专利名称：从中药材中提取菝葜皂甙元的方法
技术领域：
本发明涉及一种生物工程中生物活性物质的分离纯化方法，特别涉及利用大孔树脂分离及结晶技术从中药材中批量提取菝葜皂甙元的方法。
背景技术：
菝葜皂甙元是一种白色针晶，广泛存在于知母、天冬等百合科中草药中，具有十分重要的生理作用，具有清热解毒，止渴除烦，润肺滋肾，抗病毒，抗血小板聚集，降血糖，清除自由基等作用，可以用来主治现代医学中烦热消渴，热性病高烧，肺热咳嗽，结核病发热，糖尿病，大便干燥，老年性痴呆症及脑功能减退(学习，记忆减退，或某些性格改变)等症状。因此菝葜皂甙元有潜力成为广泛应用于医药、食品以及化妆品行业的一种必要物资，具有广阔的市场前景。
以知母和天冬等百合科中药材为原料生产菝葜皂甙元具有工艺简单、相对生产成本低廉、原料资源丰富等特点，所以研究开发从中药材中提取菝葜皂甙元有着明显的经济价值和现实意义。但是目前的提取方法均只能实现少量提取，提取的菝葜皂甙元纯度也不能达到药用要求，并且成本高也不适合大规模工业生产。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术中的不足，提供一种简便高效的从中药材中批量提取菝葜皂甙元的方法。
为了解决上述技术问题，本发明是通过以下技术方案实现的本发明提供了一种从中药材中提取菝葜皂甙元的方法，包括以下步骤(1)选取含有菝葜皂甙元的中药材，干燥后粉碎，使原料粉末粒径目数不小于200目
(2)使用醇溶液在20～70℃下浸提原料粉末4～6小时，原料粉末与醇溶液质量比为1∶10～20，醇溶液浓度大于75％(V/V)；(3)分离初次浸提液，残渣加5～10倍醇溶液在20～70℃下再次浸泡4～6小时；(4)合并两次浸提液，在不高于70℃条件下减压浓缩；(5)将浓缩的浸提液上样到D101大孔树脂柱子上，以1～3倍柱床体积乙醇溶液进行梯度洗脱，分步收集洗脱溶液；(6)将用90％乙醇水溶液洗脱时所得洗脱液浓缩至1/10体积，加入等体积的2％盐酸溶液，在50℃条件下酸解2个小时后抽滤；(7)将滤渣溶解到无水乙醇溶剂中，加入适量活性炭，于45～60℃下脱色30分钟，抽滤去除活性炭杂质。
(8)浓缩滤液使得在50℃下至饱和程度并于室温下结晶，抽滤出针状结晶，干燥即得到菝葜皂甙元产品。
本发明所述浸提醇溶液是乙醇溶液。
本发明所述浸提醇溶液是正丁醇溶液。
本发明所述浸提醇溶液浓度是95％(V/V)。
本发明所述洗脱醇溶液是乙醇溶液。
本发明所述结晶醇溶液是无水乙醇溶剂。
本发明所述含有菝葜皂甙元的中药材是知母和天冬等百合科中药材。
与现有技术相比，本发明的有益效果是使用本发明所述方法得到的产品为白色的针状晶体，晶体形状规则，熔程范围短。由于使用的结晶溶剂是乙醇，所得产品质量可靠，无任何毒害有机溶剂残留。产品可作为医药工业中激素类药品的合成原料，也可以作为菝葜皂甙元标准品使用。
具体实施例方式
以下通过具体实施例进一步对本发明进行描述。
本发明的原料可以选取含有菝葜皂甙元的中药材，比如知母，天冬等百合科中草药。
具体实施例1
从中药材知母中提取菝葜皂甙元的方法，包括以下步骤取10kg干燥的知母(未蒸煮，直接晒干)用铡刀将其切成小段，然后将切成的小段用粉碎机进行粉碎，其目数不小于200目，如果一次粉碎不够，可进行多次粉碎；向上述10kg知母粉末中加入200升95％的食用酒精，用木棒将其悬浊液搅匀后倒回浸提罐中，70℃条件下浸提6小时。浸提过程中进行搅拌，实现动态恒温提取；将上述悬液置于抽滤器中抽滤，然后在抽滤所得残渣中加入100升90％食用酒精，继续在70℃条件下动态提取6小时，然后于抽滤器中抽滤，弃去残渣。
收集两次抽滤后的滤液，加入到三效酒精回收塔中，减压回收酒精，直到溶液为原体积的1/10为止，酒精回收率一般在80％左右。将浓缩后的溶液30升分批加入到旋转蒸发仪中，于50℃条件下减压充分浓缩，将最后浓缩好的提取液10升直接上样到已预处理好的D101大孔树脂柱子上。
分别以3倍柱床体积10％，30％，50％，90％不同比例的乙醇水溶液进行洗脱。将用90％乙醇水溶液洗脱时所得的洗脱液15升置于旋转蒸发仪中，50℃条件下浓缩到2升。
