专利名称：花生衣中原花色素纯化方法
技术领域：
本发明涉及一种纯化方法，具体地说，是涉及一种花生衣中原花色素纯化 方法。
背景技术：
原花色素(Proanthocyanidins)是植物界中广泛存在的 一大类多酚类化合物， 是黄烷-3-醇衍生物的总称。它是由儿茶素、表儿茶素聚合而成，包括二聚体、 三聚体、四聚体、直至十聚体。原花色素具有很强的生物活性，能够清除人体 内过剩自由基，并具有较强的抗氧化能力，可作为防癌、抗突变、防治心血管 疾病药物的主要有效成分，并能抑制微生物的生长，可用作安全无毒的新型天 然抗氧化剂和防腐剂。
花生衣中含有丰富的原花色素，含量约占花生衣干重的17%,但 从花生衣中提取的原花色素粗产品用纯度较低，为了使发挥其应有的功效, 必须对粗品进行纯化。目前，对原花色素的分离纯化，工业上多釆用层析法， 层析法中大孔吸附树脂廉价易得，且具有吸附快、解吸快、吸附容量大、易于 再生、使用寿命长等优点。
发明内容
本发明的目的在于公开一种可以纯化花生衣原花色素新方法，利用这种新 方法进行分离纯化，产品纯度高、易于再生。 为实现上述目的，本发明釆用如下步骤
(1 )将脱脂花生衣加入到乙醇溶液，微波萃取后抽滤，滤液浓缩，20Pa,-4"C 真空冷冻干燥，得原花色素粗品
(2)将步骤(1)的所得到的粗品配制成原花色素溶液，通过HPD-826大 孔吸附树脂填充柱；然后蒸馏水洗脱除去杂质，再用乙醇洗脱。.(3)将所得的乙醇洗脱液浓缩、20Pa，-4'C冷冻干燥，得花生衣原花色素精制品。
以香草醛一盐酸法检测该样品的原花色素的纯度为92.05%。
步骤(1)中所述的脱脂花生衣按1: 25 (m:v)的比例加入40%乙醇溶液 中；所述的微波萃取是设定功率为600W、温度为40。C,搅拌萃取90S。
步骤(2)所述的原花色素浓度为10-12mg/ml;通过HPD-826大孔吸附树 脂填充柱的流速为0.5-lml/min;所述的蒸馏水洗脱4BV;所述的乙醇洗脱为用 5。/o的乙醇洗脱2BV,洗脱流速为0.5-lml/min。
本发明中未详细列出的方法，如抽滤、香草醛一盐酸法等均为本领域技术 人员公知的常规方法。
本发明提供了一种花生衣原花色素纯化的新方法，利用大孔吸附树脂对花 生衣中的原花色素进行特异性吸附，再根据不同浓度的乙醇对吸附样品的解析 能力的不同，从而达到原花色素纯化的目的。本方法的优点是吸附快、解吸快、 吸附容量大、所得产品纯度高、易于再生等优点。
具体实施例方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，以助于理解本发明的内容。 经发明人证实，本发明所述的步骤和参数均能够实现本发明的目的。 实施例1
(1) 将脱脂花生衣按1: 25 (m:v)的比例加入40%乙醇溶液，在微波萃 取仪中设定功率为600W、温度为40°C,搅拌萃取90S，萃取结束后抽滤，滤 液浓缩，20Pa,-4i:真空冷冻干燥，得原花色素粗品
(2) 将步骤(1)的所得到的粗品配制成原花色素浓度为10mg/ml的溶液 以0.5ml/min的流速通过HPD-826大孔吸附树脂填充柱；然后用蒸馏水洗脱 4BV,除去杂质，再用5。/q的乙醇洗脱2BV,洗脱流速为0.5ml/min。
(3) 将步骤(2)所得的5%的乙醇洗脱液浓缩、20Pa，-4。C真空冷冻干燥， 得花生衣原花色素精制品，经检测该样品的原花色素的纯度为92.05%。实施例2
(1) 将脱脂花生衣按1: 25 (m:v)的比例加入40%乙醇溶液，在微波萃取仪中设定功率为600W、温度为40°C，搅拌萃取90S,萃取结東后抽滤，滤液浓缩，20Pa,-4t:真空冷冻干燥，得原花色素粗品
(2) 将步骤(1)的所得到的粗品配制成原花色素浓度为12mg/ml的溶液以lml/min的流速通过HPD-826大孔吸附树脂填充柱；然后用蒸馏水洗脱4BV，除去杂质，再用5。/。的乙醇洗脱2BV，洗脱流速为lml/min。
(3) 将步骤(2)所得的5%的乙醇洗脱液浓缩、20Pa,-4。C真空冷冻干燥，得花生衣原花色素精制品，经检测该样品的原花色素的纯度为94.25%。实施例3
(1) 将脱脂花生衣按1: 25 (m:v)的比例加入40%乙醇溶液，在微波萃取仪中设定功率为600W、温度为40°C，搅拌萃取90S,萃取结束后抽滤，滤液浓缩，20Pa,-4t:真空冷冻干燥，得原花色素粗品
