专利名称：泥附子加工工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种植物中药的提取工艺，特别是中药附子的提取工艺。
背景技术：
毛莨科乌头属植物乌头(Aconitum carmichaeli Debx)是一种重要的温里中药。它所含生物碱是重要的生理活性成分，同时它还含有双脂生物碱，可致心脏毒。在传统医药中，根据用药部位和炮制方法的不同有不同的称谓，川乌为干燥母根，附子是干燥侧根，而经附子炮制加工称为附片。炮制加工附片的过程可在一定程度降低双脂生物碱含量，同时也降低了毒性，但总生物碱的含量也会大大降低。以附子炮制附片方法主要有火炮法，水漂法，水漂加蒸煮法，加辅料加热法，高压蒸煮法，以及近期的微波炮制。最常用的水漂加蒸煮法的炮制指标成分总生物碱损失达83％，且饮片中仍含有双酯生物碱，仍可导致心脏毒。在中医临床应用时，仍还需要将附片单煎1～2小时。饮片的质量和用药的安全一直限制了附子的临床应用和新药开发。在张仲景所著的《伤寒论》中，含附子的方剂有20首(占总方剂的17.85％)，其中泥附子应用6首，泥附子的功效多是以大辛大热之性而达回阳救逆之功。由于附子中双脂生物碱具有毒性的原因，现代中医临床医生对附片应用都很谨慎，对泥附子的毒性就更望而生畏。泥附子现代中医临床主要用于镇痛，活血化淤的外用药。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种制备可供临床直接应用、或与其它中药配伍的泥附子加工工艺，所制备的药物中双脂生物碱的含量低，但总生物碱的含量却较高，临床应用安全，可显著改善微循环及抗血小板聚集，并可用于治疗呼吸系统、心血管系统、及消化系统疾病。
解决本发明的技术问题所采用的方案是取干燥附子破碎，加入16～20倍重量的水，煎煮7～10小时，过滤、浓缩，加入乙醇进行沉醇，得到总生物碱含量为4％～7％，双脂生物碱含量为0.23％～0.6％的浸膏。
在上述水煎附子时，应进行三次煎煮，首次加入6～8倍重量的水，煎煮3～4小时，取一煎液待用；二次加入6～7倍的水量，煎煮3～4小时，取二煎液待用；最后又加入6～7倍的水量，煎煮1～2小时，然后合并三次煎液。
在对生药进行沉醇处理时煮提液的生药浓度控制在0.5～1.0g/ml，使用的乙醇浓度为60％～80％，煮提液的PH范围4～6，沉醇处理后再用药用树脂洗脱、浓缩，达到总生物碱含量为30％～50％，双脂生物碱含量为2％～5％。
采用上述水煎的方案对泥附子加工，可极大地保持中医用药的特色，因控制了加热水解的工艺条件，毒性很大的双脂生物碱可顺利水解成单酯二萜生物碱，其毒性约双脂生物碱的二百分之一，进一步水解为胺醇，毒性降低更明显，约为原碱的二千分之一。再采取乙醇进行沉醇，可得到总生物碱含量较高，而双脂生物碱含量较低的生药，临床使用较为安全，治疗效果更加显著。
具体实施例方式
实施例1取附子，洗去泥土，切成0.2mm～0.3mm的小片干燥，备用。粉碎成粗粉，称取400克附子置于加热容器中用水煎煮，第一煎3小时，水量8倍，第二煎3小时，水量6倍，第三煎2小时，水量6倍。合并三煎溶液，过滤，浓缩至生药浓度为0.75g/ml，煮提液的PH值控制在5，加入浓度95％的乙醇，使最终浓度为80％，进行沉醇，得到总生物碱含量为5.83％，双脂生物碱含量为0.24％的生药。沉醇处理后，再浓缩至生药含量2g/ml，采用天津南开大学化工厂的AB型大孔吸附树脂湿法上柱，洗脱、浓缩，使总生物碱含量达到38.67％，双脂生物碱含量为3.19％。
