专利名称：肝靶向抗病毒前体药物环状磷酸酯及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及 一种抗病毒化合物，特别是涉及具有肝靶向抗病毒作 用的环状辚酸酯类前体药物，或其所有可能的异构体、水合物、溶剂 化物、可药用盐以及药物组合物。
背景技术：
许多抗病毒药物都是已知的例如恩曲他滨(FTC)、替诺福韦 (Tenofovir)、 LB80331、 LB80317、 {2-[2-氨基-6-(4-甲氧基苯巯基) 喋呤-9-基)-乙氧基]}甲膦酸、恩替卡韦、Torcitabine、 画-107、 Viramidine、利巴韦林、Racivir、 Amdoxovir、 MIV-210、 PSI-6130、 PSI-6206等(Current Drug Targets-Infectious Disorders 2005, 5， 307-400; Drugs of the Future 2004， 29(2): 163-177)。
以上的抗病毒药物都属于核苷类，根据其化学结构，可以简单的 分为糖基末端含有磷酸基团和不含磷酸基团两类，其作用基理一般是 药物在细胞内磷酸化成有活性的三磷酸代谢物，从而抑制病毒的 DNA或RNA聚合酶活性，阻止DNA或RNA的合成，杀灭病毒。
糖基末端含有磷酸基团的核苷药物，如替诺福韦、LB80331和 LB80317等，在生理pH下是高度带负电的，所以细胞膜透性差，很 难到达药物作用的靶区，同时易被肾清除血浆半衰期短、肾和胃肠道 毒副作用大，而且口服生物利用度差。为了克服以上缺点，最常用的 策略是将药物结构中的磷酸基团酰化制备成前药，例如抗HBV替诺 福韦的双(异丙氧酰氧基甲基)前药替诺福韦酯，可改善口服生物利 用度、细胞膜透性和组织分布。但是酯水解酶体内分布广泛，替诺福 韦酯等含有磷酸的酯类前体药物，在药物到达肝细胞前，大部分已被
代谢为带有负电荷膜透性的母体药物，在细胞外不易到达肝细胞的母体药物被主动转运到肾的近端小管，而高浓度含有礫酸的母体药物具 有一定的肾毒性。
另一类糖基末端不含磷酸基团的核苷药物，如恩曲他滨、恩替卡 韦等，可以改善药物的细胞膜透性、生物利用度、毒副作用等，但是 药物的糖基在细胞内不能完全被代谢成有活性的三磷酸物，从而降低 了疗效。
本发明将抗病毒核苷药物恩曲他滇、替诺福韦、LB80331、 LBS(B17、 (2-[2-氨基-6-(4-甲氧基苯巯基)嘌呤-9-基)-乙氧基]}甲膦 酸、恩替卡韦、torcitabine、 NM画107、 viramidine、禾U巴韦林、Racivir、 Amdoxovir、 MIV-210、 PSI-6130和PSI-6206的糖基结构中引入4-芳基-2-氧代-l，3，2-二氧杂磷杂环己烷基团的环状磷酸酯结构，制备成 具有肝靶向作用的前药。
环状磷酸酯(4-芳基-2-氧代-1，3,2-二氧杂磷杂环己烷)前药结构 中的4位芳基取代基能够被肝细胞中的细胞色素P450同功酶家族中 CYP3A特异性催化氧化，反应的结果是从4位开环生成一个带有单磷 酸负电荷的中间体，使其不易通过细胞膜而保留在细胞内，再经过磷 酸二酯酶催化水解、P-消除反应，释放出含有氧轔酸或碳嫌酸的药物， 继续被核苷酸激酶转化成具有生物活性的核苷三磷酸药物，而另一副 产物芳基乙烯酮快速与肝细胞中含量丰富抗氧化和自由基的谷胱甘 肽结合被清除，没有发现副作用。(J.Am.Chem.Soc. 2004,126:5154 陽5163; J. Pharmacol. Exp. Ther. 2005, 312:554-560; Curr Opin Investig Drugs. 2006， 7:109-117)。
本发明将以上抗病毒药物(母体药物)与小分子载体环状磷酸酯 结合得到一类具有肝靶向作用的环状磷酸酯前体药物，其对胃肠道、 血浆具有高稳定性，不易被体内酯水解酶水解，在给药后到达肝细胞 之前不会被代谢，在进入靶区被肝细胞中的CYP3A代谢后定位释放 出母体药物，使肝细胞内的药物浓度高于正常组织，与母体药物(如
7恩曲他滨)或其它非肝靶向前药(如替诺福韦酯)比，特别是对抗
HBV或HCV来说，具有疗效高、毒副作用小的优点。
发明内容
本发明的目的是提供一种疗效高、毒性低的肝靶向前体药物， 通过具有肝靶向作用的小分子载体将抗病毒药物定位释放于肝细 胞内，治疗和预防各种病毒感染的疾病。
本发明人经过研究发现，将母体药物恩曲他滨、替诺福韦、
LB80331、 LBS(B17、 (2-[2-氨基-6-(4-甲氧基苯巯基)嘌呤-9-基)-乙氧 基]}甲膦酸、恩替卡韦、torcitabine、丽-107、 viramidine、利巴韦林、 racivir、 Amdoxovir、 MIV-210、 PSI-6130和PSI-6206制备为具有肝乾 向作用的环状磷酸酯前体药物，其对胃肠道、血浆具有高稳定性， 不易被体内酯水解酶水解，在给药后到达肝细胞之前不会被代谢，在 进入乾区被肝细胞中的CYP3A代谢后定位释放出母体药物，因此可 以提高肝细胞内的药物浓度，增加疗效和减少毒副作用。此外将环 状磷酸酯化合物与酸反应制备成盐，可以增加该类化合物的水溶性， 通过提高化合物的水溶性，可改善其体内药代动力学性质，提高口服 生物利用度。
本发明提供通式I的化合物、或其所有可能的异构体、可药用 盐、水合物或溶剂化物
其中
Ri选自具有以下结构的基团:与上述基团a-o相对应的核苷类抗病毒化合物是 a:恩曲他滨(由Triangle公司开发)；k替诺福韦(由Gilead公 司开发)；c: (l-[p-氨基-嘌呤-9-基)-甲基]-环丙氧基〉甲膦酸(LB80331) 和d: {1-[(2-氨基-6-羟基-嘌呤-9-基)-甲基]-环丙氧基}甲膦酸(1^80317) (由LG Life Sciences公司开发)；e: {2-[2-氨基-6-(4-甲氧基苯巯基) 嘌呤-9-基)-乙氧基]}甲膦酸(由Mitsubishi-Lilly公司开发);f:恩替 卡韦(由百时美施贵宝公司开发)；g: Torcitabine和h: NM-107 (由 Idenix制药公司开发)；i: Viramidine (由Valeant公司研发);j:利 巴韦林(由Ribapharm公司开发)；k: Racivir (由Pharmasset公司开 发)；1: Amdoxovir (由RFS Pharma公司开发)；m: MIV-210 (由 Medivir AB公司开发);n: PSI-6130和o: PSI-6206 (由Pharmasset 公司开发)。
R2为独立选自氯、溴、氟、碘、硝基、羟基、氨基、氰基、CrC6 烷基、CrQ烷氧基、d-Q烷胺基、CLC6卣代烷基或烷酰基； X为独立选自邻、间或对位的氮或碳； n为0、 1、 2、 3、 4;
Rj与磷酸酯环结构中4位的芳香基团互为顺式或反式，优选顺式
异构体；
磷酸酯环结构中4位的碳原子具有手性，其构型可以是S或R-构 型，优选S-构型。
本发明还提供通式II的化合物、或其所有可能的异构体、可药用盐、水合物或溶剂化物
II
其中
R3选自具有以下结构的基团
<formula>formula see original document page 10</formula>
R2选自氯、溴、氟、碘、硝基、羟基、氨基、氰基、Cl6院基、 Cw烷氧基、d—6烷胺基、cl6卤代垸基或烷酰基；
X选自邻、间或对位的氮或碳； n为0、 1、 2、 3或4。
本发明还提供通式III的化合物、或其所有可能的异构体、可 药用盐、水合物或溶剂化物
<formula>formula see original document page 10</formula>
其中
R4选自具有以下结构的基团
<formula>formula see original document page 10</formula>
R2选自氯、溴、氟、碘、硝基、羟基、氨基、氰基、Cw烷基、Cw烷氧基、Cw烷胺基、CL6卣代烷基或烷酰基；
x选自邻、间或对位的氮或碳； n为0、 1、 2、 3或4。 优选的通式I化合物选自
(1 ) 5-氟-l-(2R，5S)-(2',4'-顺式-(4'S)-4'-[(3'-氯苯基)-2'-氧代 -1',3'，2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]氧甲基-1，3-氧硫环-5-酰}胞嘧啶
(2 ) 5-氟-l-(2R，5SH2',4'-反式-(4'S)-4'-[(3'-氯苯基)-2'-氧代 -1'，3',2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]氧甲基-1,3-氧硫环-5-酰}胞嘧啶
(3 ) 5-氟-l-(2R，5SH2'，4'-顺式-(4'S)-4'-[(4'-吡嚏基)-2'-氧代 -1',3'，2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]氧甲基-1,3-氧硫环-5-酰}胞嘧啶
