桑白皮脂肪油组分在制备急性肺损伤药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及制药领域，具体涉及一种桑白皮脂肪油组分在制备急性肺损伤药物中 的应用。
【背景技术】
[0002] 脂多糖（lipopolysaccharide，LPS)是内毒素的主要成分，内毒素进入机体后通过 诱发过度炎症反应及全身免疫反应，可以引起急性肺损伤。LPS诱导的急性肺损伤 (acutelunginjury，ALI)是严重创伤或是感染后出现最早、发病率最高的并发症之一，目前 全球因肺损伤造成的死亡率还很高，但是仍然没有一个可行、有效的治疗方法使其降低其 死亡率，为了寻求更好的治疗方法，已经有很多的学者从传统中药抗炎作用的角度出发，研 究中药单体对内毒素引起的急性肺损伤的保护作用及机制，目前，中药的抗炎作用已在临 床中得以证明，中药的抗炎作用机制研究也取得了一定的进展，但仍处于起步阶段，有巨大 的发展前景。
[0003] 桑白皮是我国的传统中药，中国古代第一部医学典籍《神农本草经》，就将桑白皮 列为药中上品，具有极高的药用价值。已广泛应用于中医临床各种方剂之中，并取得了良好 的临床效果。桑白皮含有多种化学成分，具有较广泛的药理活性，包括消炎、利尿、解热、镇 咳、祛痰等作用。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是提供一种桑白皮脂肪油组分在制备急性肺损伤药物中的应用。
[0005] 本发明的技术方案是:桑白皮脂肪油组分在制备急性肺损伤药物中的应用。
[0006] 所述桑白皮脂肪油是将精密称取的干燥至恒重的桑白皮粉末过60-80目筛并置于 滤纸筒内，将滤纸筒置于索氏提取器中，然后加入桑白皮粉末重量8-12倍量的石油醚，在温 度为60~90°C时回流提取5_7h;将提取液放冷至室温，过滤并收集滤液，将收集到的滤液置 于已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴挥去溶剂，在温度为l〇〇°C时干燥lh，移置于干燥器中，冷 却30-40min，即得桑白皮脂肪油。
[0007] 所述滤纸为脱脂滤纸。
[0008] 本发明的有益效果是:本发明通过桑白皮脂肪油组分对脂多糖诱导的小鼠急性肺 损伤的作用研究发现，桑白皮脂肪油组分可降低肺湿重/干重比值，具有减轻肺水肿作用， 脂肪油组分可显著降低TNF-a、IL-li3、IL_6等促炎因子含量，光镜下显示桑白皮脂肪油组分 对肺组织病理学变化都有所缓解，肺组织结构趋于正常。提示桑白皮脂肪油组分可以通过 减轻LPS致ALI的水肿程度，减轻病理损伤，降低TNF-a、IL-10、IL-6等促炎因子含量发挥对 LPS致ALI的保护效应，其机制值得进一步研究。
[0009] 桑白皮产于全国各地，资源非常丰富，主产于河南、安徽、四川、湖南等地，在我国 一直被用作为传统中药，临床上用于治疗多种疾病，其治病的物质基础是由独特活性成分 决定的。桑白皮富含多种化学成分，其中黄酮类化合物是主要活性成分，常用于镇咳、消炎、 利尿、祛痰等。现代药理研究表明桑白皮具有抗炎、利尿、降压、镇静、镇痛、抗肿瘤等作用。 但其药理学作用机制尚不清楚。
[0010]急性肺损伤(Acutelungin jury，ALI)是一种急性的、持续性的肺部炎症反应综合 征，这种炎症反应引起肺泡毛细血管内膜损伤和毛细血管渗透性增加。其临床表现为肺水 月中、肺炎、肺顺应性减低和低氧血症。引起急性肺损伤的原因多种多样，但其病理生理学过 程都很相似，本质都是炎症反应的失控。急性肺损伤的最严重的情况为急性呼吸窘迫综合 征(SRDS)。小鼠吸入脂多糖所致实验性肺炎模型较为理想地模拟人的急性重症肺炎。
