专利名称：一种联合制备香菇嘌呤和香菇多糖的方法
技术领域：
本发明属于天然药物提取技术领域，具体涉及ー种联合制备香菇嘌呤和香菇多糖的方法。
背景技术：
香菇又名香椹、香信，是著名的食用兼药用真菌，早在一千多年前就开始采集利用。香菇为补偿维生素的要剂，预防佝偻病，并治贫血。香菇含有多种有效药用成分，所含麦角留醇(维生素原，其含量比一般食物高)被人体吸收后，在光照下能转变为维生素，可增强人体的抵抗力，井能促进儿童骨骼和牙齿的生长，预防佝偻病。香菇所含的香菇素(即香菇嘌呤)，具有降低血中胆固醇的作用，可预防因动脉硬化引起的冠心病、高血压等中老 年人常见病，此外还具有抗病毒、抗变效应、防脱发作用和解毒作用。香菇多糖是香菇中的重要药用成分，具有较强的抗肿瘤活性。香菇多糖能刺激机体的免疫系统，使免疫功能得到恢复和提高，从而起到防癌和抗癌作用。目前国内提取香菇多糖的主要方法有水提醇沉法、盐析法、超滤法、酶法、复合酶解法、色谱法等。传统的提取分离香菇嘌呤的方法有热水浸提法、甲醇热提法和こ醇热提法，提取后再经去蛋白、过柱、洗脱处理。孙培龙等采用75%こ醇为溶媒，固液比为I : 10，回流萃取的温度为微沸，经浓缩，纸电泳分离得到香菇嘌呤。这些方法大多操作繁复、周期长、能耗大、产品纯度低。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服现有提取制备方法的不足，提供ー种联合制备香菇嘌呤和香菇多糖的方法。为实现上述目的，本发明采用如下技术方案一种联合制备香菇嘌呤和香菇多糖的方法，其特征在于包括以下操作步骤(I)提取将干香菇子实体粉碎，加入10-15倍量(V/W)碱水溶液，超声提取2-3次，每次l_3h，过滤，合并提取液；(2)大孔树脂富集将上述提取液浓缩，调PH8-9，上大孔树脂柱吸附，依次用水和60-70%こ醇溶液洗脱，合并水洗液和下柱液，浓缩，加こ醇沉淀，醇沉浓度为65-80%，静置，滤出沉淀，真空干燥即得香菇多糖，收集醇洗脱液；(3)阳离子交換树脂纯化将上述醇洗脱液浓缩至无醇味，调PH4-5，上阳离子交换树脂，先用水洗脱，再用4%氨水溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩，放置结晶，滤出结晶，干燥即得香菇嘌呤。所述步骤(I)中的碱水溶液为饱和石灰水，超声提取频率为25KHz。所述步骤(2)中的大孔树脂可选AB-8、HPD-450、NKA-9、HPD-800中的ー种。所述步骤(3)中的阳离子交换树脂可选001X7、201X7、D001-CC中的ー种。综上所述，本发明存在以下优点
I、碱液提取可以除去大量杂质，超声提取效率高、周期短；2、利用大孔树脂和离子交换树脂分离效果好，处理能力大，脱色范围广，可以反复再生使用，工作寿命长，运行费用较低；3、本发明同时制备香菇嘌呤和香菇多糖，原料利用率高。为了进ー步说明本发明，下面给出本发明的具体实施例，但并不以此来限定本发明。
具体实施例方式实施例I将干香菇子实体粉碎，取1kg，加入10倍量(V/W)饱和石灰水溶液，超声提取2次，每次3h，超声提取频率为25KHz，过滤，合并提取液，将上述提取液浓缩，调pH8，上AB-8大孔树脂柱吸附，依次用5L水和3L60%こ醇溶液洗脱，合并水洗液和下柱液，浓缩，加こ醇沉淀，醇沉浓度为70%，静置，滤出沉淀，真空干燥即得香菇多糖；收集醇洗脱液，浓缩至无醇味，调pH4. 2，上201X7阳离子交换树脂，先用水洗脱至Molish反应阴性，再用3L4%氨水溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩，放置结晶，滤出结晶，干燥即得香菇嘌呤。实施例2将干香菇子实体粉碎，取1kg，加入15倍量(V/W)饱和石灰水溶液，超声提取2次，每次2h，超声提取频率为25KHz，过滤，合并提取液，将上述提取液浓缩，调pH9，上HPD-450大孔树脂柱吸附，依次用5L水和4L60%こ醇溶液洗脱，合并水洗液和下柱液，浓缩，加こ醇沉淀，醇沉浓度为65 %，静置，滤出沉淀，真空于燥即得香菇多糖；收集醇洗脱液，浓缩至无醇味，调PH4. 5，上001 X 7阳离子交换树脂，先用水洗脱至Molish反应阴性，再用4L4%氨水溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩，放置结晶，滤出结晶，干燥即得香菇嘌呤。