专利名称：一种合成rna单体的方法
技术领域：
本发明涉及一种RNA单体的制备方法。
背景技术：
RNA单体目前由Glen Research, Transgenomic， ChemGene等少数几个大公 司垄断生产，国内无任何RNA单体生产厂家；我们依靠自有技术生产的RNA单体 质量指标高于现有厂家生产产品；
发明内容
本发明的目的在于采用独特的2'-保护基为出发点，合成RNA单体。 本发明的上述目的是通过下述技术方案实现的 A.制备2，-保护基1_(3-氯苯)-4-哌啶烯(CPPB. 尿苷单体合成；
C. 胞苷单体合成；
D. 腺苷单体合成；
E. 鸟苷单体合成； 所述的RNA单体合成方法，其特征在于
采用独特的2，-保护基1-(3-氯苯)-4-哌啶烯(CPP)为出发点，合成RNA 单体。
图1为CPP制备方法结构图 图2为尿苷单体合成流程图 图3为胞苷单体合成流程图 图4为腺苷单体合成流程图 图5为鸟苷单体合成流程图
具体实施例方式
2'-保护基CPP的制备方法
3-氯丙酰氯与乙烯在刘易斯酸的作用下生产1, 5-二氯戊酮，再与3-氯 苯胺縮合形成N- (3-氯苯)-哌啶酮，后者再与甲醇縮合生成二甲基-N- (3-氯苯)-哌啶縮酮，最后再在减压加热条件下脱掉一分子甲醇生成所要的 1-(3-氯苯)-4-哌啶烯(CPP);
RNA合成单体的制备尿苷单体3 ， ，5 '-氢氧基用Marcwicz保护基进行保护，然后在酸 性条件下引入2 ， -CPP保护基，随后脱去Marcwicz保护基，5 ，-氢氧 基用1，4-二甲氧基三苯甲烷氯(DMTrCl)进行保护，最后在3'-位用磷酸化 试剂进行亚磷酰胺化，制得尿苷单体。
胞苷单体、腺苷单体、鸟苷单体制备将胞苷/腺苷/鸟苷的碱基先用苯 甲酰基保护，后继步骤与鸟苷相同。
权利要求
1、一种RNA单体的合成方法，其特征在于独特的2’-保护基为出发点，RNA合成单体结构不同于以往的RNA合成单体。合成方法包括如下步骤A.制备2’-保护基1-(3-氯苯)-4-哌啶烯(CPP)；B.尿苷单体合成；C.胞苷单体合成；D.腺苷单体合成；E.鸟苷单体合成。
2、 根据权利要求1所述的RNA单体合成方法获得的RNA单体，其特征在于， 合成及纯化获得的RNA寡核苷酸纯度可达97%以上，纯化回收率可达55% 以上。
全文摘要
本发明公开了一种合成RNA单体的方法。该方法中所采用的RNA合成单体以其独特的2’-保护基为出发点，RNA合成单体结构不同于以往的RNA合成单体。其特点在于该保护基在酸性脱保护条件下稳定，在碱性脱保护条件下也很稳定。在固相合成完成后，在把5’-DMT保护基脱掉而2’-保护基仍在链上的情况下可以进行高压液相纯化，一级纯化后的产品可以在适当的条件下将2’-保护基完全脱下来，进一步纯化后即可与另一条互补链退火成双链。由此合成及纯化获得的RNA寡核苷酸纯度可达97％以上，纯化回收率可达55％以上。
文档编号C07H21/00GK101289486SQ200710039568
公开日2008年10月22日 申请日期2007年4月18日 优先权日2007年4月18日
发明者曹跃琼 申请人:上海吉凯基因化学技术有限公司