各组小鼠每日均饲以普通饲 料，自由进食、饮水。于末次给药前小鼠禁食不禁水12小时，给药后继续禁食不禁水2小时 后，眼眶后静脉丛采血0.2mL，待血液凝固析出血清后，4000r/min离心15min，取血清1 OyL， 按葡萄糖氧化酶法检测血糖。
[0116] 实验结果
[0117] 结果见表6。
[0118] 表6:刺五加叶玉竹叶提取物对正常小鼠血糖的影响(平均值土 SD，单位:mmol/L)
[0120] 表示与空白组比较:**p<0.01。
[0121] 结论:刺五加叶玉竹叶提取物在75-300mg/kg给药量时对正常小鼠的血糖值无明 显影响。
[0122] 效果例3:刺五加叶玉竹叶提取物改善睡眠作用的量效关系研究
[0123] 实验药物
[0124] 自制刺五加叶玉竹叶提取物（刺五加叶：玉竹叶= 3:1);戊巴比妥钠：（生产厂家 Merek公司，临用时以蒸馏水配制成0.5%溶液）
[0125] 实验动物
[0126] 昆明种小白鼠，雄性，体重18_22g，实验前放置于实验室1周，使之适应环境。
[0127] 实验方法
[0128] 增强阈下剂量戊巴比妥钠作用实验：
[0129] 末次给药30min后，各组均腹腔注射阈下剂量戊巴比妥钠(45mg/kg)，提起小鼠尾 巴，将小鼠腹部朝上放在温暖(37°C)的垫块上"以翻正反射消失时间记为睡眠潜伏时间，以 翻正反射消失的持续时间记为睡眠时间"（即翻正反射消失时间至翻正反射重复出现时间， 如果怀疑翻正反射是否真正恢复，于第一次翻正后立即重新背位放置，如在1分钟如之内又 自动翻过来则前一次的时间即为恢复时间，否则以第二次翻过来的时间为准。
[0130] 将60只昆明种小鼠随机分为4组，对照组和刺五加叶玉竹叶提取物（刺五加叶：玉 竹叶= 3:1)高剂量组(CYH3:l):300mg/kg · d;中剂量组(CYM3:l):150mg/kg · d;低剂量组 (CYL3:1): 75mg/kg · d; 3个不同剂量，经灌胃途径给药，给药组分别给予相应剂量刺五加叶 玉竹叶提取物，对照组给予同体积的蒸馏水，连续7天，分别记录各组入睡的潜伏期及持续 时间"
[0131] 实验结果
[0132] 结果如下，见表7。
[0133] 表7不同浓度的刺五加叶玉竹叶提取物对戊巴比妥钠引起的小鼠催眠反应的影 响
[0134]
[0135] 表示与对照组比较:**ρ<0·01，*ρ<0·05
[0136] 结论
[0137] 刺五加叶玉竹叶提取物起效剂量为75mg/kg · d，在剂量范围内，随剂量增大，睡眠 时间延长，存在一定剂量依赖关系。与对照组比较，刺五加叶玉竹叶提取物能明显增加试验 动物的睡眠时间，缩短戊巴比妥钠所致小鼠的睡眠潜伏期。
[0138] 效果例4:刺五加叶玉竹叶提取物改善睡眠作用的时效关系研究
[0139] 实验药物
[0140] 自制刺五加叶玉竹叶提取物（刺五加叶：玉竹叶= 3:1);戊巴比妥钠：（生产厂家 Merek公司，临用时以蒸馏水配制成0.5%溶液）
[0141] 实验动物
[0142] 昆明种小白鼠，雄性，体重18_22g，实验前放置于实验室1周，使之适应环境。
[0143] 实验方法
[0144] 在刺五加叶玉竹叶提取物改善睡眠作用的量效关系研究的基础上，将60只昆明种 小鼠随机分为6组，对照组和5个不同给药时间组(3天、5天、7天、9天、11天），经灌胃途径给 药，给药组，给予刺五加叶玉竹叶提取物中剂量组(CYM3:1): 150mg/kg · d，对照组给予同体 积蒸馏水，按上述实验方法，分别记录各组入睡的潜伏期及持续时间。
[0145] 实验结果：
[0146] 结果见表9。
[0147] 表9在不同给药时间的情况下对用戊巴比妥钠治疗的老鼠的潜伏睡眠和持续睡眠 的影响