实施例2取附子，洗去泥土，切成0.3mm～0.4mm的小片干燥，备用。粉碎成粗粉，称取800克附子置于加热容器中用水煎煮，第一煎4小时，水量9倍，第二煎3小时，水量6倍，第三煎1.5小时，水量6倍。合并三煎溶液，过滤，浓缩至生药浓度为0.60g/ml，煮提液的PH值控制在4.5，加入浓度95％的乙醇，使最终浓度为70％，进行沉醇，得到总生物碱含量为6.02％，双脂生物碱含量为0.487％的生药。沉醇处理后，再浓缩至生药含量2g/ml，采用天津南开大学化工厂的AB型大孔吸附树脂湿法上柱，洗脱、浓缩，使总生物碱含量达到40.2％，双脂生物碱含量为3.04％。
实施例3取附子，洗去泥土，切成0.2mm～0.3mm的小片干燥，备用。粉碎成粗粉，称取1200克附子置于加热容器中用水煎煮，第一煎3.5小时，水量8倍，第二煎4小时，水量6倍，第三煎1小时，水量6倍。合并三煎溶液，过滤，浓缩至生药浓度为0.85g/ml，煮提液的PH值控制在5.5，加入浓度95％的乙醇，使最终浓度为80％，进行沉醇，得到总生物碱含量为5.67％，双脂生物碱含量为0.43％的生药。沉醇处理后，再浓缩至生药含量2g/ml，采用天津南开大学化工厂的AB型大孔吸附树脂湿法上柱，洗脱、浓缩，使总生物碱含量达到37.33％，双脂生物碱含量为2.19％。
本发明的技术效果昆明种小自鼠的急性毒性实验表明所有动物均健康存活。无法求出LD50。由于受试药物浓度和给药剂量的限制无法求出LD50，进一步进行其最大给药量的测定。所有动物与对照比较均无异常表现，全部健康存活。按公斤体重折算为药典临床用量(15g/日附片的药典用药量)的1060倍，为云南中医流派用药剂量(100g/日)的160倍，说明临床用药安全。
本药物的止泻作用取昆明种小白鼠60只，雌雄各半，随机分成6组，即正常对照组、阳性对照组(给泻痢停)、附子高、中、低剂量组给药，连续给药3天，末次给药后1小时，用8％番泻叶混悬液2g/只(生药)灌胃，计数6小时的湿粪总数。结果表明附子有明显的止泻作用。
本药物对大鼠溃疡面保护作用取250±50gSD大白鼠90只，用乙醚麻醉剖开腹腔在胃底僵膜下注射0.25ml冰醋酸，缝合腹腔，青霉素注射消毒，随机分成6组，模型对照组、阳性药对照组、附片对组、附子高、中、低剂量组。模型组给同体积的生理盐水，阳性药物组给附片组给附片，附子附子，灌吸给药。连续给两周后处死取结扎幽门和喷门，放入福尔马林液1小时后剪开胃壁冲内尽溶物，用直尺测量其溃疡直径，并进一步做组织切片观察。结果附子对大鼠实验性胃溃疡具有治疗作用。高剂量组与附片组比较有显著性差异，优于附片组。
本药物对家兔体外血小板聚集的抑制作用取家兔18只，颈动脉取血用3.8％的枸椽酸钠抗凝，离心制备富血小血清及贫血小板血清，用血小板凝聚仪测其对ADP和胶原所诱导的血小板聚集的抑制作用。结果附子具有抑制ADP和胶原诱导血小板聚集的作用，而附片无此作用。
本药物对小鼠耳廓微血管的影响取体重为25-2g的昆明种小白鼠90只，雌雄各半，分成正常对照组、阳性药物对照组、附片对照组、受试药物高、中、低剂量组。连给药两周，末次给药后1小时，用显微镜测其耳廓血管口径和微血管开放数，结果表明，附子和附片均有增加微血管口径及增加毛细血管开放数的作用。泥附子高剂量组与附片组比较具有显著性差异。
抗寒冷实验取昆明种小白鼠100只雌雄各半，随机分成5组，即正常对照组、附片对照组、附子高、中、低剂量组。连续给药5天，末次给药后1小时放入冰箱冷冻室中-10℃？小时，观察其死亡只数求其存活率。并进行X2检验，结果表明，附子能够提高小鼠在寒冷环境中的存活率，与附片组比较差异具有显著性。
