一种利用超声波从红豆杉中提取紫杉醇的方法
【专利摘要】本发明公开了一种利用超声波从红豆杉中提取紫杉醇的方法，其是通过将红豆杉枝叶烘干后粉碎，向该粉末中加入粉末重量3-4倍的乙酸乙酯和丙酮混合液得混合物，将该混合物投入回流提取器中提取4-5次得提取液，将提取液过滤后过大孔吸附树脂柱，并将得到的紫杉醇段用清水和乙醇洗脱，再将得到的紫杉醇粗品、硅胶与二氯甲烷混合后烘干，将干燥后的混合物与硅胶按混合后装入层析柱，采用乙酸乙酯和丙酮体系洗脱，将得到的紫杉醇段浓缩蒸干，然后将其溶解在乙醇和水中，静止冷却后再过滤结晶以及烘干，即得紫杉醇成品。采用本发明的方法提取紫杉醇，提取率可达96-99％，产品中紫杉醇的纯度达94-96％，能够取得显著的经济效益。
【专利说明】一种利用超声波从红豆杉中提取紫杉醇的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及从植物中分离提取有机化合物的【技术领域】，尤其是涉及一种利用超声波从红豆杉中提取紫杉醇的方法。
【背景技术】
[0002]红豆杉又名三尖杉、桃松、山榧树、广泛分布于世界各地，植物全株富含三尖杉碱、表二尖杉喊、去甲基二尖杉喊、乙酸二尖杉喊、二尖杉酮喊、二尖杉新喊以及紫杉醇，运用红豆杉极其同属植物短叶紫衫提取物的紫衫膏中含有多种成分:紫衫碱、紫杉醇、紫衫素、紫衫宁、蛇皮留酮、金松双簧酮，某些有毒物质，糖苷色素等。其中紫杉醇的抗Ca、抗TB活性最佳，是紫衫浸膏中的主要抗Ca、抗TB成分和主要要用成分。
[0003]紫杉醇别名泰素、紫素、特素，化学名称为5 β，分子式为C47H51N014。紫杉醇主要适用于卵巢癌和乳腺癌，对肺癌、大肠癌、黑色素瘤、头颈部癌、淋巴瘤和脑瘤。用途广泛，市场需求量大。目前，从红豆杉中提取紫杉醇常用的工艺为:将红豆杉树皮粉碎，用85%?95%酒精在35?55°C热回流浸提三次，50?70°C真空减压浓缩至热测比重1.1?1.2g/ml，再用氯仿萃取，萃取液浓缩成膏状，得紫杉醇含量1 %氯仿膏，将紫杉醇含量1 %氯仿膏加氯仿溶解完全，加硅胶搅拌均匀，凉干，过筛，填装到层析柱中，氯仿和甲醇梯度洗脱，TLC检测，分段合并浓缩，得紫杉醇含量5?8%半成品，将紫杉醇含量5?8%半成品加丙酮溶解完全，加硅胶搅拌均匀，凉干，过筛，填装到层析柱中，丙酮和石油醚梯度洗脱，TLC检测，分段合并浓缩，得紫杉醇含量20?25%半成品，用丙酮和石油醚系统结晶3?4次，抽滤，50°C真空减压干燥，得紫杉醇含量75?80%半成品，16Mpa压力层析分离，TLC检测，分段合并浓缩，目标段浓缩物用丙酮?石油醚经结晶、抽滤、干燥后得紫杉醇。该工艺制得的紫杉醇纯度较高，但其工艺步骤繁琐，生产成本较高，且紫杉醇的提取率较低。
【发明内容】
[0004]有鉴于此，本发明的目的是提供一种利用超声波从红豆杉中提取紫杉醇的方法，以解决现有技术工艺复杂、生产成本高以及紫杉醇的提取率低存在的不足。
[0005]本发明通过以下技术方案解决上述技术问题:
[0006]一种利用超声波从红豆杉中提取紫杉醇的方法，包括以下步骤:
[0007](1)原料预处理:将红豆杉枝叶用40_50°C的温度烘干至水分含量为8-12%，然后将其粉碎为60-200目的粉末；
[0008](2)提取紫杉醇:向步骤⑴制得的粉末中加入粉末重量3-4倍的溶剂，搅拌使粉末充分溶解，然后将粉末与溶剂的混合物投入设有超声波振荡器的回流提取器中，在超声频率为28-32KHZ，功率为1400-1500kw的超声波作用下，加热回流提取4_5次，每次提取时间为24_30min,得提取液；
