专利名称：2－氨基－6－氟－9－(4－羟基－3－羟甲基丁基)嘌呤及其中间体的制备方法
技术领域：
本发明涉及抗病毒药物，特别是抗单纯疱疹病毒的嘌呤核苷类化合物2-氨基-6-氟-9-(4-羟基-3-羟甲基丁基)嘌呤及其中间体核苷氯化铵盐的制备方法。
背景技术：
近年来，随着人们对嘌呤核苷及其类似物的合成及生物学评价的研究不断深入，发现该类化合物在临床上具有抗肿瘤和抗病毒活性。通过对核苷类似物的结构改造，产生一系列具有明显的抗病毒活性核苷类似物，成为抗病毒类药物研究的重要组成部分。同时，许多化合物因含氟原子而具有生理活性，将其引人化合物中，其理化性质和生理活性将会发生一定的变化。因而，含氟化合物作为生物活性更强、选择性更高的药物已被广泛应用。核苷类似物9-(4-羟基-3-羟甲基丁基)鸟嘌呤(即Penciclovir，结构式如下式6所示)是疱疹病毒类的一种有效的选择性抑制剂，临床上主要用于治疗严重的疱疹病毒感染。目前已对Penciclovir进行结构修饰，合成了9-[(4-氟)-3-羟基甲基丁基]鸟嘌呤(即FHBG，结构式如下式7所示)、8-氟-9-(4-羟基-3-羟基甲基丁基)鸟嘌呤(即8-Fluoropenciclovir，结构式如下式8所示)的含氟化合物，取得很好药效。通过对一种疱疹病毒类蛋白HSV1-TK(单纯疱疹病毒1-胸腺嘧啶脱氧核苷激酶蛋白)的结构与活性的研究，嘌呤C-6位可能是与HSV1-TK结合的活性部位。Kim等(Kim，D-K；Lee，N；Kim，H-T；Im，G.-J；Kim，K-H.Bioorganic&Medicinal Chemistry，1999，7，565.)在嘌呤C-6位上引入氟原子合成了2-氨基-6-氟-9-(4-羟基-3-羟甲基丁基)嘌呤(6-Fluoropenciclovir，结构式如下式1所示)，并对其进行了酯化，得到嘌呤C-6用氟取代的Penciclovir前药，并取得一定的药效。
该文献中公开的式1化合物的合成路线为 但上述合成路线中的第一步中所用原料式3化合物不是常规试剂，不易购得，且由于三甲胺(TMA)沸点比较低(2～3℃)，一般需要在低温冷凝下加样和反应，合成条件比较苛刻，同时反应时间长达5天；而第二步，按照文献方法，在80℃下反应副反应产物多，实验较难重复；故影响了其的广泛应用。
发明内容
本发明的目的是克服上述现有技术的缺陷，提供一种合成式1化合物的中间体——式4化合物核苷氯化铵盐的制备方法。
本发明的制备方法包括由式3化合物2-氨基-6-氯-9-(4-羟基-3-羟甲基丁基)嘌呤与三甲胺乙醇溶液在四氢呋喃和N，N-二甲基酰胺混合溶剂中进行反应。
优选地，所述反应包括以下步骤将式3化合物溶于四氢呋喃和N，N-二甲基酰胺混合溶剂中，置于-20～0℃盐冰水浴中，通氮气保护等无水、无氧条件下，取三甲胺乙醇溶液逐滴加入上述体系，搅拌反应，慢慢升至室温，反应过夜。TLC跟踪反应至原料基本反应完全后停止反应，过滤，用无水乙醚洗涤，在真空下干燥，得到白色固体式4化合物。
其中，上述混合溶剂中四氢呋喃和N，N-二甲基酰胺的体积比优选为2～5∶1，更优选为3～4∶1。
而为了简便，本发明中三甲胺乙醇溶液采用市售产品，其中三甲胺与乙醇的体积比为1∶2。
本发明所说的室温通常为10～25℃。
式3化合物可由易得的原料式2化合物2-氨基-6-氯-9-(4-乙酰氧基-3-乙酰氧甲基丁基)嘌呤经水解脱去两个乙酰基反应制得。
所说水解反应包括将式2化合物2-氨基-6-氯-9-(4-乙酰氧基-3-乙酰氧甲基丁基)嘌呤溶解于THF，加入K2CO3置于0～20℃下搅拌反应，TLC跟踪反应至原料基本反应完全。停止反应，旋转蒸发除去反应溶剂，得淡黄色固体，用乙醇洗涤，经硅胶柱分离，旋转蒸发除去溶剂，真空干燥，得到白色固体式3化合物。
优选地，在上述体系中加入甲醇和水混合溶液，水解脱去两个乙酰基，同时保存6位上的氯原子，可得到高产率的式3化合物；该甲醇和水的体积比优选为1∶1。
本发明的另一目的是提供一种式1化合物2-氨基-6-氟-9-(4-羟基-3-羟甲基丁基)嘌呤的制备方法。
所述制备方法包括如下步骤
①按上述中间体的制备方法制备式4化合物核苷氯化铵盐；②将式4化合物溶于N，N-二甲基酰胺，加入无水氟化钾，置于20～60℃进行搅拌反应。TLC跟踪反应至原料基本反应完全。反应结束后，过滤，旋转蒸发除去部分溶剂，经硅胶柱分离，旋转蒸发除去溶剂，真空干燥，得到白色固体式1化合物。