(4 ) 5-氟-l-(2R，5SH2',4'-反式-(4'S)-4'-[(4'-吡啶基)-2'-氧代 -1'，3',2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]氧甲基-1,3-氧硫环-5-酰}胞嘧啶
(5 ) (2R)-9-(2-[(2R'，4S')-4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代-l',3'，2'-二氧杂磷 杂环己烷-2'-基]甲氧基丙基)腺P票呤
(6 ) (2R)-9-(2-[(2S',4R')-4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代-r,3',2'-二氧杂轔 杂环己烷-2'-基]甲氧基丙基)腺P票呤
(7 ) (2R)-9-(2-[4'-(3-氯苯基)-2'-氧代-l'，3'，2'-二氧杂磷杂环己烷 -2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤
(8 ) (2R)-9-(2-[4'-(苯基)-2'-氧代-l',3',2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-
基]甲氧基丙基}腺嘌呤
(9 ) (2R)-9-(2-[4'-(3'-溴苯基)-2'-氧代-l'，3',2'-二氧杂磷杂环己烷 -2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤
(10 )(2R)-9-(2-[4'-(3'-氟苯基)-2'-氧代-l'，3'，2'-二氧杂磷杂环己烷 -2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤
(11 )(2R)-9-(2-[4'-(3'，5'-二氟苯基)-2'-氧代-l',3',2'-二氧杂磷杂环 己烷-2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤
(12) (2R)-9-(2-[4'-(2',3'-二氯苯基)-2'-氧代-1'，3',2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基丙基)腺嘌呤
(13 )(2R)-9-(2-[4'-(4'-吡啶基)-2'-氧代-l'，3'，2'-二氧杂磷杂环己烷 -2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤
(14)(2R)-9-(2-[4'-(3',5'-二甲苯基)-2'-氧代-l',3',2'-二氧杂磷杂环 己烷-2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤
(15 )(2R)-9-(2-[4'-(3'，5'-二氯苯基)-2'-氧代-l',3'，2'-二氧杂磷杂环 己垸-2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤
(16 )2-氨基-9-{2-[4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代-1'，3',2'-二氧杂磷杂环己 烷-2'-基]甲氧基-2-乙撑基乙基}嘌呤
(17 )2-氨基-9-(2-[(2R'，4S')-4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代-l',3'，2'-二氧杂 磷杂环己烷-2'-基]甲氧基-2-乙撑基乙基}嘌呤
(18 )2-氨基-9-(2-[(2S'，4R')-4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代-l',3',2'-二氧杂 磷杂环己烷-2'-基]甲氧基-2-乙撑基乙基}嘌呤
(19) 2-氨基-6-羟基-9-{2-[4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代-1',3',2'-二氧杂 磷杂环己烷-2'-基]甲氧基-2-乙撑基乙基}嘌呤
(20 ) 2-氨基-6-羟基-9-{2-[(2R',4S')-4'-(3'-氯苯基)-2'画氧代 -1',3'，2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基-2-乙撑基乙基}嘌呤
(21 ) 2-氨基-6-羟基-9-(2-[(2S',4R')-4'-(3'-二氯苯基)-2'-氧代 -1',3',2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基-2-乙撑基乙基}嘌呤
(22 ) 2-氨基-6-对甲氧基苯巯基-9-{2-[4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代 -1',3'，2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基乙基}嘌呤
(23 ) 2_氨基-6_对甲氧基苯巯基-9_{2-[(211'，48')-4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代-1',3'，2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基乙基}嘌呤
(24 )2-氨基-6-对甲氧基苯巯基-9-(2-[(2S', 4R')-4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代-1'，3',2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基乙基}嘌呤
(25 )2-氨基-l,9-二氢-9-[(lS，3R,4S)-4-羟基-3-(2'，4'-顺式-(4'S)-4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代-1'，3',2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基傳甲基-2-亚甲基环戊烷]-6H-嘌呤-6-酮。
及其所有可能的异构体、可药用盐、水合物或溶剂化物。
本发明还提供通式I所示化合物合适的可药用的盐、水合物或 溶剂化物，其中可药用的盐包括但并不限于通式I化合物与无机酸 如盐酸、硫酸、磷酸、亚磷酸、氢溴酸和硝酸所成的盐以及与各 种有机酸，如马来酸、苹果酸、延胡索酸、琥珀酸、酒石酸、柠 檬酸、乙酸、乳酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、棕榈酸等所成的盐。 本发明化合物可与碱如钠、钾、镁、钩、锂等反应形成可药用盐。 本发明中的 一 些化合物可能用水或各种有机溶剂结晶或重结晶， 在这种情况下，可能形成各种溶剂化物。本发明包括那些化学计 量的溶剂化物，包括水合物，也包括在用低压升华干燥法制备时 形成的包含可变量水的化合物。
本发明还涉及通式I化合物的各种异构体。本发明化合物的异 构体包括互变异构体、顺反异构体、构象异构体、内消旋化合物和具 有对映或非对映关系的光学异构体。
本发明中化合物可能以顺反异构体、光学异构体或互变异构 体的形式存在，本发明包括其所有存在形式，特别是纯异构体的
构体分离或拆分开，或者某种异构体可以各种常规的合成方法或 立体专一或不对称合成的方法得到。既然通式I化合物是以药用为
目的，可以理解它们最好以纯的形式提供，例如至少60%的纯度， 更合适的75%，更好的85%,最好至少98%的纯度(％是指重量百 分比)。不纯化合物的制备方法可用来用于药用组合物中更纯的形 式。这些不够纯的产物中至少含有1%,更适合的5%,更好的至少 10%的如通式1所示的化合物或其可药用的衍生物。
本发明还提供制备通式I化合物或其可药用的盐、水合物或溶
剂化物的制备方法，下面针对通式i亚结构(通式n和通式ni)分别加以描述，其中Ri、 R2、 R3、 R4、 X和n具有如上所述的定义。
1.通式n化合物的制备方法如下
在N, N-二甲基甲酰胺溶液中，加入R3CH20H、 4S-亚磷酰胺衍生物和5-甲硫基四氮唑，冷却至零下45。C，缓慢滴加过氧化叔丁醇，反应lh后，升温至室温再反应24h，减压蒸除溶剂，硅胶柱层析得到顺式和反式的通式II化合物。
f。丫酬2 f乂〉 厂X、
R3^^0H+ 1. 5-(methylthio)-1H-tetrazole V=^(R2)n 〈—々