耐缺氧实验取昆明种小白鼠50只，雌雄各半，随机分成5组。即正常对照组、附片对照组、附子高、中、低剂量组，连续给药5天，末次给药后1小时，断头观测其张口呼吸的时间，并作组间t检验。结果附子高、中剂量组有明显延长张口呼吸时间的表现。
本药物对正常离体豚鼠心脏的影响取体重250+50g的豚鼠96只，雌雄皆有。随机分成8组，即生理盐水对照组、阳性药物对照组、附片对照组、附子高、中、低剂量组。备妥灌流装置，制备良体心脏，迅速放入含氧的K-H液的玻璃皿中，轻轻挤压心脏，排出心脏内残留的血液，将主动脉固定于灌流装置的心脏套管上.用含水氧的K-H液灌流，同时用蛙心夹夹住心尖，通过张力换能器输入二道记录仪，稳定10分钟，记录棒心率、冠流量、心肌收缩力。由心脏套管侧口注入受试药物，观察给药后1分钟、5分钟时的心率、冠流量、心肌收缩力。计算其药后变化百分率。进行组间t检验。结果所有试药对动物心率均无影响，附子高剂量组能增加冠脉流量，附子高、中剂量组、附片组能增强心肌收缩力。
本药物对垂体后叶素所致急性心肌缺血的影响取体重250+50g的豚鼠96只，雌雄皆有。随机分成8组，即生理盐水对照组、阳性药物对照组、附片对照组、附子高、中、低剂量组。在给药同时，给垂体后叶素(终浓度为0.018μ/ml)造模，记录造模后1分钟、5分钟、10分钟、15分钟时的心率、冠流量、心肌收缩力。计算其药后变化百分率，进行组间比较。结果表明，所有试药对心率均无影响，所有试药均有增加冠脉流量的作用。且附子水溶解部分和酯溶部分与附片组比较，差异具有显著性，附子高、中剂量组和水溶部分组具有增加心肌收缩力的作用。
权利要求
1.一种泥附子加工工艺，其特征是取干燥附子破碎，加入16～20倍重量的水，煎煮7～10小时，过滤、浓缩，加入乙醇进行沉醇，得到总生物碱含量为4％～7％，双脂生物碱含量为0.23％～0.6％的浸膏。
2.按权利要求1所述的泥附子加工工艺，其特征是附子进行三次煎煮，首次加入6～8倍重量的水，煎煮3～4小时，取一煎液待用；二次加入6～7倍的水量，煎煮3～4小时，取二煎液待用；最后又加入6～7倍的水量，煎煮1～2小时，然后合并三次煎液。
3.按权利要求2所述的泥附子加工工艺，其特征是对生药进行沉醇处理时煮提液的生药浓度控制在0.5～1.0g/ml，使用的乙醇浓度为60％～80％，煮提液的PH范围4～6，沉醇处理后再用药用树脂洗脱、浓缩，达到总生物碱含量为30％～50％，双脂生物碱含量为2％～5％。
4.按权利要求3所述的泥附子加工工艺，其特征是干燥附子的破碎粒度为2mm～5mm，附子煮提液沉醇时优选生药浓度0.75g/ml，优选乙醇浓度为80％，优选煮提液的PH值为5，沉醇处理后所用的药用树脂为大孔吸附树脂。
全文摘要
泥附子加工工艺。本发明涉及一种植物中药的提取工艺，特别是中药附子的提取工艺。本工艺以附子为原料，将其破碎，加入16～20倍重量的水，煎煮7～10小时，过滤、浓缩，加入乙醇进行沉醇，得到总生物碱含量为4％～7％，双脂生物碱含量为0.23％～0.6％的浸膏。本工艺制备的药物可供临床直接应用和配伍其它中药使用，药物中的双脂生物碱含量低，而总生物碱的含量则较高，临床应用安全，可显著改善微循环及抗血小板聚集，并可用于治疗呼吸系统、心血管系统、及消化系统疾病。
文档编号C07G5/00GK1565569SQ03135359
公开日2005年1月19日 申请日期2003年7月3日 优先权日2003年7月3日
发明者吴荣祖, 张风雷, 李立纪 申请人:昆明市医学科学研究所