专利名称：用芦丁制备槲皮素及异槲皮苷的方法
技术领域：
本发明涉及一种用芦丁制备槲皮素及异槲皮苷的方法。
背景技术：
芦丁是一种黄酮类化合物，在自然界植物中的分布十分广泛，在很多植物的根、茎、叶、花、果实、种子中都存在。一些常用中药，如槐米、芸香、养麦、沙棘、银杏、枸杞、益母草、柴胡、夏枯草、芦荟、桉树叶和烟叶等多种植物中都含有芦丁，芦丁是我国医药工业的重要原料之一。
槲皮素是芦丁和异槲皮苷的苷元，槲皮素第3碳上连接一个芸香糖基即是芦丁，去掉芸香糖中的鼠李糖基，仅一个葡萄糖基与槲皮素相联即为异槲皮苷，其化学结构见下图 槲皮素 芦丁 异槲皮苷槲皮素、芦丁、异槲皮苷化学结构示意图研究表明，芦丁具有降低毛细血管通透性、抗炎、抗病毒镇痛、抗氧化及抑制醛糖还原酶等多方面药理活性(参见韩英华，秦元璋，芦丁研究现状，山东中医杂志2003，22(10)635-637)。
槲皮素和异槲皮苷的生理活性远高于芦丁，具有抗氧化、抗病毒，以及增强雌性激素的分泌等性质，因此常被用作食品添加剂或辅助药物给药。槲皮素和异槲皮苷在自然界植物中分布也很广泛，但天然含量却很低，仅有万分之几到千分之几的丰度，很难提取利用(参见CN03133636.1)。
目前，异槲皮苷和槲皮素的制备方法有1、从天然植物中分离提取，如“从生物类黄酮中回收异槲皮素”(CN1355797)等方法，但这类方法要使用大量的有机溶剂，不利于清洁生产，并且产率低，成本高，很难实现产业化生产。2、用酶法水解芦丁制备异槲皮苷和槲皮素，比如“酶法水解制备异槲皮素和槲皮素的方法”(CN03133636.1)，“从植物生物质提取、纯化和转化类黄酮化合物”(CN1685053A)，该类方法需要使用昂贵的生物酶制剂，工艺设备也较复杂，生产成本较高。3、槲皮素的工业化生产一般采用强酸水解芦丁的工艺(参见刘亚萍，槲皮素制备方法的研究，时珍国医国药，2004，15(10)657-658；何勤，徐雄良等，正交试验法优选槐米中槲皮素的提取工艺，中草药，2003，34(5)409-412)，对生产设备的防腐要求较高，且产生三废，不利于环境保护。
发明内容
本发明要解决的问题是提供一种成本低、无污染、工艺简单、转化率高的用芦丁制备槲皮素及异槲皮苷的方法。该方法采用高压水解工艺处理芦丁，得到异槲皮苷及槲皮素。
为解决上述问题，本发明采用的方法步骤如下1、在高压反应釜中加入适量水，加热至沸；2、称取芦丁，加入到2～3倍芦丁重量份数的蒸馏水中搅拌均匀成浆液，将浆液置于前述高压反应釜内沸水上方的隔板上；3、继续加热反应釜，利用水蒸汽排尽釜内空气后密闭高压釜，控制釜内饱和水蒸气压为0.2～0.8Mpa，水解10分钟～5小时，可制得混合水解物；4、停止加热，降温排汽，取出混合水解物冷却至5～20℃之间，用3～5倍重量10～20℃之间的蒸馏水离心洗涤2～4次，所得沉淀物再真空干燥；5、用常规方法从沉淀物中分离提纯异槲皮苷和槲皮素。
用液相色谱仪测定芦丁高压水解体系中不同组分含量仪器美国Agilent公司1100系列高效液相色谱仪，包括在线真空脱气机，四元梯度泵，自动进样器，柱温箱，DAD二极管阵列检测器和化学工作站，色谱分析条件Hypersil BDS C18色谱柱(i.d.4.6×250mm，5μm)，柱温30℃，流动相A(80％乙腈0.02％磷酸水溶液，V/V)，B(0.02％磷酸水溶液，V/V)，C(纯水)；检测中A的浓度变化为0-4min，30％；4～8min，30％～100％；8～14min，100％；14～22min，30％。流速1.0ml/min；检测波长360nm；参比波长450nm。
根据测定结果，不同饱和蒸汽压条件对水解体系影响的动态影响见图1、图2、图3；水解反应产物与黄酮标准对照品的HPLC谱图见图4、图5、图6、图7，其中，从左到右的波峰分别是芦丁、异槲皮苷和槲皮素。
本发明具有成本低、无污染、工艺简单、转化率高等优点。
图1是本发明在0.50Mpa饱和蒸汽压条件下对水解体系的动态影响示意图；图2是本发明在0.60Mpa饱和蒸汽压条件下对水解体系的动态影响示意图；图3是本发明在0.70Mpa饱和蒸汽压条件下对水解体系的动态影响示意图；图4是黄酮标准对照品的HPLC谱图；图5是本发明实施例1水解产物HPLC谱图；图6是本发明实施例3水解产物HPLC谱图；图7是本发明实施例4水解产物HPLC谱图。
