专利名称：一种高含量雷公藤新碱和雷公藤碱戊的制备方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，尤其涉及一种高含量的雷公藤新碱和雷公藤碱戊的制备方法。
背景技术：
雷公藤(Tripterygium wilfordii Hook. f.)系卫矛科雷公藤属植物，以根、叶、花及果入药，己广泛应用于治疗各种自身免疫性疾病如肾炎、红斑狼疮、接触性皮炎和类风湿性关节炎等自身免疫性疾病。雷公藤新碱对DNcB所致迟发型超敏反应具有明显的抑制 作用，能使周围小动脉舒张增加血流量，减低外围血流的阻力，改善微循环的阻碍，有活血作用。对体液免疫和细胞免疫均有抑制作用(郑幼兰，徐婭，林建峰.雷公藤春碱和雷公藤新碱的免疫抑制作用，药学学报，1989，24(8) : 568-572)。雷公藤化学成分复杂，药理作用广泛，有重要的临床应用价值。但由于雷公藤毒副作用大，限制了临床应用的推广。应进一步加强对雷公藤药物化学、药理作用和临床应用的研究，提取、纯化出高效的雷公藤活性成分，为雷公藤中药饮片的质量监控及雷公藤中药材的进一步开发利用研究奠定基础。雷公藤生物碱是雷公藤的主要活性成分之一，一直是人们研究的主要对象，其中雷公藤新碱(euonine)和雷公藤碱戍(wiIforidine)是较晚发现的雷公藤生物碱。目前关于雷公藤新碱(euonine)和雷公藤碱戍(wilforidine)的制备主要采用液/液萃取法结合柱层析色谱法(何直昇，洪山海，李亚，沙怀，于显国.新生物碱雷公藤碱戊的结构，化学学报，1985，43(6) : 593-596 ;何直昇，李亚，方圣鼎，洪山海.雷公藤碱乙、碱庚和碱己的结构，化学学报，1987，45(5) : 510-513)等，主要采用雷公藤根茎为原料，获得的雷公藤生物碱含量一般在95%左右或更低一些，其纯度难以满足雷公藤生物碱医药用对照品的要求，也不利于雷公藤倍半萜类生物碱药理的进一步研究。雷公藤新碱(euonine)和雷公藤碱戍(wilforidine)的结构如下所示
权利要求
1.一种高含量的雷公藤新碱和雷公藤碱戊的制备方法，其特征在于，具体步骤如下 (1)预分离取2 20mL已脱除雷公藤甲素后的氯仿废液，用1(T60 mL乙醚萃取后，乙醚层挥干后获得乙醚浸膏，然后用重量百分比浓度为5 15 g/L的易挥发性有机酸或浓度为5^20 g/L的氨水调节乙醚浸膏的pH值至6 10. 5，进行重结晶，重结晶的溶剂为碳原子数为r3的低级醇，重结晶的温度为(T40 °C，得到雷公藤粗生物 碱； (2)色谱分离将体积比为55:45 I的乙腈和水混合形成混合溶剂，将雷公藤粗生物碱溶于混合溶剂后，使用混合溶剂为流动相，以0. 2^2. 0 mL/min的流速，在(T40 °C温度范围内，在C18色谱柱上实现雷公藤新碱和雷公藤碱戊的分离，通过紫外在线检测，分别收集雷公藤新碱和雷公藤碱戊的流出液，挥干溶剂，分别得到纯度大于97. 0%的雷公藤新碱和雷公藤碱戊。
2.根据权利要求I所述的一种含量大于97.0%的雷公藤新碱和雷公藤碱戊的制备方法，其特征在于，所述的C18色谱柱为硅胶键合相C18柱。
3.根据权利要求2所述的一种高含量雷公藤新碱和雷公藤碱戊的制备方法，其特征在 于，所述的硅胶键合相C18色谱柱可以为Hypersil C18色谱柱。
4.根据权利要求I所述的一种含量大于97.0%的雷公藤新碱和雷公藤碱戊的制备方法，其特征在于，所述的乙腈和水的比例为65:35,所述的流动相流速为I. 0 mL/min,所述的柱温为30 °C。
全文摘要
本发明公开了一种高含量雷公藤新碱和雷公藤碱戊的制备方法，以提取雷公藤甲素后的氯仿废液为原料，先经乙醚萃取及以低级醇为溶剂的重结晶过程，随后采用反相高效液相半制备色谱法制备含量大于97.0%的雷公藤新碱和雷公藤碱戊，采用紫外在线检测，收集目标物，冷冻干燥后，获得雷公藤新碱和雷公藤碱戊的含量大于97.0%。采用本发明公开的制备方法，分离所得的产品纯度高、过程短、成本低，易于产业化。
文档编号C07D491/18GK102643281SQ201210107238
公开日2012年8月22日 申请日期2012年4月13日 优先权日2012年4月13日
发明者蔡美强, 金米聪, 陈晓红 申请人:宁波市疾病预防控制中心