(2) 将步骤(1)的所得到的粗品配制成原花色素浓度为11mg/ml的溶液以0.8ml/min的流速通过HPD-826大孔吸附树脂填充柱；然后用蒸馏水洗脱4BV，除去杂质，再用5。/。的乙醇洗脱2BV，洗脱流速为0.8ml/min。
(3) 将步骤(2)所得的5%的乙醇洗脱液浓缩、20Pa,-4。C真空冷冻干燥，得花生衣原花色素精制品，经检测该样品的原花色素的纯度为93.0%。实施例4
(1) 将脱脂花生衣按1: 25 (m:v)的比例加入40%乙醇溶液，在微波萃取仪中设定功率为600W、温度为40°C，搅拌萃取90S，萃取结束后抽滤，滤液浓缩，20Pa，-4。C真空冷冻干燥，得原花色素粗品
(2) 将步骤(1)的所得到的粗品配制成原花色素浓度为10Jmg/ml的溶液以0.6ml/min的流速通过HPD-826大孔吸附树脂填充柱；然后用蒸馏水洗脱4BV,除去杂质，再用5。/。的乙醇洗脱2BV，洗脱流速为0.6ml/min。
(3) 将步骤(2)所得的5%的乙醇洗脱液浓缩、加Pa,4。C真空冷冻千燥，得花生衣原花色素精制品，经检测该样品的原花色素的纯度为91."%。实施例5
(1) 将脱脂花生衣按1: 25 (m:v)的比例加入40%乙醇溶液，在微波萃取仪中设定功率为600W、温度为4(TC,搅拌萃取90S,萃取结東后抽滤，滤液浓缩，20Pa,-4"C真空冷冻干燥，得原花色素粗品
(2) 将步骤(1)的所得到的粗品配制成原花色素浓度为12mg/ml的溶液以0.9ml/min的流速通过HPD-826大孔吸附树脂填充柱；然后用蒸馏水洗脱4BV，除去杂质，再用5。/。的乙醇洗脱2BV,洗脱流速为0.7ml/min。
(3) 将步骤(2)所得的5%的乙醇洗脱液浓缩、20Pa,-4。C真空冷冻干燥，得花生衣原花色素精制品，经检测该样品的原花色素的纯度为92.21%。实施例6
(1) 将脱脂花生衣按1: 25 (m:v)的比例加入40%乙醇溶液，在微波萃取仪中设定功率为600W、温度为40°C，搅拌萃取90S,萃取结束后抽滤，滤液浓缩，20Pa,-4t:真空冷冻千燥，得原花色素粗品
(2) 将步骤(1)的所得到的粗品配制成原花色素浓度为10mg/ml的溶液以0.7ml/min的流速通过HPD-826大孔吸附树脂填充柱；然后用蒸馏水洗脱4BV,除去杂质，再用5。/。的乙醇洗脱2BV,洗脱流速为0.9ml/min。
(3) 将步骤(2)所得的5%的乙醇洗脱液浓缩、MPa,-fC真空冷冻干燥,得花生衣原花色素精制品，经检测该样品的原花色素的纯度为94.11%。
权利要求
1、一种花生衣中原花色素纯化方法，包括以下步骤(1)将脱脂花生衣加入到乙醇溶液，微波萃取后抽滤，滤液浓缩，真空冷冻干燥得原花色素粗品；(2)将步骤(1)的所得到的粗品配制成原花色素溶液，通过HPD-826大孔吸附树脂填充柱；然后蒸馏水洗脱除去杂质，再用乙醇洗脱；(3)将所得的乙醇洗脱液浓缩、冷冻干燥得花生衣原花色素精制品。
2、 根据权利要求l所述的花生衣中原花色素纯化方法，其特征在于，步骤 (1)中所述的脱脂花生衣按质量体积比1: 25加入40%乙醇溶液中。
3、 根据权利要求l所述的花生衣中原花色素纯化方法，其特征在于，步骤·(1) 中所述的微波萃取是设定功率为600W、温度为40。C,搅拌萃取90S。
4、 根据权利要求l所述的花生衣中原花色素纯化方法，其特征在于，步骤(2) 中所述的原花色素浓度为10-12mg/ml。
5、 根据权利要求l所述的花生衣中原花色素纯化方法，其特征在于，步骤 (2)中所述的通过HPD-826大孔吸附树脂填充柱的流速为0.5-lml/min。
6、 根据权利要求l所述的花生衣中原花色素纯化方法，其特征在于，步骤 (2)中所述的所述的乙醇洗脱为用5%的乙醇洗脱2BV,洗脱流速为·0.5-lml/min。
全文摘要
本发明公开了一种花生衣中原花色素纯化方法，包括以下步骤(1)将脱脂花生衣加入到乙醇溶液，微波萃取后抽滤，滤液浓缩，真空冷冻干燥得原花色素粗品；(2)将步骤(1)的所得到的粗品配制成原花色素溶液，通过HPD-826大孔吸附树脂填充柱；然后蒸馏水洗脱除去杂质，再用乙醇洗脱；(3)将所得的乙醇洗脱液浓缩、冷冻干燥得花生衣原花色素精制品。本发明的方法原花色素吸附量大、产品纯度高、树脂易于再生，适用于大规模工业化生产。
文档编号C07D311/62GK101665482SQ20091017841
公开日2010年3月10日 申请日期2009年9月24日 优先权日2009年9月24日
发明者于丽娜, 张初署, 凤 朱, 杨庆利, 洁 毕, 禹山林 申请人:山东省花生研究所