具体实施例方式
实施例1在高压反应釜中加入适量水，加热至沸；取医药级芦丁(含量＞95％)1000克，加入到2.5倍芦丁重量的蒸馏水中搅拌均匀成浆液，将浆液置于高压反应釜内沸水上方的隔板上；继续加热反应釜，利用水蒸汽排尽釜内空气后密闭高压釜，控制釜内饱和水蒸汽压为0.20Mpa，维持5小时，可制得混合水解物；停止加热，降温排汽，取出混合水解物冷却至11℃，用3倍重量14℃的蒸馏水离心洗涤2次，所得沉淀物再真空干燥；沉淀物经真空干燥得709克。
用HPLC检测；芦丁含量79.1％，异槲皮苷9.48％，槲皮素含量9.09％。
实施例2在高压反应釜中加入适量水，加热至沸；取医药级芦丁(含量＞95％)1000克，加入到2倍芦丁重量的蒸馏水中搅拌均匀成浆液，将浆液置于高压反应釜内沸水上方的隔板上；继续加热反应釜，利用水蒸汽排尽釜内空气后密闭高压釜，控制釜内饱和水蒸汽压为0.50Mpa，维持30分钟，可制得混合水解物；停止加热，降温排汽，取出混合水解物冷却至5℃，用5倍重量10℃的蒸馏水离心洗涤3次，所得沉淀物再真空干燥；沉淀物经真空干燥得798克；。
用HPLC检测，芦丁含量68.9％，异槲皮苷10.2％，槲皮素含量18.8％。
实施例3在高压反应釜中加入适量水，加热至沸；取医药级芦丁(含量＞95％)1000克，加入到3倍芦丁重量的蒸馏水中搅拌均匀成浆液，将浆液置于高压反应釜内沸水上方的隔板上；继续加热反应釜，利用水蒸汽排尽釜内空气后密闭高压釜，控制釜内饱和水蒸汽压为0.60Mpa，维持30分钟，可制得混合水解物；停止加热，降温排汽，取出混合水解物冷却至17℃，用4倍重量17℃的蒸馏水离心洗涤3次，所得沉淀物再真空干燥；沉淀物经真空干燥得672克。
用HPLC检测，芦丁含量28.6％，异槲皮苷13.7％，槲皮素含量32.4％。
实施例4在高压反应釜中加入适量水，加热至沸；取医药级芦丁(含量＞95％)1000克，加入到2.5倍芦丁重量的蒸馏水中搅拌均匀成浆液，将浆液置于高压反应釜内沸水上方的隔板上；继续加热反应釜，利用水蒸汽排尽釜内空气后密闭高压釜，控制釜内饱和水蒸汽压为0.80Mpa，维持10分钟，可制得混合水解物；停止加热，降温排汽，取出混合水解物冷却至20℃，用5倍重量20℃的蒸馏水离心洗涤3次，所得沉淀物再真空干燥；沉淀物经真空干燥得483克。
用HPLC检测，槲皮素含量94.3％，芦丁含量0.34％。
权利要求
1.用芦丁制备槲皮素及异槲皮苷的方法，包括如下步骤a、在高压反应釜中加入适量水，加热至沸；b、称取芦丁，加入到2～3倍芦丁重量份数的蒸馏水中搅拌均匀成浆液，将浆液置于前述高压反应釜内沸水上方的隔板上；c、继续加热反应釜，利用水蒸汽排尽釜内空气后密闭高压釜，控制釜内饱和水蒸气压为0.2～0.8Mpa，水解10分钟～5小时，可制得混合水解物；d、停止加热，降温排汽，取出混合水解物冷却至5～20℃之间，用3～5倍重量10～20℃之间的蒸馏水离心洗涤2～4次，所得沉淀物再真空干燥；e、用常规方法从沉淀物中分离提纯异槲皮苷和槲皮素。
全文摘要
用芦丁制备槲皮素及异槲皮苷的方法；步骤如下在高压反应釜中加入适量水，加热至沸；称取芦丁，加入到2～3倍芦丁重量份数的蒸馏水中搅拌均匀成浆液，将浆液置于前述高压反应釜内沸水上方的隔板上；继续加热反应釜，利用水蒸汽排尽釜内空气后密闭高压釜，控制釜内饱和水蒸气压为0.2～0.8Mpa，水解10分钟～5小时，可制得混合水解物；停止加热，降温排汽，取出混合水解物冷却至5～20℃之间，用3～5倍重量10～20℃之间的蒸馏水离心洗涤2～4次，所得沉淀物再真空干燥；用常规方法从沉淀物中分离提纯异槲皮苷和槲皮素；本发明具有成本低、无污染、工艺简单、转化率高等优点。
文档编号C07H17/00GK1817876SQ20061006521
公开日2006年8月16日 申请日期2006年3月20日 优先权日2006年3月20日
发明者陕方, 任贵兴 申请人:中国农业科学院作物科学研究所, 山西省农业科学院农产品综合利用研究所