丫、n t ^ 、J(R2)n
C、 2. tert-butylhydroperoxide 、。 i,'''' p'、 \\ ,。、
jr(R2)n 、0^ O—P、〉
X=CH,N X=CH,N X=CH,N
2.通式III化合物的制备方法如下方法1:
在N, N-二甲基甲酰胺溶液中，加入R4OCH2PO(OH)2、 1,3-丙二醇衍生物、1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯和l-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐，室温搅拌30min,升温至100'C左右反应24h，反应完毕。将反应液溶于乙酸乙酯，依次用杼檬酸、碳酸氢钠、水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸
除溶剂，硅胶柱层析，得到通式m化合物。
陶n f《
n 。、、 ，OH HO、 广^ EDCHCI, DMF n
R4,0^P\+ HO >~<f、x _^ R4-0\ 0^0^^ ,n
OH ^~~/ V_^A ^""、 )
X=CH,N X=CH,N
方法2:
将R4OCH2PO(OH)2、 N, N-二乙基甲酰胺加入到二氯甲烷溶液中，缓慢滴加草酰氯，再加热至回流反应3h。将反应液冷却至-78匸，依次加入三乙胺、R或S-3-芳基-l，3-丙二醇，反应lh后缓慢升温至0。C后再反应lh，滴加三氟乙酸，搅拌30min后加热回流反应2h,反应完毕。加入碳酸钠冰水溶液中和，有机层水洗至中性，无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸除溶剂，硅胶柱层析，得到
通式m化合物。
14<formula>formula see original document page 15</formula>
申请人发明了一种"一锅烩"合成通式III的制备方法(方法2):将替诺福韦(LB80331、 LBS(BH或(2-[2-氨基-6-(4-甲氧基苯巯基)嘌呤_9_基)_乙氧基]}甲膦酸)，先后与N，N-二乙基甲酰胺、草酰氯反应后，加入3-芳基-l,3-丙二醇制备4-芳基-2-氧代-l，3，2-二氧杂磷杂环己烷衍生物，再用三氟醋酸水解，得到通式ni化合物。该方法与专利CN1964967公开的环状磷酸酯合成方法比，合成步骤少、操作简单、收率高、节约环保，应用这种新方法制备了一类环状磷酸酯前体药物。
关于制备通式I化合物更详尽的资料见实施例。
本发明还提供一种药用组合物，包含通式I化合物，或其异构体、可药用盐、水合物或溶剂化物和可药用辅助剂、稀释剂或载体。
本发明的通式I的化合物或其可药用的盐可以单独使用，或与可药用的载体或赋形剂一起以药物组合物的形式使用，当以药物组合物的形式使用时，通常将有效剂量的本发明通式I化合物或其可药用盐或水合物以及一种或多种可药用载体或稀释剂结合制成适当的施用形式或剂量形式，这一程序包括通过合适的方式将组分混合、粒化、压缩或溶解。因此，本发明提供了药物组合物，它包含通式I的化合物、其所有可能的异构体、前药、可药用盐、溶剂化物或水合物以及至少一种可药用的载体。
本发明化合物的药物组合物，可以以下方面的任意方式施与口服、喷雾吸入、直肠给药、鼻腔给药、阴道给药、局部给药、非肠道给药如皮下、静脉、肌内、腹膜内、鞘内、心室内、胸骨内或颅内注射或输入，或借助一种外植的储器用药，其中优选口服、肌注、腹膜内或静脉内用药方式。另外，为使本发明化合物或含有它的药物组合物有效治疗中枢神经系统疾病，可优选心室内途径用药可克服化合物可能低的血脑屏障透过率。本发明化合物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药。给药剂型可以是液体剂型、固体剂型。液体剂型可以是真溶液类、胶体类、微粒剂型、乳剂剂型、混悬剂型。其他剂型例如片剂、胶囊、滴丸、气雾剂、丸剂、粉剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、栓剂、冻干粉针剂、包合物、埋植剂、贴剂、擦剂等。
本发明的药物组合物中还可以含有常用的载体，这里所述可
药用载体包括但不局限于离子交换剂，氧化铝，硬脂酸铝，卵磷脂，血清蛋白如人血清蛋白，缓冲物质如磷酸盐，甘油，山梨酸，山梨酸钾，饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物，水，盐或电解质，如硫酸鱼精蛋白，磷酸氢二钠，磷酸氢钾，氯化钠，锌盐，胶态氧化硅，三硅酸镁，聚乙烯吡咯烷酮，纤维素物质，聚乙二醇，羧甲基纤维素钠，聚丙烯酸酯，蜂蜡，羊毛酯等。载体在药物组合物中的含量可以是1重量％-98重量％，通常大约占到80重量％。为方便起见，局部麻醉剂，防腐剂，缓冲剂等可直接溶于载体中。
口服片剂和胶囊可以含有赋形剂如粘合剂，如糖浆，阿拉伯胶，山梨醇，黄芪胶，或聚乙烯吡咯烷酮，填充剂，如乳糖，蔗糖，玉米淀粉，磷酸钙，山梨醇，氨基乙酸，润滑剂，如硬脂酸镁，滑石，聚乙二醇，硅土，崩解剂，如马铃薯淀粉，或可接受的增润剂，如月桂醇钠硫酸盐。片剂可以用制药学上公知的方法包衣。
口服液可以制成水和油的悬浮液，溶液，乳浊液，糖浆或酏剂，也可以制成干品，用前补充水或其它合适的媒质。这种液体制剂可以包含常规的添加剂，如悬浮剂，山梨醇，纤维素甲醚，葡萄糖糖浆，凝胶，羟乙基纤维素，羧甲基纤维素，硬脂酸铝凝胶，氢化的食用油脂，乳化剂，如卵磷脂，山梨聚醣单油酸盐，
16阿拉伯树胶；或非水载体(可能包含可食用油)，如杏仁油，油脂
如甘油，乙二醇，或乙醇；防腐剂，如对羟基苯甲酸甲酯或丙酯，
山梨酸。如需要可添加调味剂或着色剂。
栓剂可包含常规的栓剂基质，该赋形剂在室温下呈固体状态， 而在体温下熔化释出药物，如可可脂，其它甘油酯或蜂蜡。
对胃外投药，液态剂型通常由化合物和一种消毒的载体制成。 载体首选水。依照所选载体和药物浓度的不同，化合物既可溶于 载体中也可制成悬浮溶液，在制成注射用溶液时先将化合物溶于 水中，过滤消毒后装入封口瓶或安瓿中。
当皮肤局部施用时，本发明化合物可以制成适当的软膏，洗 剂，或霜剂的形式，其中活性成分悬浮或溶解于一种或多种的载
体中。其中软膏制剂可以使用的载体包括但不局限于矿物油，
液体凡士林，白凡士林，丙二醇，聚氧化乙烯，聚氧化丙烯，乳
化蜡和水；洗剂和霜剂可使用的载体包括但不限于矿物油，脱 水山梨糖醇单硬脂酸酯，吐温60,十六烷酯蜡，十六碳烯芳醇， 2-辛基十二烷醇，节醇和水。
依据给药方式的不同，组分中可以含有重量比0.1%,或更合 适的重量比10-60%的活性组分。但组分中包含单位剂量时，每个 单位最好包含1-500亳克活性成分。
另外需要指出，本发明化合物针对不同患者的特定使用剂量 和使用方法决定于诸多因素，包括患者的年龄，体重，性别，自 然健康状况，营养状况，化合物的活性强度，服用时间，代谢速 率，病症的严重程度以及诊治医生的主管判断。这里优选使用剂 量介于0.01 - 100 mg/Kg体重/天。
必须认识到，通式I化合物的最佳给药剂量和间隔是由化合物 性质和诸如给药的形式、路径和部位等外部条件决定的，而这一 最佳给药剂量可用常规的技术确定。同时也必须认识到，最佳的疗程，即通式I化合物在额定的时间内每日的剂量，可用本领域内 公知的方法确定。
本发明进一步提供了本发明化合物，或其异构体、可药用盐、水 合物或溶剂化物在用于制备治疗和/或预防急性和慢性HBV或HIV或
HCV或HCMV感染引起的疾病的药物中的应用，所述药物用于治疗 和预防病毒引起的疾病。所述疾病包括但不局限于如下疾病HBV、 HCV、 HIV和HCMV等疾病。
具体实施例方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。 化合物的熔点由RY-1熔点仪测定，温度计未较正。质谱由
Micromass ZabSpec质谱仪测定。'H-NMR由JNM-ECA-400超导
NMR仪测定，工作频率！H-NMR 400 MHz。
实施例1 5-氟-1-(211,58)- (2',4'-顺式-(4'S)-4'-[(3'-氯苯基)-2'-氧代 -1'，3'，2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]氧甲基-1,3-氧硫环-5-酰}胞嘧^^的制
备