实施例3将干香菇子实体粉碎，取1kg，加入13倍量(V/W)饱和石灰水溶液，超声提取3次，每次lh，超声提取频率为25KHz，过滤，合并提取液，将上述提取液浓缩，调pH8. 5，上NKA-9大孔树脂柱吸附，依次用4L水和3L60%こ醇溶液洗脱，合并水洗液和下柱液，浓缩，加こ醇沉淀，醇沉浓度为65%，静置，滤出沉淀，真空干燥即得香菇多糖；收集醇洗脱液，浓缩至无醇味，调pH4，上D001-CC阳离子交换树脂，先用水洗脱至Molish反应阴性，再用3. 5L4%氨水溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩，放置结晶，滤出结晶，干燥即得香菇嘌呤。实施例4将干香菇子实体粉碎，取1kg，加入12倍量(V/W)饱和石灰水溶液，超声提取3次，每次3h，超声提取频率为25KHz，过滤，合并提取液，将上述提取液浓缩，调pH8. 5，上HPD-800大孔树脂柱吸附，依次用5L水和3. 5L60%こ醇溶液洗脱，合并水洗液和下柱液，浓缩，加こ醇沉淀，醇沉浓度为70%，静置，滤出沉淀，真空干燥即得香菇多糖；收集醇洗脱液，浓缩至无醇味，调pH5，上201 X 7阳离子交换树脂，先用水洗脱至Molish反应阴性，再用3L4%氨水溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩，放置结晶，滤出结晶，干燥即得香菇嘌呤。实施例5 将干香菇子实体粉碎，取1kg，加入15倍量(V/W)饱和石灰水溶液，超声提取2次，每次2h，超声提取频率为25KHz，过滤，合并提取液，将上述提取液浓缩，调pH8，上AB-8大孔树脂柱吸附，依次用5L水和5L60%こ醇溶液洗脱，合并水洗液和下柱液，浓缩，加こ醇沉淀，醇沉浓度为80 %，静置，滤出沉淀，真空干燥即得香菇多糖；收集醇洗脱液，浓缩至无醇 味，调pH4，上001 X 7阳离子交换树脂，先用水洗脱至Molish反应阴性，再用2. 5L4%氨水溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩，放置结晶，滤出结晶，干燥即得香菇嘌呤。
权利要求
1.一种联合制备香菇嘌呤和香菇多糖的方法，其特征在于包括以下操作步骤 (1)提取将干香菇子实体粉碎，加入10-15倍量(V/W)碱水溶液，超声提取2-3次，每次l_3h，过滤，合并提取液； (2)大孔树脂富集将上述提取液浓缩，调PH8-9，上大孔树脂柱吸附，依次用水和60-70%乙醇溶液洗脱，合并水洗液和下柱液，浓缩，加乙醇沉淀，醇沉浓度为65-80%，静置，滤出沉淀，真空干燥即得香菇多糖，收集醇洗脱液； (3)阳离子交换树脂纯化将上述醇洗脱液浓缩至无醇味，调PH4-5，上阳离子交换树月旨，先用水洗脱，再用4%氨水溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩，放置结晶，滤出结晶，干燥即得香菇嘌呤。
2.根据权利要求I所述的一种联合制备香菇嘌呤和香菇多糖的方法，其特征在于所述步骤(I)中的碱水溶液为饱和石灰水，超声提取频率为25KHz。
3.根据权利要求I所述的一种联合制备香菇嘌呤和香菇多糖的方法，其特征在于所述步骤(2)中的大孔树脂可选AB-8、HPD-450、NKA-9、HPD-800中的一种。
4.根据权利要求I所述的一种联合制备香菇嘌呤和香菇多糖的方法，其特征在于所述步骤(3)中的阳离子交换树脂可选001X7、201X7、D001-CC中的一种。
全文摘要
本发明公开了一种联合制备香菇嘌呤和香菇多糖的方法，具体包括如下步骤将干香菇子实体粉碎，加碱液超声提取，过滤，得到提取液，调pH8-9，上大孔树脂富集，收集下柱液，依次用水和醇溶液洗脱，将水洗脱液和下柱液合并，浓缩，醇沉浓度为65-80％，滤出沉淀物，干燥即得香菇多糖；收集醇洗脱液，浓缩至无醇味，调pH4-5，上阳离子交换树脂，依次用水和4％氨水溶液洗脱，收集洗脱液浓缩，放置结晶，滤出结晶干燥即得香菇嘌呤。本发明工艺简单，产品纯度高，实现了香菇嘌呤和香菇多糖的联合制备。
文档编号C08B37/00GK102649792SQ20111004530
公开日2012年8月29日 申请日期2011年2月25日 优先权日2011年2月25日
发明者刘东锋, 李法庆 申请人:苏州宝泽堂医药科技有限公司