[0148]
[0149] 表示与对照组比较:#p < 0 · 01，*p < 0 · 05 [0150] 结论
[0151] 刺五加叶玉竹叶提取物表现出一定的催眠作用，起效天数为连续灌胃5天，主要表 现为延长戊巴比妥钠所致小鼠睡眠持续时间。其中，连续灌胃刺五加叶玉竹叶提取物7天可 显著延长戊巴比妥所致小鼠睡眠时间，缩短睡眠潜伏期。
[0152] 本
【发明内容】
仅仅举例说明了要求保护的一些具体实施方案，其中一个或更多个技 术方案中所记载的技术特征可以与任意的一个或多个技术方案相组合，这些经组合而得到 的技术方案也在本申请保护范围内，就像这些经组合而得到的技术方案已经在本发明公开 内容中具体记载一样。
【主权项】
1. 一种改善睡眠、降血糖的刺五加叶玉竹叶提取物，其特征在于该提取物由刺五加叶 和玉竹叶经混合提取后制得。2. 根据权利要求1所述的刺五加叶玉竹叶提取物，其特征在于刺五加叶和玉竹叶药材 的重量配比为3:1。3. 根据权利要求1或2所述的刺五加叶玉竹叶提取物，其特征在于刺五加叶玉竹叶提取 物中皂苷类成分占25%，黄酮类成分占15%以上。4. 根据权利要求1或2所述的一种改善睡眠、降血糖刺五加叶玉竹叶提取物的制备方 法，其特征在于包括如下步骤： 将刺五加叶和玉竹叶，用6~8倍量50~70%乙醇加热回流，提取2~3次，每次1~3小 时，合并滤液，回收乙醇得到乙醇提取物，乙醇提取物用水溶解后，用2~4倍量石油醚萃取1 ~3次，水层萃取液，经AB-8大孔树脂吸附，分别用10%乙醇、50%乙醇、90%乙醇洗脱，收集 50%乙醇洗脱液，浓缩、干燥，得提取物A，收集90%乙醇洗脱液，浓缩至无乙醇，经D941大孔 树脂吸附，用50 %乙醇洗脱，收集50 %乙醇洗脱液，浓缩、干燥，得提取物B，混合提取物A和 提取物B即得刺五加叶玉竹叶提取物。5. 根据权利要求4所述的刺五加叶玉竹叶提取物的制备方法，刺五加叶玉竹叶提取物 中皂苷类成分占25%，黄酮类成分占15%以上。6. 根据权利要求4所述的刺五加叶玉竹叶提取物的制备方法，其特征在于提取物中包 含30-降齐墩果酸-3-0-?Η)_吡喃葡萄糖醛酸苷。7. 权利要求1或2所述的刺五加叶玉竹叶提取物在制备改善睡眠、降血糖的药物中的应 用。8. -种药物组合物，其包含权利要求1或2所述的刺五加叶玉竹叶提取物及药学上可接 受的辅料。9. 根据权利要求8所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物为口服制剂。10. 根据权利要求9所述的药物组合物，其特征在于所述口服制剂为胶囊剂、片剂或颗 粒剂。
【专利摘要】本发明涉及一种改善睡眠、降低血糖的刺五加叶玉竹叶提取物及其制备方法和用途，所述刺五加叶玉竹叶提取物中主要含有黄酮和皂苷类成分，并且刺五加玉竹叶提取物中皂苷类成分占25％以上，黄酮类成分占15％以上，经药理学实验证明刺五加叶玉竹叶提取物具有改善睡眠、降低血糖和控制血糖的作用，该提取物可单独作为原料药或配伍组合制成各种剂型的药物应用，所述的刺五加叶玉竹叶提取物添加药学上可接受的辅料后可制备成片剂、颗粒剂、胶囊剂等口服剂型，且本发明还发现了刺五加叶玉竹叶提取物中的新化合物30?降齐墩果酸?3?O?β?D?吡喃葡萄糖醛酸苷，并进行了结构鉴定。
【IPC分类】A61K36/8969, C07J63/00, A61P25/20, A61K127/00, A61P3/10, A61K31/704
【公开号】CN105726947
【申请号】CN201610072562
【发明人】王知斌, 姜海, 杨春娟, 翟春梅, 刘华, 薛娟
【申请人】王知斌
【公开日】2016年7月6日
【申请日】2016年2月2日