[0011]脂多糖(LPS)为革兰氏阴性杆菌外膜的重要成分，一种具有高度生物活性的大分 子物质，当其进入肺组织后，造成肺泡毛细血管膜的破坏。LPS能促进促炎性介质的释放，并 抑制抗炎性介质的分泌与释放，造成平衡失调，炎症反应失控，最终导致ALI/SRDS，甚至造 成机体的休克或者死亡。
[0012] ALI的实质是炎症反应的失控，因此在ALI中有很多炎症介质参与其中。TNF-a、IL-11IL-6被认为是先天性免疫应答中最重要的炎性介质，它们在ALI中也具有十分重要的作 用。从我们的数据可以看出，LPS诱导急性肺损伤后，肺泡灌洗液中的TNF-α、IL-Ιβ、IL-6的 水平显著提升。这些炎性介质的增多导致血管内皮细胞的损伤，肺毛细血管通透性增加，炎 性细胞浸润，造成肺组织结构的严重损伤。
[0013] 图1为桑白皮脂肪油组分对肺湿重/干重的影响； 图2为桑白皮脂肪油组分对肺泡灌洗液中炎症因子TNF-a表达的影响； 图3为桑白皮脂肪油组分对肺泡灌洗液中炎症因子IL-Ιβ表达的影响； 图4为桑白皮脂肪油组分对肺泡灌洗液中炎症因子IL-6表达的影响； 图5为小鼠肺组织HE染色图片（X 400)。
【具体实施方式】
[0014] 桑白皮脂肪油组分在制备急性肺损伤药物中的应用。所述桑白皮脂肪油是将精密 称取的干燥至恒重的桑白皮粉末过60-80目筛并置于滤纸筒内，将滤纸筒置于索氏提取器 中，然后加入桑白皮粉末重量8-12倍量的石油醚，在温度为60~90°C时回流提取5-7h;将提 取液放冷至室温，过滤并收集滤液，将收集到的滤液置于已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴挥 去溶剂，在温度为l〇〇°C时干燥lh，移置于干燥器中，冷却30-40min，即得桑白皮脂肪油。
[0015] 本发明具体步骤如下： 材料与方法 1实验材料 1.1动物 雄性健康BABL/c小鼠，体重18-22g，许可证号：SCXK(京)2012-0001 (由北京维通利华实 验动物技术有限公司提供）。饲养于18_22°C清洁级动物实验室内，自由饮食、饮水。
[0016] 1.2 药物 桑白皮购于郑州市中药材市场，经河南中医学院陈随清教授、董诚明教授鉴定为桑科 植物桑MorusalbaL.的干燥根皮。
[0017] 桑白皮脂肪油提取方法:精密称取IOg干燥至恒重的桑白皮药材粉末(过60目筛） 于滤纸筒内，置索氏提取器中，加入IOOmL石油醚(60~90°C)回流提取6h，提取液放冷至室 温，过滤，回收滤液，低温挥去溶剂，100°c干燥Ih后，冷却，精密称定，经计算桑白皮的得油 率为3.10%。
[0018] 1.3 试剂 脂多糖(sigma);醋酸地塞米松片，国药准字H12020686,生产批号13050102,（天津天药 药业股份有限公司）；生理盐水，国药准字H20003438，（河南科伦药业有限公司）；小鼠 TNF-cuIL-Ιβ和IL-6ELISA试剂盒(武汉基因美生物科技有限公司）； 主要溶液配制（I)LPS溶液:用生理盐水配成2mg/ml的溶液并于4°C保存备用。混匀后分 装，置于-20° C避光保存。（2)肺泡灌洗液的配置：（氯化钠8g、氯化钾0.2g、磷酸二氢钾 0.24g、磷酸氢二钠1.44g)将以上溶质在800ml双蒸水中溶解，调节pH至7.2-7.4,然后用双 馏水定容至于IL，高压灭菌，置于4° C保存。
[0019]