在N, N-二甲基甲酰胺(30ml)溶液中，加入FTC(741.6mg, 3.0 mmol)、 48-4-(3-氯苯基)-^^二异丙基-1,3,2-二氧杂磷杂环己烷-2-胺(1.45 g，4.5 mmol)和5-甲硫基四氮唑(527 mg，4.5 mmol)，冷却至 零下45 'C，缓慢滴加过氧化叔丁醇，反应lh后，升温至室温再反 应24h,减压蒸除溶剂，硅胶柱层析，用甲醇:二氯甲烷=1:18洗脱， 得到0.30 g白色粉末状固体，收率21.0 %,熔点98-100 。C, R产0.38(甲醇二氯甲烷4:9)。 iHNMR (400 MHz, DMSO)， S(ppm): 1.98陽2.45(m, 2H)， 2.91- 3.22(m, 1H)， 3.20-3.47 (m, 1H), 4.19-4.62 (m, 4H)， 5.21-5.60 (m, 2H)， 6.16-6.32 (m，lH ), 7.20-7.5l(m, 4H)， 8.22 (S， 1H); ESI-MS: 478.0(M+l)。
实施例2 5-氟-l-(2R，5S)- (2',4'-反式-(4'S)-4'-[(3'-氯苯基)-2'-氧代 -1',3',2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]氧甲基-1，3-氧硫环-5-酰}胞嗜嚏的制
18备
釆用与实施例l完全相同的方法制备，得到0.25 g白色粉末状固
体，收率17,5%，熔点92-94 。C, R产0.42(甲醇二氯甲烷二l:9)。 'HNMR (400 MHz， DMSO), S(ppm): 2.01-2.48 (m, 2H), 2.89- 3.25(m, 1H)， 3.20- 3.49 (m, 1H)， 4.09 -4.68 (m, 4H), 5.22-5.59(m, 2H)， 6.18-6.30 (m，lH)，7.20隱7.51(m,4H)，8.22(S， 1H); ESI-MS: 478.0(M+l)。 实施例3 5-氟-l-(2R，5S)- {2',4'-顺式-(4'S)-[4'-(4'-吡啶基)-2'-氧代 -1',3'，2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基}氧甲基-1，3-氧硫环-5-酰]胞嘧啶的制 备
釆用与实施例1类似的方法制备，将FTC(741.6 mg， 3.0 mmol)、 4S-4-(4-吡啶基)-N,N- 二异丙基-1,3，2- 二氧杂磷杂环己烷-2-胺(1.27 g,4.5 mmol)和5-甲硫基四氮唑(527 mg,4.5 mmol)反应，得到0.28 g 棕色粉末状固体，收率21.0 %， R产0.40 (甲醇二氯甲烷=1:6)。 'HNMR (400 MHz， DMSO)， S(ppm): !HNMR(權MHz， DMSO), 5(ppm): 2.01-2.38 (m， 2H)， 2.91-3.26(m， 1H)， 3.22-3.50 (m， 1H), 4.10 -4.67 (m, 4H)， 5.20-5.63 (m, 2H), 6,19-6.35 (m,lH ), 7.34(d, J =9.6 Hz， 2H)， 8.24 (s, 1H), 8.56 (d， J =9.6 Hz， 2H) ; ESI隱MS: 445単+1)。 实施例45-氟-1-(2R,5S)- {2',4'-反式_(4'S)-4'-[(4'-吡啶基)-2'-氧代 -1',3',2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]氧甲基-1,3-氧硫环-5-酰}胞嘧^^的制 备
釆用与实施例3完全相同的方法制备，得到0.23 g棕色粉末状固 体，收率17.2%， R产0.45 (甲醇二氯甲烷=1:6)。 'HNMR (400 MHz, DMSO), 5(ppm): 1.95-2.30 (m, 2H)， 2.90-3.27(m, 1H), 3.25-3.56(m, 1H)， 4.08-4.69 (m, 4H), 5.17-5.63 (m, 2H)， 6.22-6.34 (m，lH )， 7,34(d, J =9.6 Hz, 2H)， 8,24 (s， 1H)， 8.56 (d, J =9,6Hz, 2H); ESI-MS: 445.1(M+l)。 实施例5 (2R)-9-(2-[(2R',4S')-4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代-l',3',2'-二氧杂 磷杂环己烷-2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤的制备将(R)-9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]-腺嘌呤(2.87g， lOmmol)、 N， N-二乙基甲酰胺(1.01 g, lOmmol)加入到250 ml二氯甲烷溶液 中，在无水无氧的条件下，缓慢滴加草酰氯(3.81 g, 30mmo1)，再 加热至回流反应3h，然后将反应液冷却至-78'C,依次加入三乙胺 (6.06g, 60mmo1)、 S-3隱(3画氯苯基)-l,3-丙二醇(1.87 g, lOmmol)， 反应lh后缓慢升温至O 。C后再反应lh,滴加8.0g三氟乙酸，搅拌 30min后加热回流反应2h,反应完毕。加入碳酸钠冰水溶液中和， 有机层水洗至中性，无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸除溶剂，硅 胶柱层析，用甲醇:二氯甲烷^:20洗脱，得到1.84g黄色粉末状固体， 收率42.0%，熔点卯-92 。C，R产0.40(甲醇二氯甲烷4:10) HNMR (400 MHz， DMSO)， S(ppm): 1.16 d， (d, 3H), 1.75-2.04 (m, 2H), 3.45-3.96(m， 3 H)， 4.05-4.26 (m, 1H)， 4.26- 4.55 (m， 3H)， 5,57 (m，lH), 7.19-7.43 (m， 4H), 8.07 (s, 1H), 8.12 (s, 1H); ESI-MS: 438.1(M+l)。 实施例6 (2R)-9-(2-[(2S'，4R')-4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代-l'，3'，2'-二氧杂 磷杂环己垸-2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤的制备
采用与实施例5类似的方法制备，将(R)-9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]-腺嘌呤(2.87g， lOmmol)、 N， N-二乙基甲酰胺(1.01 g, lOmmol)、 草酰氯(3.81g, 3Ommo1),三乙胺(6.06g， 60 mmol )、 R-3誦(3-氯 苯基)-1,3-丙二醇(1.87 g, 10 mmol)、滴加8.0 g三氟乙酸反应，得 到1.3 4g黄色粉末状固体，收率30.6%，熔点88-90 °C , R尸0.40(甲 醇二氯甲烷=1:10)。 'HNMR (400 MHz， DMSO)， 5(ppm): 1.18 (d， 3H), 1.75-2.04 (m, 2H)， 3.40陽3.96(m， 3 H)， 4.05-4.25 (m， 1H)， 4.26- 4.58 (m， 3H), 5.57 (m,lH), 7.19-7.47 (m, 4H), 8.07 (s， 1H), 8.10 (s, 1H); ESI-MS: 438.1(M+l)。
实施例7 (2R)-9-(2-[4'-(3-氯苯基)-2'-氧代-l',3',2'-二氧杂磷杂环己烷 -2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤的制备
在20mlN, N-二甲基甲酰胺溶液中,加入(R)-9-[2-(膦酰甲氧
20基)丙基]-腺嘌呤(0.57 g， 2 mmol )、 3-(3-氯苯基)-l,3-丙二醇(0.37 g， 2mmo1)、 1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(0.46g， 3 mmol)和 l-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(0.38g， 2mmo1)， 室温搅拌30min，升温至IOO 。C左右反应24h,反应完毕。将反应 液溶于乙酸乙酯，依次用10%柠檬酸、4%碳酸氢钠溶液、水、饱 和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，硅胶柱层析， 得到0.40g黄色粉末状固体，收率45.6%,熔点87-89 。C，R产0.40(甲 醇二氯甲烷=1:10)。 tHNMR(400MHz，DMSO), S(ppm): 1.12-1.22(m, 3H)， 1.78-2.10 (m, 2H), 3.36-4.86 (m, 7H), 5.20-5.60 (m,lH)， 7.09-7.47 (m， 4H)， 8,05-8.20 (s， 2H); ESI陽MS: 438.1 (M+l)。 实施例8 (211)-9-{2-[4'-(苯基)-2'-氧代-1',3'，2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤的制备
