山苍子花和梗中生物碱的提取纯化方法
【专利摘要】本发明提供山苍子花和梗中生物碱的提取纯化方法，提取方法为：将干燥后的山苍子花或梗磨碎，用乙醇回流提取总生物碱，回流提取2?4次，每次加入料液比为1:4?6g/ml的乙醇，提取1?3h,合并滤液，浓缩蒸干溶剂，得到浸膏；将所述浸膏依次用HCI及浓氨水分别调制酸性和中性，并进行静置过滤，最后用浓氨水将溶液调制碱性，得到上样液；对AB?8或ADS?17规格的大孔吸附树脂进行预处理后，对上样液进行纯化，采用乙醇作为洗脱剂，得到山苍子花和梗中生物碱的提取物。本发明提供山苍子花和梗中生物碱的提取纯化方法，所述提取方法操作简单，山苍子花和梗中生物碱的提取量高并且纯度高，提取周期短，不需要复杂的实验仪器，成本低廉，提高了山苍子花的经济价值，拓宽了其应用领域。
【专利说明】
山苍子花和梗中生物碱的提取纯化方法
技术领域
[0001]本发明涉及提取工艺技术领域，尤其涉及山苍子花和梗中生物碱的提取纯化方法。
【背景技术】
[0002]山苍子(Litseacubeba(Lour.)Pers.)又名山鸡椒，是棒科(Lauraceae)木姜子属植物。山苍子各器官均可入药，是一味传统的中药材。山苍子的根、叶、花及果皮均含有芳香油，是我国重要的芳香植物。从果实中提炼的芳香油，可广泛用于食品、医药、农药、化妆品以及其他日用品。提炼芳香油后的果实再经压榨可获得核子油，是我国化工、轻工和环保等行业生产的重要原料。
[0003]生物碱是自然界中一类广泛存在的具有碱性的含氮化合物，大多都具有生理活性，中草药含有很多种生物碱，其疗效大多是由所含的生物碱而来。到目前为止，运用于临床的生物碱药品已达到八十多种，多具有镇痛、抗癌的作用，多用于治疗心脑血管疾病，相当多的生物碱具有抗肿瘤活性、低毒性和成本低的特征。
[0004]目前，山苍子主要用于山苍子油提取、开发利用，或者以山苍子油有原料制取柠檬醛等方面。我国对山苍子花和梗中生物碱的研究开发尚未见报道，目前常用的提纯工艺无法从山苍子花中有效提取生物碱。
[0005]因此，现有技术还有待于进一步改进。
【发明内容】
[0006]鉴于现有技术的不足，本发明在于提供山苍子花和梗中生物碱的提取纯化方法，旨在解决目前无相应技术能从山苍子花中有效提取生物碱的问题。
[0007]山苍子花和梗中生物碱的提取纯化方法，其中，所述方法为:
提取过程:将干燥后的山苍子花或梗磨碎，用乙醇回流提取总生物碱，回流提取2-4次，每次加入料液比为1:4-6g/ml的乙醇，提取l-3h，合并滤液，浓缩蒸干溶剂，得到浸膏。
[0008]上样液制备:将所述浸膏依次用HCI及浓氨水分别调制酸性和中性，并进行静置过滤，最后用浓氨水将溶液调制碱性，得到上样液。
[0009]纯化过程:对AB-8或ADS-17规格的大孔吸附树脂进行预处理后，对上样液进行纯化，采用乙醇作为洗脱剂，得到山苍子花和梗中生物碱的提取物。
[0010]所述的山苍子花和梗中生物碱的提取方法，其中，提取过程中加入料液比为1:6g/ml的乙醇。
[0011]所述的山苍子花和梗中生物碱的提取方法，其中，其特征在于，所用乙醇的浓度为80%。
[0012]所述的山苍子花和梗中生物碱的提取方法，其中，提取过程中回流提取次数为3次，每次2h。
[0013]所述的山苍子花和梗中生物碱的提取方法，其中，上样液制备具体为:将所述浸膏用0.1%-1%的HCI使pH为2-3，过滤后，向滤液中加入浓氨水，调节pH为5_7，静置过滤，除去脂溶性物质及中性杂质，再用浓氨水调节PH为9-11，得到上样液。
[0014]所述的山苍子花和梗中生物碱的提取方法，其中，采用为AB-8规格的大孔吸附树脂。
[0015]所述的山苍子花和梗中生物碱的提取方法，其中，纯化过程中，上样液浓度为2.0mg/mL，吸附流速 3BV/h。
[0016]所述的山苍子花和梗中生物碱的提取方法，其中，纯化过程中，乙醇的体积浓度为90%，解析流速为1.5BV/h，洗脱剂的用量为3BV。
[0017]有益效果:本发明提供山苍子花和梗中生物碱的提取纯化方法，所述提取方法操作简单，山苍子花和梗中生物碱的提取量高并且纯度高，提取周期短，不需要复杂的实验仪器，成本低廉，提高了山苍子花的经济价值，拓宽了其应用领域。
【具体实施方式】