[0009](3)吸附:将步骤⑵中的提取液进行过滤，将滤液过大孔吸附树脂柱，大孔吸附树脂柱的用量为红豆杉粉末重量的10-12倍；
[0010](4)制备紫杉醇粗品:将紫杉醇段用清水洗脱，再用乙醇洗脱，乙醇的体积为紫砂醇段体积的4-6倍，获得乙醇洗脱液，将该洗脱液减压蒸干即得紫杉醇粗品；
[0011](5)层析:将紫杉醇粗品、硅胶与二氯甲烷按照重量比为1: (1.8-2.2): (2.5-2.8)混合，然后采用文火烘干，将干燥后的混合物与硅胶按1:(3-4)混合后装入层析柱，采用乙酸乙酯和丙酮体系洗脱3-5次，收集紫杉醇段；
[0012](6)结晶:将步骤(5)中的紫杉醇段浓缩蒸干，然后将其溶解在乙醇和水中，乙醇、紫砂醇段体积与水的体积比为(4-6):1:(10-12)，搅拌10-15min使其混合均匀，然后静止冷却45-50h，再过滤结晶以及烘干，即得紫杉醇成品。
[0013]优选地，所述步骤(1)中，将红豆杉枝叶用45°C的温度烘干至水分含量为10%，然后将其粉碎为80目的粉末。
[0014]优选地，所述步骤(2)中，溶剂是乙醇乙酯和丙酮的混合物。
[0015]优选地，所述乙醇乙酯和丙酮的重量比为10:8_12。
[0016]优选地，所述步骤⑵中，溶剂是甲醇和二氯甲烷的混合物
[0017]优选地，所述甲醇和二氯甲烷的重量比为10:12_16。
[0018]优选地，所述步骤(2)中，通过加热调节回流提取器内的温度为30_35°C。
[0019]优选地，所述乙醇的浓度为80-90%。
[0020]本发明的有益效果为:采用本发明的方法提取紫杉醇，提取率可达96-99%，产品中紫杉醇的纯度达94-96%，能够取得显著的经济效益。同时，本发明的溶剂使用量少，利用率较高，可有效降低生产成本。
【具体实施方式】
[0021]为了方便本领域的技术人员理解，下面将结合实施例对本发明做进一步的描述。实施例仅仅是对该发明的举例说明，不是对本发明的限定，实施例中未作具体说明的步骤均是已有技术，在此不做详细描述。
[0022]实施例一
[0023]一种利用超声波从红豆杉中提取紫杉醇的方法，包括以下步骤:
[0024](1)原料预处理:将红豆杉枝叶用40°C的温度烘干至水分含量为8%，然后将其粉碎为60目的粉末；
[0025](2)提取紫杉醇:向步骤(1)制得的红豆杉枝叶的粉末中加入粉末重量3倍的溶齐U，该溶剂是乙醇乙酯和丙酮按重量比为10:8混合而成，搅拌使粉末充分溶解，然后将粉末与溶剂的混合物投入设有超声波振荡器的回流提取器中，在超声频率为28KHz，功率为1400kw的超声波作用下，加热至温度为30°C并保持恒温回流提取4次，每次提取时间为24min，得提取液；
[0026](3)吸附:将步骤(2)中的提取液进行过滤，将滤液过大孔吸附树脂柱，大孔吸附树脂柱的用量为红豆杉粉末重量的10倍；
[0027](4)制备紫杉醇粗品:将紫杉醇段用清水洗脱，再用浓度为80%乙醇洗脱，乙醇的体积为紫砂醇段体积的4倍，获得乙醇洗脱液，将该洗脱液减压蒸干即得紫杉醇粗品；
[0028](5)层析:将紫杉醇粗品、硅胶与二氯甲烷按照重量比为1:1.8:2.5混合，然后采用文火烘干，将干燥后的混合物与硅胶按1:3混合后装入层析柱，采用乙酸乙酯和丙酮体系洗脱3次，收集紫杉醇段；