其较佳合成路线为 在上述由式3化合物制得式4化合物的步骤中，本发明用三甲胺乙醇溶液代替无水三甲胺，避免了低温冷凝的苛刻条件，而且反应时间也大大缩短(通常一天就可以)。
而在式4化合物合成式1化合物的步骤中，本发明人发现反应温度对此反应影响比较大，当反应温度低于60℃时，核苷氯化铵盐稳定，与氟化试剂反应只生成式1化合物；但当反应温度大于60℃时，则该核苷氯化铵盐会分解，生成副产物。
可见，本发明的制备方法简化了工艺条件，操作方便，无高温、高压等特殊要求，普通反应设备即可完成，产品纯化采用过滤、柱分离等方法，简单易行，产品纯度较高。
具体实施例方式
下面用实施例来进一步说明本发明，但本发明并不受其限制。
实施例1 式3化合物2-氨基-6-氯-9-(4-羟基-3-羟甲基丁基)嘌呤的合成取式2化合物(358mg，1mmol)，溶解于12ml THF，加入10ml K2CO3(150mg，1mmol)甲醇和水混合溶液(MeOH/H2O体积比＝1∶1)，置于0℃下搅拌反应，TLC跟踪(展开剂10％乙醇/二氯甲烷)反应至原料基本反应完全。停止反应，旋转蒸发除去反应溶剂，得淡黄色固体，用25ml乙醇洗涤，再用少量的THF溶解。经硅胶柱(10％乙醇/二氯甲烷作淋洗液)分离，收集Rf值为0.36组分，旋转蒸发除去溶剂，真空干燥，得到白色固体式3化合物，收率78.4％。
实施例2～3 式3化合物的合成反应温度分别为15℃和20℃，余同实施例1，得到白色固体式3化合物，收率分别为70.8％，64.5％。
实施例4 式4化合物核苷氯化铵盐的合成取式3化合物(813mg，3mmol)溶于40ml混合溶剂(THF/DMF体积比＝3∶1)置于0℃冰水浴中，通氮气保护。取9ml三甲胺乙醇溶液逐滴加入上述体系，搅拌反应。反应慢慢升至室温，反应过夜，有白色固体生成。TLC跟踪(展开剂10％甲醇/二氯甲烷)反应至原料基本反应完全。停止反应，过滤，用无水乙醚(10ml×2)洗涤，在真空下干燥，得到白色固体式4化合物，收率90.5％。
实施例5 式4化合物核苷氯化铵盐的合成取式3化合物(813mg，3mmol)溶于40ml混合溶剂(THF/DMF体积比＝4∶1)置于-20℃盐冰水浴中，通氮气保护。取12ml三甲胺乙醇溶液逐滴加入上述体系，搅拌反应。反应慢慢升至室温，反应过夜，有白色固体生成。余同实施例4，得到白色固体式4化合物，收率86.8％。
实施例6 式1化合物2-氨基-6-氟-9-(4-羟基-3-羟甲基丁基)嘌呤的合成取式4化合物(165mg，0.5mmol)溶于5ml DMF，加入无水KF(240mg，5mmol)，置于60℃搅拌反应，TLC跟踪(展开剂10％甲醇/二氯甲烷)反应至原料基本反应完全。反应结束后，过滤，旋转蒸发除去部分溶剂，经硅胶柱(淋洗液为10％甲醇/二氯甲烷溶液)分离，收集Rf值为0.45组分，旋转蒸发除去溶剂，真空干燥，得到白色固体式1化合物，收率87.3％。
实施例7～8 式1化合物2-氨基-6-氟-9-(4-羟基-3-羟甲基丁基)嘌呤的合成反应温度分别为20℃、40℃，余同实施例6，得到式1化合物，收率分别为70.8，72.6％。
本制备方法中的原料式2化合物2-氨基-6-氯-9-(4-乙酰氧基-3-乙酰氧甲基丁基)嘌呤为常州康丽制药有限公司产品；无水四氢呋喃(THF)、N，N-二甲基酰胺(DMF，extra dry)购于Acros化学试剂公司；无水氟化钾、33％三甲胺(TMA)乙醇溶液购于国药化学试剂公司；其它试剂均为分析纯购于国药化学试剂公司，所有试剂未经纯化直接使用。
本发明最终产物及主要中间体的理化性质及光谱数据如下式3化合物2-氨基-6-氯-9-(4-羟基-3-羟甲基丁基)嘌呤m.p.141.6～142.0℃；UV-vis(EtOH)λmax223nm，248nm和310nm；IR(KBr)V3320，3200，2930，1610，1570，1380，1060cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ8.15(s，1H，C8H)，6.90-6.80(s，2H，NH2)，4.55-4.50(m，2H，OH)，4.05-4.15(t，2H，NCH2，J＝7.3Hz)，3.30-3.50(m，4H，OCH2)，1.70-1.80(m，2H，CH2CH)，1.40-1.50(m，1H，CH2CH)；MS m/z(％)271(M+，72)，240(57)，170(100)。