釆用与实施例7类似的方法制备，将(R)-9-[ 2-(膦酰甲氧基)丙基]-腺嘌呤(0.57g, 2mmo1)、 3-苯基-1,3-丙二醇(0.30 g, 2 mmol)、 1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(0.46g， 3 mmol)和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(0.38g, 2mmo1)反应完毕， 得到0.30 g粉末状固体，收率37.5 %。 ！丽^411(400 MHz, DMSO)， 5(ppm): 1.10-1.21 (m， 3H)， 1.78-2.20 (m， 2H), 3.36-4.卯(m, 7H)， 5.22-5.60 (m，lH), 7.09-7,40 (m, 5H)， 8.05-8.25 (s, 2H); ESI-MS: 歡1(M+1)。
实施例9 (2R)-9-(2-[4'-(3'-溴苯基)-2'-氧代-l',3'，2'-二氧杂磷杂环己 烷-2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤的制备
采用与实施例7类似的方法制备，将(R)-9-[ 2-(膦酰甲氧基)丙基]-腺嘌呤(0.57g, 2mmo1)、 3-(3-溴苯基)-l,3-丙二醇(0.46 g， 2 mmol)、 1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(0.46 g, 3 mmol)和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(0.38g, 2mmo1)反应完毕， 得到0.38 g粉末状固体，收率36.6 %。 ！HNMR(400 MHz, DMSO),
21S(ppm): 1.13-1.25 (m, 3H), 1.75-2.20 (m, 2H)， 3.36-4.95(m， 7H),5.22-5.50 (m,lH), 7.04-7.60 (m, 4H), 8.05-8.20 (s, 2H); ESI-MS:做1(M+1)。
实施例IO (2R)-9-(2-[4'-(3'-氟苯基)-2'-氧代-l'，3',2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤的制备
釆用与实施例7类似的方法制备，将(R)-9-[ 2-(膦酰甲氧基)丙基]-腺嘌呤(0.57g， 2mmo1)、 3-(3-氟苯基)-1,3-丙二醇(0.34 g, 2 mmol)、1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(0.46 g, 3 mmol)和l-乙基-(3曙二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(0.38 g， 2mmo1)反应完毕，得到0.26 g粉末状固体，收率30.9 %。 }11]^[11(400 MHz, DMSO)，S(ppm): 1.10-1.25 (m， 3H)， 1.65-2.23 (m， 2H)， 3.32-4.96(m, 7H)，5.16-5.40 (m,lH), 7.00-7.48 (m, 4H), 8.02-8,19 (s， 2H); ESI-MS:422.1(M+l)。
实施例ll (2R)-9-(2-[4'-(3'，5'-二氟苯基)-2'-氧代-l',3'，2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤的制备
釆用与实施例7类似的方法制备，将(R)-9-[ 2-(膦酰甲氧基)丙基]-腺嘌呤(0.57g, 2 mmol)、 3-(3,5-二氟苯基)-1,3-丙二醇(0.38 g, 2mmol)、 1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(0.46g, 311111101)和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(0.38g, 2mmo1)反应完毕，得到0.22 g粉末状固体，收率25.0 %。 1HNMR(400 MHz，DMSO)， S(ppm): 1.10-1.28 (m, 3H), 1.60-2.24(m, 2H), 3.36-4.98 (m， 7H)，5.06醫5.49(m,lH), 6.74-7.20 (m，3H), 7.80-8.40 (s，2H); ESI-MS: 440.1(M+l)。
实施例12 (2R)-9-(2-[4'-(2'，3'-二氯苯基)-2'-氧代-l'，3',2'-二氧杂璘杂环己烷-2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤的制备
釆用与实施例7类似的方法制备，将(R)-9-[ 2-(膦酰甲氧基)丙基]-腺嘌呤(0.57g, 2mmo1)、 3-(2，3-二氯苯基)-1,3-丙二醇(0.44 g, 2
22mmol)、 1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(0.46g, 3mmol)和l隱乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(0.38g， 2mmo1)反应完毕，得到0.31 g粉末状固体，收率32.8 %。 1HNMR(400 MHz，DMSO)，5(ppm): 1.11-1.30 (m, 3H), 1.62-2.20(m, 2H)， 3.35-4.97 (m， 7H):5.26-5.89 (m,lH)， 7,05-7.65 (m， 3H), 8.05-8.20 (s， 2H); ESI-MS: 472,1(M+l)。
实施例13 (2R)-9-(2-[4'-(4'-吡啶基)-2'-氧代-l',3'，2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤的制备
釆用与实施例7类似的方法制备，将(R)-9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]-腺嘌呤(0.57 g， 2 mmol )、 3-(4-吡啶基)-l，3-丙二醇(0.31 g， 2 mmol)、1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(0.46g, 3 mmol)和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(0.38g， 2mmo1)反应完毕，得到0.22 g粉末状固体，收率27.2 %。 'HNMR(400 MHz, DMSO),S(ppm): 1.08-1.28 (m， 3H), 1.65陽2.24(m, 2H), 3.38-5.04(m， 7H)，5.20-5.62 (m，lH)， 7.08-7.38 (m, 2H), 8.04-8.60 (s， 4H); ESI-MS: 405.1(M+l)。
实施例14 (2R)-9-(2-[4'-(3'，5'-二甲苯基)-2'-氧代-l',3'，2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤的制备
采用与实施例7类似的方法制备，将(R)-9-[ 2-(膦酰甲氧基)丙基]-腺嘌呤(0.57g, 2mmo1)、 3-(3,5-二甲苯基)-l,3-丙二醇(0.36 g, 2mmol)、 1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(0.46g, 3mmol)#l-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(0.38g, 2mmo1)反应完毕，得到0.28 g粉末状固体，收率32.5 %。 iHNMR(400 MHz,DMSO)， S(ppm): 1.08-1.28 (m, 3H), 1.65隱2.34(m， 8H)， 3.46-4.95 (m, 7H)，5.05 -5.45 (m，lH), 6.75-7.30(m， 3H)， 8.00-8.20 (s， 2H); ESI-MS: 432.2(M+l)。