[0029](6)结晶:将步骤(5)中的紫杉醇段浓缩蒸干，然后将其溶解在浓度为80%乙醇和水中，乙醇、紫砂醇段体积与水的体积比为4:1:10，搅拌lOmin使其混合均匀，然后静止冷却45h，再过滤结晶以及烘干，即得紫杉醇成品。
[0030]采用本发明的方法提取紫杉醇，提取率可达96%以上，产品中紫杉醇的纯度达94%以上。
[0031]实施例二
[0032]一种利用超声波从红豆杉中提取紫杉醇的方法，包括以下步骤:
[0033](1)原料预处理:将红豆杉枝叶用50°C的温度烘干至水分含量为12%，然后将其粉碎为200目的粉末；
[0034](2)提取紫杉醇:向步骤(1)制得的红豆杉枝叶的粉末中加入粉末重量3倍的溶齐U，该溶剂是乙醇乙酯和丙酮按重量比为10:12混合而成，搅拌使粉末充分溶解，然后将粉末与溶剂的混合物投入设有超声波振荡器的回流提取器中，在超声频率为32KHz，功率为1500kw的超声波作用下，加热至温度为35°C并保持恒温回流提取5次，每次提取时间为30min,得提取液；
[0035](3)吸附:将步骤(2)中的提取液进行过滤，将滤液过大孔吸附树脂柱，大孔吸附树脂柱的用量为红豆杉粉末重量的12倍；
[0036](4)制备紫杉醇粗品:将紫杉醇段用清水洗脱，再用浓度为90%乙醇洗脱，乙醇的体积为紫砂醇段体积的6倍，获得乙醇洗脱液，将该洗脱液减压蒸干即得紫杉醇粗品；
[0037](5)层析:将紫杉醇粗品、硅胶与二氯甲烷按照重量比为1:2.2:2.8混合，然后采用文火烘干，将干燥后的混合物与硅胶按1:4混合后装入层析柱，采用乙酸乙酯和丙酮体系洗脱5次，收集紫杉醇段；
[0038](6)结晶:将步骤(5)中的紫杉醇段浓缩蒸干，然后将其溶解在浓度为90%乙醇和水中，乙醇、紫砂醇段体积与水的体积比为6:1:12，搅拌15min使其混合均匀，然后静止冷却50h，再过滤结晶以及烘干，即得紫杉醇成品。
[0039]采用本发明的方法提取紫杉醇，提取率可达97%以上，产品中紫杉醇的纯度达95%以上。
[0040]实施例三
[0041]一种利用超声波从红豆杉中提取紫杉醇的方法，包括以下步骤:
[0042](1)原料预处理:将红豆杉枝叶用45°C的温度烘干至水分含量为10%，然后将其粉碎为80目的粉末；
[0043](2)提取紫杉醇:向步骤(1)制得的红豆杉枝叶的粉末中加入粉末重量3.5倍的溶剂，该溶剂是乙醇乙酯和丙酮按重量比为10:10混合而成，搅拌使粉末充分溶解，然后将粉末与溶剂的混合物投入设有超声波振荡器的回流提取器中，在超声频率为30KHZ，功率为1450kw的超声波作用下，加热至温度为32°C并保持恒温回流提取4次，每次提取时间为28min，得提取液；
[0044](3)吸附:将步骤(2)中的提取液进行过滤，将滤液过大孔吸附树脂柱，大孔吸附树脂柱的用量为红豆杉粉末重量的11倍；
[0045](4)制备紫杉醇粗品:将紫杉醇段用清水洗脱，再用浓度为85%乙醇洗脱，乙醇的体积为紫砂醇段体积的5倍，获得乙醇洗脱液，将该洗脱液减压蒸干即得紫杉醇粗品；
[0046](5)层析:将紫杉醇粗品、硅胶与二氯甲烷按照重量比为1:2:2.6混合，然后采用文火烘干，将干燥后的混合物与硅胶按1:3混合后装入层析柱，采用乙酸乙酯和丙酮体系洗脱4次，收集紫杉醇段；