式4化合物核苷氯化铵盐m.p.168.1～170.5℃；UV-vis(EtOH)λmax225nm，245nm，320nm；IR(KBr)V3310，2920，1630，1570，1480，1320，1040cm-1；1H-NMR(D2O)δ8.40(s，1H，C8H)，4.20-4.30(t，2H，NCH2，J＝7.42Hz)，3.70(s，9H，CNH3)，3.55-3.65(m，4H，OCH2)，1.85-1.90(m，2H，CH2CH)，1.65-1.60(m，1H，CH2CH；MSm/z(％)280(M-CH3Cl，92)，249(100)，191(80)。
式1化合物2-氨基-6-氟-9-(4-羟基-3-羟甲基丁基)嘌呤m.p.173.5～175.4℃；UV(EtOH)λmax306nm；IR(KBr)V3320，3310，2930，1660，1570，1410，1220，1030，783，625cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ8.10(s，1H，C8H)，6.85(s，2H，NH2)，4.50-4.60(m，2H，OH)，4.15-4.05(t，2H，4′H-CH2，J＝7.42)，3.45-3.30(m，4H，OCH2)，1.80-1.70(m，2H，CH2CH)，1.50-1.35(m，1H，CH2CH)；19F-NMR(DMSO-d6)δ-74.12(s，1F)；MS m/z(％)255(M+，26)，224(27)，153(100)。
权利要求
1.一种如式4所示化合物核苷氯化铵盐的制备方法，其包括式3化合物2-氨基-6-氯-9-(4-羟基-3-羟甲基丁基)嘌呤与三甲胺乙醇溶液在有机溶剂 中进行反应。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述反应包括以下步骤将式3化合物溶于四氢呋喃和N，N-二甲基酰胺混合溶剂中，置于-20～0℃盐冰水浴中，通氮气保护；取三甲胺乙醇溶液逐滴加入上述体系，搅拌反应，慢慢升至室温，反应过夜。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于该混合溶剂中四氢呋喃和N，N-二甲基酰胺的体积比为2～5∶1。
4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于使用常温下稳定的三甲胺乙醇溶液其中三甲胺与乙醇的体积比为1∶2。
5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于该式3化合物由式2化合物2-氨基-6-氯-9-(4-乙酰氧基-3-乙酰氧甲基丁基)嘌呤经水解脱去两个 乙酰基反应制得。
6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于所述水解脱去两个乙酰基反应包括以下步骤将式2化合物溶于无水四氢呋喃，置于0～20℃下，加入碳酸钾的甲醇和水混合溶液进行反应。
7.一种式1化合物2-氨基-6-氟-9-(4-羟基-3-羟甲基丁基)嘌呤的制备方法，其包括如下步骤 ①如权利要求1～6任一项所述的制备方法制备式4化合物核苷氯化铵盐；②将式4化合物溶于N，N-二甲基酰胺，加入无水氟化钾，置于20～60℃进行搅拌反应。
全文摘要
本发明公开了一种制备抗病毒药物2－氨基－6－氟－9－(4－羟基－3－羟甲基丁基)嘌呤的中间体核苷氯化铵盐的制备方法，其包括2－氨基－6－氯－9－(4－羟基－3－羟甲基丁基)嘌呤与三甲胺乙醇溶液在有机溶剂中进行反应；该制备方法将三甲胺乙醇溶液代替现有技术中的无水三甲胺，避免了低温冷凝的苛刻条件，缩短了反应时间。本发明还公开了一种2－氨基－6－氟－9－(4－羟基－3－羟甲基丁基)嘌呤的制备方法，其包括利用上述制备方法先制得核苷氯化铵盐，再与无水氟化钾在20～60℃温度下进行反应；该制备方法的温度条件使核苷氯化铵盐稳定，不分解，无反应副产物生成。
文档编号C07D473/40GK101074230SQ20061002660
公开日2007年11月21日 申请日期2006年5月17日 优先权日2006年5月17日
发明者张岚, 蔡汉成, 尹端沚, 汪勇先 申请人:中国科学院上海应用物理研究所