提高人参皂苷m1与癸酰氯单酯化选择性的合成方法
【专利摘要】本发明介绍了一种提高人参皂苷M1与癸酰氯单酯化选择性的合成方法，首先将人参皂苷M1糖苷基的6号位羟基用叔丁基二甲基氯硅烷醚化保护起来，再与等当量的癸酰氯在冰水浴，氮气保护，二氯甲烷为溶剂，三乙胺为敷酸剂，DMAP(4-二甲氨基吡啶)催化的条件下发生单酯化反应，最后用四丁基氟化铵脱去硅保护基得到人参皂苷M1的叔丁基二甲基硅醚与癸酰氯的单酯化反应产物。
【专利说明】提高人参皂苷M1与癸酰氯单酯化选择性的合成方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及人参皂苷Ml的氯硅烷保护反应，属于中药化学领域。
【背景技术】
[0002]人参具有抗衰老、抗炎、抗过敏、降血糖、修复神经损伤和保肝等作用。近年来的研究表明，人参皂苷具有抗肿瘤的作用，大部分都是以Rg3、Rh1, Rh2等为主要研究对象。他们在促进肿瘤细胞凋亡和肿瘤细胞分化等方面表现出显著作用，不同结构的人参皂苷在抗肿瘤活性方面存在差异，其中二醇型人参皂苷抗肿瘤活性明显强于三醇型人参皂苷。随着皂苷药代动力学研究的深入，发现真正发挥抗肿瘤作用的是皂苷动物体内的次级代谢产物Compound K又称人参阜苷Ml,人参阜苷Compound K属于原人参二醇型阜苷。研究表明人参皂苷Compound K的酯化衍生物具有更好的抗肿瘤活性。EMl (Ml的硬脂酸酯、棕榈酸酯和油酸酯的混合物)与Ml相比具有更强的抗肿瘤活性。但是EMl来源有限，难以分离纯化。而利用化学合成技术获得的系列Ml衍生物水溶性差。采用酯键、醚键等方式给Ml的修饰基引入水溶性较好的基团，使其兼具脂溶性和水溶性，人参皂苷Ml的结构式上有六个羟基，从而选择性酯化和提高单酯化产率具有很重要的研究价值。
[0003]氯硅烷保护-去保护过程广泛应用于羟基的保护反应，用氯硅烷将Compound K的糖苷基上最活泼的6号位羟基保护上，再与酰氯发生酯化反应，根据动力学和基团位阻大小对酯化位置的影响，从而优化了单酯化反应的选择性，易于分离提纯，提高酯化反应产率。
【发明内容】
[0004]人参皂苷Ml和叔丁基二甲基氯硅烷为原料合成人参皂苷Ml的单醚化产物，将其产物与等当量的癸酰氯在冰水浴，氮气保护，二氯甲烷为溶剂，三乙胺为敷酸剂，DMAP催化的条件下发生单酯化反应，最后用四丁基氟化铵脱去叔丁基二甲基硅基。
[0005]本发明的积极效果在于用氯硅烷将Compound K的糖苷基上最活泼的6号位羟基保护上，再与酰氯发生酯化反应，根据动力学和基团位阻大小对酯化位置的影响，从而优化了单酯化反应的选择性，易于分离提纯，提高酯化反应产率。
[0006]实验:人参皂苷Ml与癸酰氯单酯化选择性的合成 仪器与试剂:
仪器:Agilent 1260 LC高效液相色谱仪；尼高丽550型傅里叶变换红外光谱仪；RE52CS-1旋转蒸发仪，上海亚荣生化仪器厂；SHZ-D (III)旋转水式真空泵，巩义市英峪予华仪器厂；ETS-D4加热磁力搅拌器，德国IKA公司；BT 323S电子天平，北京赛多利斯仪器系统有限公司；FH-203三用紫外分析仪(UV)，上海精科实业有限公司；KQ-50B超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司；柱层析硅胶(200-300目)，烟台牟平区康比诺化学试剂厂；薄层层析硅胶(GF254)，烟台牟平区康比诺化学试剂厂；
试剂:叔丁基二甲基氯硅烷，阿法埃莎化学有限公司；癸酰氯，阿法埃莎化学有限公司；三乙胺，天津科密欧化学试剂有限公司；二氯甲烷，国药集团化学试剂有限公司；无水硫酸钠，天津科密欧化学试剂有限公司；石油醚，天津科密欧化学试剂有限公司；乙酸乙酯，天津科密欧化学试剂有限公司
1.人参皂苷Ml与叔丁基二甲基氯硅烷的单醚化合成
在装有电磁搅拌器的25mL休良克瓶中，加入100 mg人参皂苷Ml，5倍当量的叔丁基二甲基氯硅烷，氮气保护，冰水浴下加入适量的三乙胺溶解，反应10 min后，升至室温，薄层色谱法监测反应进程，24h反应完毕后，加入饱和氯化铵溶液停止反应。经CH2Cl2 (3 X 10 mL)萃取，Brine洗有机相,无水Na2SO4干燥,浓缩溶剂。
[0007]柱层析纯化过程:硅胶量，6g ;流动相，甲醇/ 二氯甲烷；
梯度洗脱后得到Rf值为9/34(8%Me0H/CH2Cl2)的产物109 mg产物为乳白色固体，为人参皂苷Ml与叔丁基二甲基氯硅烷的单醚化合成产物人参皂苷Ml的叔丁基二甲基硅醚。
[0008]2.人参皂苷Ml的叔丁基二甲基硅醚与癸酰氯的单酯化反应