[0047](6)结晶:将步骤(5)中的紫杉醇段浓缩蒸干，然后将其溶解在浓度为85%乙醇和水中，乙醇、紫砂醇段体积与水的体积比为5:1:11，搅拌12min使其混合均匀，然后静止冷却50h，再过滤结晶以及烘干，即得紫杉醇成品。
[0048]采用本发明的方法提取紫杉醇，提取率可达99%，产品中紫杉醇的纯度达96%。
[0049]以上所述，仅是本发明的较好实例，并非对本发明作任何形式上的限制，任何未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实例所作的任何简单修改、变换材料等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。
【权利要求】
1.一种利用超声波从红豆杉中提取紫杉醇的方法，其特征在于:包括以下步骤: (1)原料预处理:将红豆杉枝叶用40-50°C的温度烘干至水分含量为8-12%，然后将其粉碎为60-200目的粉末； (2)提取紫杉醇:向步骤(I)制得的粉末中加入粉末重量3-4倍的溶剂，搅拌使粉末充分溶解，然后将粉末与溶剂的混合物投入设有超声波振荡器的回流提取器中，在超声频率为28-32KHZ，功率为1400-1500kw的超声波作用下，加热回流提取4_5次，每次提取时间为24-30min，得提取液； (3)吸附:将步骤(2)中的提取液进行过滤，将滤液过大孔吸附树脂柱，大孔吸附树脂柱的用量为红豆杉粉末重量的10-12倍； (4)制备紫杉醇粗品:将紫杉醇段用清水洗脱，再用乙醇洗脱，乙醇的体积为紫砂醇段体积的4-6倍，获得乙醇洗脱液，将该洗脱液减压蒸干即得紫杉醇粗品； (5)层析:将紫杉醇粗品、硅胶与二氯甲烷按照重量比为1:(1.8-2.2):(2.5-2.8)混合，然后采用文火烘干，将干燥后的混合物与硅胶按1:(3-4)混合后装入层析柱，采用乙酸乙酯和丙酮体系洗脱3-5次，收集紫杉醇段； (6)结晶:将步骤(5)中的紫杉醇段浓缩蒸干，然后将其溶解在乙醇和水中，乙醇、紫砂醇段体积与水的体积比为(4-6):1:(10-12)，搅拌10-15!^11使其混合均匀，然后静止冷却45-50h，再过滤结晶以及烘干，即得紫杉醇成品。
2.如权利要求1所述的利用超声波从红豆杉中提取紫杉醇的方法，其特征在于:所述步骤(I)中，将红豆杉枝叶用45°C的温度烘干至水分含量为10%，然后将其粉碎为80目的粉末。
3.如权利要求1所述的利用超声波从红豆杉中提取紫杉醇的方法，其特征在于:所述步骤(2)中，溶剂是乙醇乙酯和丙酮的混合物。
4.如权利要求3所述的利用超声波从红豆杉中提取紫杉醇的方法，其特征在于:所述乙醇乙酯和丙酮的重量比为10:8-12。
5.如权利要求1所述的利用超声波从红豆杉中提取紫杉醇的方法，其特征在于:所述步骤(2)中，溶剂是甲醇和二氯甲烷的混合物。
6.如权利要求5所述的利用超声波从红豆杉中提取紫杉醇的方法，其特征在于:所述甲醇和二氯甲烷的重量比为10:12-16。
7.如权利要求1所述的利用超声波从红豆杉中提取紫杉醇的方法，其特征在于:所述步骤(2)中，通过加热调节回流提取器内的温度为30-35°C。
8.如权利要求1所述的利用超声波从红豆杉中提取紫杉醇的方法，其特征在于:所述乙醇的浓度为80-90%。
【文档编号】C07D305/14GK104402845SQ201410676291
【公开日】2015年3月11日 申请日期:2014年11月21日 优先权日:2014年11月21日
【发明者】朱艳玲, 卢连伟 申请人:朱艳玲