实施例15 (2R)-9-(2-[4'-(3',5'-二氯苯基)-2'-氧代-l',3',2'-二氧杂磔杂环己烷-2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤的制备
采用与实施例7类似的方法制备，将(11)-9-[2-(膦酰甲氧基)丙基]-腺嘌呤(0.57g， 2mmo1)、 3-(3，5-二氯苯基)-l，3-丙二醇(0.44 g， 2mmol)、 1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(0.46g, 3mmol)和l-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(0.38 g， 2mmo1)反应完毕，得到0.38 g粉末状固体，收率40.2 %。 "HNMR(400 MHz，DMSO)， 5(ppm): 1.10-1.28 (m, 3H), 1.70-2.26(m, 2H)， 3.46-5.04(m, 7H),5.20-5.46 (m，lH)， 7.28-7.58 (m，3H)， 8.02-8.25 (s，2H); ESI-MS: 472.1(M+l)。
实施例16 2-氨基-9-{2-[4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代-1'，3',2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基-2-乙撑基乙基}嘌呤的制备
釆用与实施例7类似的方法制备，将{1-[(2-氨基-嘌呤-9-基)-甲基]-环丙氧基}甲膦酸(0.60g, 2mmo1)、 3-(3-氯苯基)-l,3-丙二醇(0.44g, 2mmo1)、 1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(0.46g， 3 mmol)和l-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(0.38g， 2mmo1)反应完毕，得到0.48 g粉末状固体，收率53.5%。 1HNMR(400 MHz,DMSO)， 5(ppm): 0.83画1.16(m， 4H), 1.78-2.20 (m， 2H), 3.66-4.86 (m， 6H):5.20-5.60 (m，lH)， 7.09-7.47 (m, 4H), 8.05 (s， 1H), 8.70 (s, 1H); ESI-MS:450.1 (M+l)。
实施例17 2-氨基-9-(2-[(2R'，4S')-4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代-l',3'，2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基-2-乙撑基乙基}嘌呤的制备
采用与实施例5类似的方法制备，将(R)-9-[ 2-(膦酰甲氧基)丙基]-腺喋呤(2.99g, lOmmol)、 N, N-二乙基甲酰胺(1.01 g, lOmmol)、草酰氯(3.81g， 30mmo1)，三乙胺(6.06 g， 60 mmol )、 S-3画(3-氯苯基H,3-丙二醇(1.87 g, 10 mmol)、滴加8.0 g三氟乙酸反应，得到1.04 g黄色粉末状固体，收率23.2%。 iHNMR(400MHz，DMSO)，S(ppm): 0.84-1.16(m， 4H), 1,76-2.23 (m, 2H), 3.64-4.96 (m, 6H)，5.28-5.60 (m，lH), 7.06-7.48 (m, 4H)， 8.01 (s, 1H)， 8.68 (s， 1H); ESI-MS: 450.1 (M+l)。
实施例18 2-氨基-9-(2-[(2S',4R')-4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代-l'，3'，2'-二氧 杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基-2-乙撑基乙基}嘌呤的制备
釆用与实施例5类似的方法制备，将(R)-9-[ 2-(膦酰甲氧基)丙基]-腺卩票呤(2.99g， lOmmol)、 N， N-二乙基甲酰胺(1.01 g， lOmmol)、 草酰氯(3.81g， 30mmo1)，三乙胺(6.06 g， 60 mmol )、 R-3-(3-氯 苯基)-1,3-丙二醇(1.87 g， 10 mmol)、滴加8.0 g三氟乙酸反应，得 到1.24 g黄色粉末状固体，收率27.6 %。 ！HNMR(400 MHz, DMSO)， S(ppm): 0.90-1.12(m， 4H)， 1.78-2.22 (m， 2H)， 3.66-4.88 (m， 6H), 5.30-5.63 (m，lH)， 7.08-7.50 (m， 4H), 8.02 (s， 1H), 8.70 (s， 1H); ESI-MS: 450.1 (M+l)。
实施例19 2-氨基-6-羟基-9-{2-[4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代-1',3'，2'-二氧 杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基-2-乙撑基乙基}嘌呤的制备
釆用与实施例7类似的方法制备，将{1-[(2-氨基-6-羟基-嘌呤-9-基)-甲基]-环丙氧基}甲膦酸(0.63g, 2mmo1)、 3-(3-氯苯基)-l,3-丙 二醇(0.44g, 2mmo1)、 1，8-二氮杂双环[5.4.0]十 一碳-7-烯(0.46 g， 3mmo1)和l-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(0.38 g， 2 mmol )反应完毕，得到0.18 g粉末状固体，收率19.3 %。 iHNMR(400 MHz, DMSO), S(ppm): 0.82-1.18(m， 4H)， 1.76-2.25 (m, 2H)， 3.68-4.88 (m, 6H)， 5.20-5.61(m，lH)， 7.06-7.50(m, 4H)， 8.05 (s， 1H) ; ESI-MS: 466.1 (M+l)。
实施例202-氨基-6-羟基-9-{2-[(2R'，4S')-4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代
-1'，3',2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基-2-乙撑基乙基}嘌呤的制备
采用与实施例5类似的方法制备，将{1-[(2-氨基-6-羟基-嘌呤-9-基)-甲基]-环丙氧基}甲膦酸(3.15g， lOmmol)、 N, N-二乙基甲酰 胺(1.01g， lOmmol)、草酰氯(3.81g， 30 mmol)，三乙胺(6.06g,
2560mmol)、 S-3-(3-氯苯基)-l,3-丙二醇(l.87 g, lOmmol)、滴加8.0g 三氟乙酸反应，得到0.46 g黄色粉末状固体，收率9.9 % 。 iHNMR(400 MHz, DMSO)， S(ppm): 0.80-1.12(m, 4H)， 1.77-2.23(m, 2H), 3.62-4.98 (m， 6H), 5.23画5.65(m,lH), 7.09-7.51(m， 4H), 8.04(s, 1H) ; ESI陽MS: 466.1 (M+l)。
实施例21 2-氨基-6-羟基-9- {2- [(2S',4R')-4 '-(3'- 二氯苯基)-2'-氧代 -1'，3'，2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基-2-乙撑基乙基}嘌呤的制备
釆用与实施例5类似的方法制备，将{1-[(2-氨基-6-羟基-嘌呤-9-基)-甲基]-环丙氧基}甲膦酸(3.15g, lOmmol)、 N, N-二乙基甲酰 胺(1.01g, lOmmol)、草酰氯(3.81g， 30 mmol),三乙胺(6.06g, 60mmo1)、 R-3-(3-氯苯基)-l,3-丙二醇(1.87 g, lOmmol)、滴加8,0g 三氟乙酸反应，得到0.51 g黄色粉末状固体，收率10.1%。 'HNMR (400 MHz, DMSO)， S(ppm): 0.87-1.20(m, 4H)， 1.74-2.21 (m, 2H)， 3.65-4.96 (m, 6H)， 5.26-5.67(m,lH), 7,06画7.49(m， 4H)， 8.04(s， 1H); ESI-MS: 466,1 (M+l)。
