMS0-d6)S211.19(s),208.87(s),169.79(s),160.85(s),143.24 (s)，131.74(s)，127.50(s)，85.69(s)，82.13(s)，66.71(s)，65.84(s)，56.87(s)，55.80 (s),53.19(s),52.44(s),51.64(s),45.51(s),40.38(s),39.22(s),38.30(s),38.05(s), 34.77(s),33.28(s),29.56(s),28.72(s),26.45(s),25.21(s),23.79(s),22.05(s),20.77 (s)，20.30(s)，19.76(s)，18.41(s)，17.85(s)，14.81(s).
[0040] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcd for C4抽69Ci4N2〇6:839.3880;found:839.3881。
[0042] 实施例6组合物抗骨质疏松作用的检测
[0043] 1、材料与方法
[0044] 组合物的制备：将研磨之后过200目网的95mg化合物III的粉末和研磨之后过200 目网的5mg化合物IV的粉末装入带盖的小管中并用满轮揽拌仪混合即得到IOOmg组合物，使 用时用水溶解运1 OOmg的组合物即得到组合物的溶液。
[0045] 将十周龄健康SD雌鼠（30只，江苏省动物中屯、）随机分成5组，每组6只：假手术组 (化am)、卵巢切除模型组(OVX)、组合物组、化合物III组和化合物IV组。饲养条件:溫度为 (23±2)°C，光照：黑暗为12:12。让各组大鼠适应环境2周后开始骨质疏松造模手术:各组大 鼠均经腹腔注射20%乌拉坦麻醉(6ml/kg体重），化am组开腹后关腹，其余两组行双侧卵巢 切除术。术后第4周起，Sham组和OVX组每天进食标准饲料和去离子水，组合物组、化合物III 组和化合物IV组每天进食标准饲料和去离子水，同时分别灌胃给与组合物、化合物HI和化 合物IV lOmg/kg，连续3个月，每周称一次体重。实验结束后，用乌拉坦麻醉，摘取眼球采血， 20(K)r/min离屯、，吸取上清（即血清）。摘除大鼠子宫，迅速称重。取出大鼠双侧股骨和双侧腔 骨，剔除软组织。两腔骨经800°C高溫炉（由南京大学化学化工学院提供）中灰化化，冷却后 称灰重。用研鉢娠碎成灰状，取0.1 g骨灰溶于Iml,6mol/l盐酸中，测骨巧和骨憐时取0.2ml 用超纯水稀释至1ml，用全自动生化分析仪检测骨巧和骨憐含量。左股骨用骨密度仪测量骨 密度(BMD)。血清生化指标测定：取血清0.5ml，用全自动生化分析仪检测血清碱性憐酸酶 (ALP)、巧(Ca)和憐(P)。
[0046] 2、结果
[0047] (1)组合物对双侧卵巢切除大鼠血清ALP，血清化和血清P的的影响
[0048] 表1可W看出去卵巢后，模型组大鼠血清碱性憐酸酶活性增加。去卵巢后，体内雌 激素缺乏，导致骨转化率增加，与绝经后妇女的高转化型骨质疏松症一致。给予组合物3个 月后，碱性憐酸酶活性显著下降，可见组合物可W抑制去卵巢引起的骨转化率的增加，减少 骨质的破坏。表中还显示与假手术组相比，模型组大鼠血清巧明显下降，而组合物可显著提 升血清巧浓度。血清巧是骨形成的重要标记物，说明组合物可W有效逆转由于卵巢切除导 致的血清巧的降低，有利于骨的形成。而化合物HI和化合物IV没有组合物的作用。
[0049] 表1组合物对双侧卵巢切除大鼠血清ALP，血清化和血清P的影响
[0051] 冲<0.05vs OVX组
[0052] (2)组合物对双侧卵巢切除大鼠左股骨BMD的的影响