[0018]本发明提供山苍子花和梗中生物碱的提取纯化方法，为使本发明的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下对本发明进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
[0019]本发明提供山苍子花和梗中生物碱的提取纯化方法，所述提取方法为:
提取过程:将干燥后的山苍子花或梗磨碎，用乙醇回流提取总生物碱，回流提取2-4次，每次加入料液比为1:4-6g/ml的乙醇，提取l-3h，合并滤液，浓缩蒸干溶剂，得到浸膏。
[0020]采用乙醇回流法提取总生物碱，操作简便，但是不能一次完全提取生物碱，因此需要反复回流提取。提取3次时，山苍子花或梗中的总生物碱的提取量率最高。次数过多，会降低提取效率，并且引入过多杂质，加大纯化的难度。
[0021]由于生物碱易溶于乙醇溶液，因此采用乙醇溶液进行生物碱的热回流提取。优选地，所用乙醇的浓度为80%时，总生物碱的提取效率最高。
[0022]在一定范围内，生物碱的提取量随乙醇溶液的量增加而提高，但是当乙醇溶液的量过多时，生物碱的提取量基本不再改变，此时过多的乙醇溶液会提高提取的成本，造成浪费，并且加大纯化的难度。当加入料液比为I:4-6g/ml的乙醇，生物碱的提取效率高，成本较低。优选地，当加入料液比为I: 6g/ml的乙醇时，生物碱的提取效率最高。
[0023]上样液制备:将所述浸膏依次用HCI及浓氨水分别调制酸性和中性，并进行静置过滤，最后用浓氨水将溶液调制碱性，得到上样液。
[0024]优选地，上样液制备具体为:将所述浸膏用0.1%-1%的HCI使pH为2-3，过滤后，向滤液中加入浓氨水，调节PH为5-7，静置过滤，除去脂溶性物质及中性杂质，再用浓氨水调节pH为9-11，得到上样液。上述操作可有效去除浸膏中的脂溶性和中性杂质，还有酸性条件下析出的杂质。
[0025]纯化过程:对AB-8或ADS-17规格的大孔吸附树脂进行预处理后，对上样液进行纯化，采用乙醇作为洗脱剂，得到山苍子花和梗中生物碱的提取物。
[0026]优选地，采用为AB-8规格的大孔吸附树脂。由于AB-8大孔树脂属于快速吸附树脂，可以节省时间，缩短生产周期。
[0027]优选地，纯化过程中，当上样液浓度为2.0mg/mL，吸附流速3BV/h时，打孔吸附树脂吸附生物碱的效率最高，最大程度的吸附上样液中的生物碱。
[0028]优选地，纯化过程中，乙醇的体积浓度为90%，解析流速为1.5BV/h，洗脱剂的用量为3BV，此时，生物碱的洗脱效果最好，最终得到的生物碱提取量最高。
[0029]为了更详尽的描述本发明的制备方法，以下列举几个实施例更进一步的说明。
[0030]实施例1
本发明提供的山苍子花和梗中生物碱的提取方法如下:
提取过程:将干燥后的山苍子花、梗磨碎，称重，用乙醇回流提取总生物碱，80%乙醇回流提取3次，每次加6倍量80%乙醇，提取2h，合并滤液，浓缩蒸干溶剂，得到浸膏。
[0031]树脂的预处理:将树脂(ADS-17、AB-8)先用2倍左右体积的乙醇浸泡充分溶胀，然后装柱，以3-4BV/h的流速将5-8倍的乙醇通过树脂层，洗至洗出液加适量的水无白色浑浊现象，再以6-8BV/h的流速将蒸馏水通过树脂层，洗尽醇，最后转入酸碱处理。即用4BV的5%HCl溶液，以5BV/h的流速通过树脂层，并浸泡3h，而后用蒸馏水以同样流速洗至出水pH值为中性；用4BV的5%NaOH溶液，以5BV/h的流速通过树脂层，并浸泡3h，而后用蒸馏水以同样流速洗至出水pH值中性。
[0032]上样液制备:称取山苍子花、梗，将所述浸膏用0.5%HCI使pH为2。酸水液过滤，滤液用浓氨水调节PH为6，静置，过滤，除去脂溶性物质及中性杂质，用浓氨水调节pH为10，定容至100mU即得到两种样品的总碱液，作为上样液。备用。
[0033]纯化过程:吸附流速3BV/h;上样液pH值1.0;上样液浓度在2.0mg/mL;使用3倍体积的90%的乙醇作为洗脱剂;解析流速为1.5BV/h0
[0034]实验结果:山苍子花和梗的生物碱提取率分别为0.71%、0.86%，山苍子花的总碱纯度为45.37%，山苍子梗的纯度为50.22%。
[0035]实施例2
发明提供的山苍子花和梗中生物碱的提取方法如下:
提取过程:将干燥后的山苍子花、梗磨碎，称重，用乙醇回流提取总生物碱，80%乙醇回流提取4次，每次加4倍量80%乙醇，提取1.5h，合并滤液，浓缩蒸干溶剂，得到浸膏。
[0036]树脂的预处理:方法与实施例1相同
上样液制备:称取山苍子花、梗，将浸膏用0.5%HCI使pH为3。酸水液过滤，滤液用浓氨水调节PH为5，静置，过滤，除去脂溶性物质及中性杂质，用浓氨水调节pH为9，定容至lOOOmL，即得到两种样品的总碱液，作为上样液。备用。
[0037]纯化过程:吸附流速2BV/h;上样液pH值10.0;上样液浓度在2.5mg/mL;使用2倍体积的90%的乙醇作为洗脱剂;解析流速为lBV/h。
[0038]实验结果:山苍子花和梗的生物碱提取率分别为0.69%、0.82%，山苍子花的总碱纯度为43.25%，山苍子梗的纯度为48.65%。
[0039]实施例3
发明提供的山苍子花和梗中生物碱的提取方法如下:
提取过程:将干燥后的山苍子花、梗磨碎，称重，用乙醇回流提取总生物碱，80%乙醇回流提取2次，每次加5倍量80%乙醇，提取2.5h，合并滤液，浓缩蒸干溶剂，得到浸膏。
[0040]树脂的预处理:方法与实施例1相同
上样液制备:称取山苍子花、梗，将浸膏用0.5%HCI使pH为2。酸水液过滤，滤液用浓氨水调节pH为7，静置，过滤，除去脂溶性物质及中性杂质，用浓氨水调节pH为11，定容至lOOOmL，即得到两种样品的总碱液，作为上样液。备用。
[0041 ]纯化过程:吸附流速4BV/h;上样液pH值1.0;上样液浓度在1.5mg/mL;使用4倍体积的90%的乙醇作为洗脱剂;解析流速为2BV/h。
[0042]实验结果:山苍子花和梗的生物碱提取率分别为0.68%、0.83%，山苍子花的总碱纯度为44.78%，山苍子梗的纯度为49.85%。
[0043]本发明提供山苍子花和梗中生物碱的提取纯化方法，所述提取方法操作简单，山苍子花和梗中生物碱的提取量高并且纯度高，提取周期短，不需要复杂的实验仪器，成本低廉，提高了山苍子花的经济价值，拓宽了其应用领域。
[0044]应当理解的是，本发明的应用不限于上述的举例，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。
【主权项】
1.山苍子花和梗中生物碱的提取纯化方法，其特征在于，所述方法为: 提取过程:将干燥后的山苍子花或梗磨碎，用乙醇回流提取总生物碱，回流提取2-4次，每次加入料液比为1:4-6g/ml的乙醇，提取l-3h，合并滤液，浓缩蒸干溶剂，得到浸膏； 上样液制备:将所述浸膏依次用HCI及浓氨水分别调制酸性和中性，并进行静置过滤，最后用浓氨水将溶液调制碱性，得到上样液； 纯化过程:对AB-8或ADS-17规格的大孔吸附树脂进行预处理后，对上样液进行纯化，采用乙醇作为洗脱剂，得到山苍子花和梗中生物碱的提取物。2.根据权利要求1所述的山苍子花和梗中生物碱的提取方法，其特征在于，提取过程中加入料液比为1: 6g/ml的乙醇。3.根据权利要求1所述的山苍子花和梗中生物碱的提取方法，其特征在于，所用乙醇的浓度为80%。4.根据权利要求1所述的山苍子花和梗中生物碱的提取方法，其特征在于，提取过程中回流提取次数为3次，每次2h。5.根据权利要求1所述的山苍子花和梗中生物碱的提取方法，其特征在于，上样液制备具体为:将所述浸膏用0.1%-1%的HCI使pH为2-3，过滤后，向滤液中加入浓氨水，调节pH为5-7，静置过滤，除去脂溶性物质及中性杂质，再用浓氨水调节pH为9-11，得到上样液。6.根据权利要求1所述的山苍子花和梗中生物碱的提取方法，其特征在于，采用为AB-8规格的大孔吸附树脂。7.根据权利要求1所述的山苍子花和梗中生物碱的提取方法，其特征在于，纯化过程中，上样液浓度为2.0mg/mL，吸附流速3BV/h。8.根据权利要求1所述的山苍子花和梗中生物碱的提取方法，其特征在于，纯化过程中，乙醇的体积浓度为90%，解析流速为1.5BV/h，洗脱剂的用量为3BV。
【文档编号】A61K135/00GK106038697SQ201610357212
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年5月26日
【发明人】董华强, 陈玲
【申请人】佛山科学技术学院