实施例22 2-氨基-6-对甲氧基苯巯基-9-{2-[4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代 -1',3',2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基乙基}嘌呤的制备
釆用与实施例7类似的方法制备，将{2-[2-氨基-6-(4-甲氧基苯巯 基)嘌呤-9-基)-乙氧基]}甲膦酸(0.82 g， 2 mmol )、 3-(3-氯苯基)-1，3-丙二醇(0.44g， 2mmo1)、 1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(0.46 g, 3mmo1)和l-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(0.38 g, 2mmol)反应完毕，得到0.38g粉末状固体，收率33.9%。 1HNMR (400 MHz, DMSO)， S(ppm): 1.70-2.10 (m， 2H), 3.36-4.86 (m， 11H), 5.20-5.60 (m,lH), 6.95-8.06(m， 9H) ; ESI-MS: 562.1 (M+l)。 实施例23 2-氨基-6-对甲氧基苯巯基-9-{2-[(2R'，4S')-4'-(3'-氯苯 基)-2'-氧代-1'，3'，2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基乙基}嘌呤的制备
采用与实施例5类似的方法制备，将{2-[2-氨基-6-(4-甲氧基苯巯基)嘌呤-9-基)-乙氧基]}甲膦酸(4.11 g, lOmmol)、 N, N-二乙基 甲酰胺(1.01 g， lOmmol)、草酰氯(3.81 g， 30mmo1),三乙胺(6.06 g， 60mmo1)、 S-3-(3-氯苯基)-l，3-丙二醇(1.87g, 10 mmol)、滴加 8.0 g三氟乙酸反应，得到0.93 g黄色粉末状固体，收率16.6%。 'HNMR (400 MHz， DMSO), 5(ppm): 1.73-2.16 (m， 2H)， 3.38-4.80 (m， 11H)， 5.20-5.62 (m，lH), 6.90画8.08(m， 9H); ESI-MS: 562.1 (M+l)。 实施例242-氨基-6-对甲氧基苯巯基-9-{2-[(2S'，4R')-4'-(3'-氯苯 基)_2'-氧代-1',3',2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基乙基}嘌呤的制备 采用与实施例5类似的方法制备,将{2-[2-氨基-6-(4-甲氧基苯巯基) ff呤-9-基)-乙氧基]}甲膦酸(4.11 g， lOmmol)、 N， N-二乙基甲酰 胺(1.01g， lOmmol)、草酰氯(3.81g, 3Ommo1)，三乙胺(6.06g， 60mmo1)、 R-3画(3-氯苯基)-l,3-丙二醇(1.87 g, lOmmol)、滴加8.0 g 三氟乙酸反应，得到1.03 g黄色粉末状固体，收率18.4%。 'HNMR (400 MHz, DMSO)， 5(ppm): 1.72-2.19(m， 2H), 3.40扁4.87(m， IIH)， 5.22-5,60 (m,lH)，6.91-8.08(m,9H); ESI-MS: 562.1 (M+l)。 实施例252-氨基-1,9- 二氢-9-[(lS，3R，4S)-4-羟基-3-(2',4'-顺式 -(4'S)-4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代-r,3'，2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基)氧甲基 -2-亚甲基环戊烷]-6H-喋呤-6-酮的制备
釆用与实施例1类似的方法制备，将entecavir( 1.664 g, 6.0 mmol)、 4S-4-(4-吡啶基)-N，N-二异丙基-l，3,2-二氧杂磷杂环己烷-2-胺(2.54 g,9.0 mmol)和5-甲硫基四氮唑(1.054 g,9.0 mmol)反应，得到0.13 g 粉末状固体，收率4.3%。 iHNMR (400 MHz, DMSO), S(ppm): 1HNMR(橋MHz，薩SO)， S(ppm): 7.67 (s, 1H)， 7.15—7,43 (m, 4H)， 5.26-5.64 (m, 3H)， 4.184.65 (m, 4H), 3.31-3.75 (m, 2H), 1,75—2.54 (m, 5H) ; ESI-MS: 508.1(M+l)。
实验例26体内抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的药理活性评价
动物模型采用健康成年的重庆麻鸭产的蛋孵化的l日龄雏鸭，经腹腔接种0.1ml DHBV DNA阳性病毒血清。接种1周后，分别颈外 静脉抽血，用地高辛标记的DHBV DNA探针经斑点杂交检测筛选出 感染阳性鸭，饲养至2周龄作为实验动物。
测定方法将感染阳性鸭55只随机分为11组，分设为l.病毒对 照组，用淀粉胶囊；2.阳性药物对照组用恩曲他滨，剂量为100mg/ (kg.d)和替诺福韦酯，剂量为150mg/(kg.d); 3.实施例1和实施例3， 剂量为IOO mg/ ( kg.d) ; 4.实施例5和实施例6，剂量为150 mg/ (kg.d); 5.实施例17和实施例20,剂量为30mg/(kg.d); 6.实施例23, 剂量为5 mg/(kg.d); 7.实施例25，剂量为0.5mg/( kg.d)。实验给药 时间为14天，停药观察7天。观察指标血清DHBVDNA改变情况 在用药前、用药7天、用药14天、停药7天分别颈外静脉抽血，分离血 清于-2(TC保存待检。釆用斑点杂交法，用罗氏公司的地高辛标记试 剂盒制备DHBVDNA探针统一检测，用Vuegocan(Brisa-620ST)扫描 仪进行膜片扫描；用the Discovery Series Quantity One软件对斑点进行 定量分析，斑点值为volume(volume = intensity xmm2)。
表l治疗前后血清DHBVDNA水平比较(x士s)
组别DHBVDNA (volume)用药前用药7天用药14天停药7天
淀粉胶囊290.87±47.65275.45±40.37298.63±68.78310.04±86,75
恩曲他滨303.54±54.73282.68±67.69220.95±53.15a340.85±52,38
替诺福韦酯316.39±74.73278.68±55.64210.23±62.47a318.62±80.56
实施例l321.82±61.57203.91±41.48b181.73±49.77b298.86±68.83
实施例3312.74±50.25268.32±80.06196.14±67.93a282.61±63.48
实施例5323.58±71.96188.59±48.42b155.87±53.64b286.76±73.85
实施例6325.07±61.38298.08±51.86268.10±65.87318.36±83.75
实施例17305.19±56.38188.82±44.7b162.03±55.54b317.37±93.68
实施例20330.47±54.04232.63±61.75a188.89±60.08b312.83±60.37
实施例23318.78±60.55203.58±40.32b171.88±48.59b287.18±57.44
实施例25308.36±70.78161.61±44.89b130.77±35.39b279.54±87.58
28注aP<0.05， bP<0.01
结果分析表1所列为各组DNA斑点volume值的平均数及标 准差，统计学釆用治疗前后自身配对t检验，为用药组不同时间DNA 水平与同组用药前DNA水平的比较。其中实施例3抗DHBV的活 性与阳性对照物恩曲他滨或替诺福韦酯相当；实施例1、实施例5、 实施例17、实施例20、实施例23和实施例25的抗DHBV的活性 明显优于阳性对照物恩曲他滨或替诺福韦酯。
权利要求
1、下述通式I的化合物，或其异构体、可药用盐、水合物或溶剂化物其中R1选自具有以下结构的基团R2选自氯、溴、氟、碘、硝基、羟基、氨基、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷胺基、C1-6卤代烷基或烷酰基；X选自邻、间或对位的氮或碳；n为0、1、2、3或4。
2、 根据权利要求l所述的化合物，或其异构体、可药用盐、水合 物或溶剂化物，其特征在于，所述通式I中R4与磷酸酯环结构中4位 的芳香基团互为顺式或反式。