[0053] 表2可W看出去卵巢后模型组大鼠左股骨骨密度较假手术组显著下降，给予组合 物3个月后，骨密度显著增加。而化合物HI和化合物IV没有此作用。
[0054] 表2组合物对双侧卵巢切除大鼠左股骨BMD的的影响
[0056] 冲<0.05vs OVX组
[0057] (3)组合物对双侧卵巢切除大鼠双侧腔骨参数的影响
[005引表3可W看出与假手术组相比，模型组大鼠双腔骨灰重显著降低，而组合物组较模 型组显著升高。组合物也能显著升高骨巧和骨憐含量。而化合物III和化合物IV没有此作 用。
[0059]表3组合物对双侧卵巢切除大鼠双侧腔骨参数的影响
[0061 ]冲<0.05vs OVX组
[0062]结论:组合物能够抑制去卵巢引起的骨转化率增强和骨质破坏，同时可W提高血 巧浓度，有利于骨的沉积。对于由于雌激素缺乏导致的骨质疏松具有防治作用，并且无雌激 素样副作用。组合物可W用于骨质疏松的防治。化合物HI和化合物IV不能够抑制去卵巢引 起的骨转化率增强和骨质破坏，不可W提高血巧浓度，不利于骨的沉积，对于由于雌激素缺 乏导致的骨质疏松不具有防治作用，不可W用于骨质疏松的防治。
[0063] 实施例7本发明所设及组合物片剂的制备
[0064] 取2克组合物，加入制备片剂的常规辅料18克，混匀，常规压片机制成100片。
[0065] 实施例8本发明所设及组合物胶囊的制备
[0066] 取2克组合物，加入制备胶囊剂的常规辅料如淀粉18克，混匀，装胶囊制成100粒。
【主权项】
1. 一种组合物，其特征为该组合物由化合物HI和化合物IV组成，该组合物中化合物 III和化合物IV的质量百分数分别为95%和5%，2. 如权利要求1所述的组合物的制备方法，其特征为:将化合物III的粉末和化合物IV 的粉末按照质量百分数分别为95%和5%充分混合。3. -种如权利要求1所述的组合物在抗骨质疏松药物中的应用。4. 如权利要求3所述的组合物在抗骨质疏松药物中的应用，其特征为:所述骨质疏松为 雌激素缺乏引起的骨质疏松。5. 如权利要求4所述的组合物在抗骨质疏松药物中的应用，其特征为:所述雌激素缺乏 是由卵巢功能缺失引起的。6. 如权利要求5所述的组合物在抗骨质疏松药物中的应用，其特征为:所述组合物抑制 雌激素缺乏引起的骨转化率增强和骨质破坏。7. 如权利要求5所述的组合物在抗骨质疏松药物中的应用，其特征为:所述组合物提高 血清ALP、血清化和血清P的浓度。8. 如权利要求5所述的组合物在抗骨质疏松药物中的应用，其特征为:所述组合物提高 股骨骨密度。9. 如权利要求5所述的组合物在抗骨质疏松药物中的应用，其特征为:所述组合物提高 双腔骨骨巧和双腔骨骨憐。
【专利摘要】一种组合物及其在抗骨质疏松药物中的应用，本发明涉及有机合成和药物化学领域。本发明公开并提供了一种由Schiglautone？A的O-(<b>吗</b>啉基)乙基衍生物和O-(二氯乙胺基)乙基衍生物按照质量比为95：5组成的组合物以及将上述化合物按照95：5的质量比进行混合从而制备本发明组合物的方法。药理学实验表明，本发明提供的这种组合物能够抑制去卵巢引起的骨转化率增强和骨质破坏，同时可以提高血钙浓度，有利于骨的沉积。对于由于雌激素缺乏导致的骨质疏松具有防治作用，并且无雌激素样副作用。因此本发明还提供了Schiglautone？A的O-(<b>吗</b>啉基)乙基衍生物和O-(二氯乙胺基)乙基衍生物按照质量比为95：5组成的组合物在制备抗骨质疏松药物中的用途。
【IPC分类】A61P19/10, A61K31/201, A61K31/5377
【公开号】CN105534967
【申请号】CN201511017894
【发明人】华子春, 吴俊华, 黄蓉, 王慧
【申请人】常州南京大学高新技术研究院
【公开日】2016年5月4日
【申请日】2015年12月29日