在装有电磁搅拌器的25mL休良克瓶中，加入90 mg人参皂苷Ml的叔丁基二甲基硅醚，5%当量的DMAP，氮气保护，冰水浴下加入适量的二氯甲烷溶解和三乙胺，反应10 min后，加入等当量的癸酰氯，薄层色谱法监测反应进程，24h反应完毕后，加入饱和氯化铵溶液停止反应。经CH2Cl2(3X10 mL)萃取，Brine洗有机相，无水Na2SO4干燥，浓缩溶剂。
[0009]柱层析纯化过程:硅胶量，6 g ; 流动相，乙酸乙酯/石油醚；
梯度洗脱后得到Rf值为16/38 (30%EA/PE)的产物80 mg 产物为白色固体，产率约为80%
人参皂苷Ml的叔丁基二甲基硅醚与癸酰氯的单酯化反应产物，结构鉴定:经红外光谱仪，高效液相色谱仪，核磁谱图鉴定图1为所得产物化合物结构式。
[0010]3.脱保护基反应
将实验例2的产物加入到50 ML的圆底烧瓶中，用无水四氢呋喃溶解，加入1.5当量的四丁基氟化铵，反应2h后停止。
[0011]柱分离后得到人参皂苷Ml的单酯产物结构式见图2【专利附图】
【附图说明】
图1人参皂苷Ml的叔丁基二甲基硅醚与癸酰氯的单酯化反应产物结构式 图2人参皂苷Ml的单酯产物结构式
【具体实施方式】
[0012]实施例1人参皂苷Ml与叔丁基二甲基氯硅烷的单醚化合成
在装有电磁搅拌器的25mL休良克瓶中，加入100 mg人参皂苷Ml，5倍当量的叔丁基二甲基氯硅烷，氮气保护，冰水浴下加入适量的三乙胺溶解，反应10 min后，升至室温，薄层色谱法监测反应进程，24h反应完毕后，加入饱和氯化铵溶液停止反应。经CH2Cl2 (3 X 10 mL)萃取，Brine洗有机相,无水Na2SO4干燥,浓缩溶剂。
[0013]柱层析纯化过程:硅胶量，6g ;流动相，甲醇/ 二氯甲烷；梯度洗脱后得到Rf值为9/34 (8%Me0H/CH2Cl2)的产物109 mg产物为乳白色固体为人参皂苷Ml与叔丁基二甲基氯硅烷的单醚化合成产物人参皂苷Ml的叔丁基二甲基硅醚。
[0014]在装有电磁搅拌器的25mL休良克瓶中，加入90 mg人参皂苷Ml的叔丁基二甲基硅醚，5%当量的DMAP，氮气保护，冰水浴下加入适量的二氯甲烷溶解和三乙胺，反应10 min后，加入等当量的癸酰氯，薄层色谱法监测反应进程，24h反应完毕后，加入饱和氯化铵溶液停止反应。经CH2Cl2(3X10 mL)萃取，Brine洗有机相，无水Na2SO4干燥，浓缩溶剂。柱层析纯化后得到人参皂苷Ml的叔丁基二甲基硅醚与癸酰氯的单酯化反应产物。
【权利要求】
1.一种提高人参皂苷Ml与癸酰氯单酯化选择性的合成方法，反应流程为保护-酯化_去保护 具体方法:首先，在装有电磁搅拌器的25mL休良克瓶中，加入100 mg人参皂苷Ml，5倍当量的叔丁基二甲基氯硅烷，氮气保护，冰水浴下加入适量的三乙胺溶解，反应10 min后，升至室温，薄层色谱法监测反应进程，24h反应完毕后，加入饱和氯化铵溶液停止反应，经CH2Cl2 (3 X 10 mL)萃取，Brine洗有机相，无水Na2SO4干燥，浓缩溶剂；柱层析纯化过程:硅胶量，6g ;流动相，甲醇/ 二氯甲烷；梯度洗脱后得到Rf值为9/34(8%Me0H/CH2Cl2)的产物109 mg产物为乳白色固体为人参皂苷Ml与叔丁基二甲基氯硅烷的单醚化合成产物人参皂苷Ml的叔丁基二甲基硅醚；其次，在装有电磁搅拌器的25mL休良克瓶中，加入90 mg人参皂苷Ml的叔丁基二甲基硅醚，5%当量的DMAP，氮气保护，冰水浴下加入适量的二氯甲烷溶解和三乙胺，反应10 min后，加入等当量的癸酰氯，薄层色谱法监测反应进程，24h反应完毕后，加入饱和氯化铵溶液停止反应；最后，经CH2Cl2(3X 10 mL)萃取，Brine洗有机相，无水Na2SO4干燥，浓缩溶剂，柱层析纯化后得到人参皂苷Ml的叔丁基二甲基硅醚与癸酰氯的单酯化反应产物。
2.根据权利要求1，人参皂苷Ml和叔丁基二甲基氯硅烷为原料合成人参皂苷Ml的单醚化产物，将其产物与等当量的癸酰氯在冰水浴，氮气保护，二氯甲烷为溶剂，三乙胺为敷酸剂，DMAP催化的条件下发生单酯化反应，最后用四丁基氟化铵脱去叔丁基二甲基硅基，完成合成反应。`
3.根据权利要求1，第二步反应人参皂苷Ml的叔丁基二甲基硅醚与癸酰氯的单酯化反应产物中选择性生成3号位单酯的产率达到80%。
4.根据权利要求1，人参皂苷Ml的单酯产物结构式见图2。
【文档编号】C07J17/00GK103694297SQ201310577993
【公开日】2014年4月2日 申请日期:2013年11月19日 优先权日:2013年11月19日
【发明者】弓晓杰, 陈丽荣, 陆俊霞 申请人:大连杰信生物科技有限公司