向上述2升浓缩液中加入等体积2％的盐酸溶液，置于50℃下酸解2个小时左右。酸解后将酸解液抽滤，过滤的滤渣用无水乙醇溶剂溶解。向上述的结晶醇溶液200ml中加入活性炭4勺(20g)左右，于50℃下脱色30分钟，然后抽滤掉活性炭部分。
将抽滤出的滤液200ml溶液50℃下调节到饱和状态，将溶液置于室温下结晶。分批抽滤出所析白色针状晶体，置于真空干燥器中，减压干燥，得到菝葜皂甙元样品46g。
具体实施例2提取的操作步骤与实施例1相同，其中浸提的醇溶液为浓度为75％(V/V)的正丁醇，原料粉末与醇溶液质量比为1∶10，浸取温度20℃，时间为4小时。浸取后减压浓缩温度为70℃，脱色温度为45℃，梯度洗脱时的醇溶液的使用量为2倍柱床体积，得到菝葜皂甙元样品44.7g。
具体实施例3从中药材天冬中提取菝葜皂甙元的方法，包括以下步骤取10kg干燥的天冬(未蒸煮，直接晒干)用铡刀将其切成小段，然后将切成的小段用粉碎机进行粉碎，其目数不小于200目，如果一次粉碎不够，可进行多次粉碎；提取的操作步骤与实施例1相同，其中浸提的醇溶液为浓度为95％(V/V)的乙醇水溶液，原料粉末与醇溶液质量比为1∶15，浸取温度60℃，时间为5小时。浸取后减压浓缩温度为60℃，脱色温度为60℃，梯度洗脱时的醇溶液的使用量为3倍柱床体积，得到菝葜皂甙元样品28.3g。
具体实施例4从中药材天冬中提取菝葜皂甙元的方法，包括以下步骤提取的操作步骤与实施例1相同，其中浸提的醇溶液为浓度为90％(V/V)的正丁醇水溶液，原料粉末与醇溶液质量比为1∶15，浸取温度50℃，时间为6小时。浸取后减压浓缩温度为60℃，脱色温度为60℃，梯度洗脱时的醇溶液的使用量为1倍柱床体积，得到菝葜皂甙元样品27g。
最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的具体实施例子。显然，本发明不限于以上实施例子，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。
权利要求
1.一种从中药材中提取菝葜皂甙元的方法，其特征在于包括以下步骤(1)选取含有菝葜皂甙元的中药材，干燥后粉碎，使原料粉末粒径目数不小于200目；(2)使用醇溶液在20～70℃下浸提原料粉末4～6小时，原料粉末与醇溶液质量比为1∶10～20，醇溶液浓度大于75％(V/V)；(3)分离初次浸提液，残渣加5～10倍醇溶液在20～70℃下再次浸泡4～6小时；(4)合并两次浸提液，在不高于70℃条件下减压浓缩；(5)将浓缩的浸提液上样到D101大孔树脂柱子上，以1～3倍柱床体积乙醇溶液进行梯度洗脱，分步收集洗脱溶液；(6)将90％乙醇水溶液洗脱时所得洗脱液浓缩至1/10体积，加入等体积的2％盐酸溶液，在50℃条件下酸解2个小时后抽滤；(7)将滤渣溶解到无水乙醇溶剂中，加入适量活性炭，于45～60℃下脱色30分钟，抽滤去除活性炭杂质。(8)浓缩滤液使得在50℃下至饱和程度并于室温下结晶，抽滤出针状结晶，干燥即得到菝葜皂甙元产品。
2.根据权利要求1所述的从中药材中提取菝葜皂甙元的方法，其特征在于，所述浸提醇溶液是乙醇溶液。
3.根据权利要求1所述的从中药材中提取菝葜皂甙元的方法，其特征在于，所述浸提醇溶液是正丁醇溶液。
4.根据权利要求1所述的从中药材中提取菝葜皂甙元的方法，其特征在于，所述浸提醇溶液浓度是95％(V/V)。
5.根据权利要求1所述的从中药材中提取菝葜皂甙元的方法，其特征在于，所述含有菝葜皂甙元的中药材是知母。
6.根据权利要求1所述的从中药材中提取菝葜皂甙元的方法，其特征在于，所述含有菝葜皂甙元的中药材是天冬或其它百合科中药材。
全文摘要
本发明公开了一种生物工程中生物活性物质的分离纯化方法，旨在提供一种利用大孔树脂分离及结晶技术从中药材中批量提取菝葜皂甙元的方法。包括干燥粉碎原料、浸提、减压浓缩、梯度洗脱、酸解、脱色和结晶等步骤。使用本发明所述方法得到的产品为白色的针状晶体，晶体形状规则，熔程范围短。由于使用的结晶溶剂是乙醇，所得产品质量可靠，无任何毒害有机溶剂残留。产品可作为医药工业中激素类药品的合成原料，也可以作为菝葜皂甙元标准品使用。
文档编号C07J71/00GK1699403SQ20051004981
公开日2005年11月23日 申请日期2005年5月24日 优先权日2005年5月24日
发明者龚兴国, 张锐, 曾冬云, 郦剑勇 申请人:浙江大学