3、 根据权利要求l所述的化合物，或其异构体、可药用盐、水合 物或溶剂化物，其特征在于，所述通式I中磷酸酯环结构中4位的碳 原子具有手性，其构型是S或R-构型。
4、 根据权利要求l-3任一项所述的化合物，其特征在于，所述异 构体包括互变异构体、顺反异构体、构象异构体、内消旋化合物和具 有对映或非对映关系的光学异构体。
5、根据权利要求l-3任一项所述的化合物，其特征在于，所述化合物为(1 ) 5-氟-l-(2R,5SH2'，4'-顺式-(4'S)-4'-[(3'-氯苯基)-2'-氧代 -1',3'，2'-二氧杂磷杂环己垸-2'-基]氧甲基-1，3-氧硫环-5-酰}胞嘧啶(2 ) 5陽氟-l-(2R,5SH2'，4'-反式画(4'S)陽4'-[(3'画氯苯基)-2'-氧代 -1',3'，2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]氧甲基-1,3-氧硫环-5-酰}胞嘧啶(3 ) 5-氟-l-(2R,5S)-{2'，4'-顺式-(4'S)-4'-[(4'-吡啶基)-2'-氧代 -1',3'，2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]氧甲基-1,3-氧硫环-5-酰}胞嘧啶(4 ) 5-氟-l-(2R，5SH2'，4'-反式-(4'S)-4'-[(4'-吡啶基)-2'-氧代 -1',3',2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]氧甲基-1,3-氧硫环-5-酰}胞嘧啶(5 ) (2R)-9-(2-[(2R'，4S')-4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代-l'，3'，2'-二氧杂磷 杂环己烷-2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤(6 ) (2R)-9-(2-[(2S',4R')-4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代-l'，3',2'-二氧杂磷 杂环己烷-2'-基]甲氧基丙基)腺嘌呤(7 ) (2仗)-9-{2-[4'-(3-氯苯基)-2'-氧代-1',3',2'-二氧杂磷杂环己烷 -2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤(8 ) (2R)-9-(2-[4'-(苯基)-2'-氧代-l',3',2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤(9 ) (2R)-9-(2-[4'-(3'-溴苯基)-2'-氧代-l',3',2'-二氧杂磷杂环己烷 -2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤(10 )(2R)-9-{2-[4'-(3'-氟苯基)-2'-氧代-l',3',2'-二氧杂磷杂环己烷 -2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤(11 )(2R)-9-(2-[4'-(3',5'-二氟苯基)-2'-氧代-l',3'，2'-二氧杂磷杂环 己烷-2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤(12) (2R)-9-(2-[4'-(2'，3'-二氯苯基)-2'-氧代-1',3'，2'-二氧杂磷杂 环己烷-2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤(13 )(2R)-9-(2-[4'-(4'-吡啶基)-2'-氧代-l',3',2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤(14)(2R)-9-(2-[4'-(3',5'-二甲苯基)-2'-氧代-l',3',2'-二氧杂磔杂环 己烷-2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤(15 )(2R)-9-(2-[4'-(3',5'-二氯苯基)-2'-氧代-l',3',2'-二氧杂磷杂环 己烷-2'-基]甲氧基丙基}腺嘌呤(16 )2-氨基-9-{2-[4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代-1',3',2'-二氧杂磷杂环己 烷-2'-基]甲氧基-2-乙撑基乙基}嘌呤(17 )2-氨基-9-《2-[(2R',4S')-4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代-l',3',2'-二氧杂 磷杂环己烷-2'-基]甲氧基-2-乙撑基乙基}嘌呤(18 )2-氨基-9-(2-[(2S',4R')-4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代-l',3',2'-二氧杂 磷杂环己烷-2'-基]甲氧基-2-乙撑基乙基}嘌呤(19) 2-氨基-6-羟基-9-{2-[4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代-1',3',2'-二氧杂 磷杂环己烷-2'-基]甲氧基-2-乙撑基乙基}嘌呤(20 ) 2-氨基-6-羟基-9-{2-[(2R',4S')-4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代 -1',3'，2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基-2-乙撑基乙基}嘌呤(21 ) 2-氨基-6-羟基-9-(2-[(2S'，4R')-4'-(3'-二氯苯基)-2'-氧代 -1'，3',2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基-2-乙撑基乙基}嘌呤(22 ) 2-氨基_6_对甲氧基苯巯基-9-(2-[4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代 -1',3'，2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基乙基}嘌呤(23 ) 2-氨基-6-对甲氧基苯巯基-9-《2-[(2R'，4S')-4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代-1',3',2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基乙基}嘌呤(24 )2-氨基-6-对甲氧基苯巯基-9-(2-[(2S'， 4仗')-4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代-l',3',2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基]甲氧基乙基}嘌呤(25 )2-氨基-l，9-二氢-9-[(lS，3R,4S)-4-羟基-3-(2'，4'-顺式-(4'S)-4'-(3'-氯苯基)-2'-氧代-l',3',2'-二氧杂磷杂环己烷-2'-基傳甲基-2-亚甲基 环戊烷]-6H-嘌呤-6-酮。
6、根据权利要求l-3任一项所述的化合物，其特征在于，所述化合物的盐为与无机酸或有机酸所形成的可药用盐。
7、 根据权利要求l-3任一项所述的化合物，其特征在于，所述化 合物的盐为与碱反应所形成的可药用盐。
8、 一种药用组合物，其特征在于，包含权利要求l-3任一项所述的式I化合物，或其异构体、可药用盐、水合物或溶剂化物和可药用 辅助剂、稀释剂或载体。
9、 根据权利要求l-3任一项所述的化合物，或其异构体、可药用 盐、水合物或溶剂化物在用于制备治疗和/或预防急性和慢性HBV或 HI V或HC V或HCMV感染引起的疾病的药物中的应用。
全文摘要
本发明提供通式I的肝靶向抗病毒前体药物环状磷酸酯及其所有可能的异构体、可药用盐、水合物、溶剂化物、以及药物组合物。本发明还提供了本发明化合物单独或与其它抗病毒药物联合在治疗抗病毒药物中的应用，特别是在治疗抗乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、HIV病毒和/或人巨细胞病毒(HCMV)中的应用。
文档编号C07F9/00GK101475594SQ20091007740
公开日2009年7月8日 申请日期2009年2月6日 优先权日2009年2月6日
发明者廖国超 申请人:廖国超