固相合成布舍瑞林的方法
【专利摘要】本发明提供了一种固相合成布舍瑞林的方法，由乙胺基载体树脂和Fmoc-Pro-OH出发，得到Fmoc-Pro-EtNH-supporting?Resin，然后依次偶联布舍瑞林的其它的保护氨基酸，裂解去除supporting?Resin，得到全保护肽，全保护肽经氢化脱保护、纯化，得到布舍瑞林。本发明所述的方法，省去了多肽乙胺基化的步骤，在简化产品合成工艺的操作方面，提供工艺稳定性方面，提供产品总体收率，降低成本方面都有较大突破。因此本发明的是提供一种高收率、低成本、反应条件温和、环境污染小、有利于实现产业化的布舍瑞林固相合成方法。
【专利说明】固相合成布舍瑞林的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种布舍瑞林的合成方法，尤其涉及一种纯度高、高收率的合成布舍瑞林的方法。
【背景技术】
[0002]布舍瑞林(Buserelin)是一种水溶性多肽类药物，为下丘脑分泌的天然促性腺激素释放激素(GnRH/LHRH)类似物，可促进黄体生成激素LH、促卵胞生成激素FSH和性激素分泌增加，药理效应为LHRH的20-170倍，长期给予布舍瑞林可以抑制绒促性素的生成，并抑制卵巢和睾丸类固醇的生成。布舍瑞林的主要临床应用包括姑息治疗激素依赖的前列腺癌(D期)、乳腺癌、无需手术治疗的子宫内膜异位症等疾病的治疗。
[0003]布舍瑞林结构为Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser (tBU) -Leu-Arg-Pro-NH-Et,现有的合成布舍瑞林的方法主要有两种:
[0004]第一种是片段缩合法，即将布舍瑞林拆分成几个片段(如两个)分别合成，所合成的各个裸肽片段在液相条件下进行偶联，如CN101735308A公开的4+5片段合成方法，先合成五片段 Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-OH 和四片段 D-Ser (tBU) -Leu-Arg-Pro-NHEt,然后缩合得到布舍瑞林。这种片段缩合方法的缺陷非常明显，工艺操作繁琐；更重要的是，片段偶联过程中，多肽发生消旋反应的现象比较严重；另外且最终收率较低。
[0005]第二种是全序列部分保护合成方法，即在固相合成过程中，对部分氨基酸侧链进行保护，并最终在液相中实现乙氨基化，此工艺虽然实现在固相载体上的全序列合成，但是由于采用的是部分保护，所以合成过程中引入的杂质较多，出产品的质量很差，纯化过程中较难分离，很难得到高质量的产品，且综合收率不高。
`[0006]CN101935339A公开了一种全保护合成布舍瑞林的方法，固相合成布舍瑞林后，裂解去除树脂，然后将全保护肽经过乙氨基化、裂解脱除保护基的步骤得到布舍瑞林，该方法无论是乙氨基化过程，在冰水浴条件下进行，不适于工业化操作。W02008/044890公开了一种合成布舍瑞林的方法，分别合成 Pro-NH-Et 和 Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser (tBU) -Leu-Arg-OH，然后偶联、去除保护基获得布舍瑞林；该方法先通过氨基酸偶联获得肽链，之后先脱除树脂，然后再偶联氨基酸Pro-NH-Et，实际操作过程中，工艺变化非常繁琐。
【发明内容】
[0007]针对现有技术中合成布舍瑞林的方法产率低、纯度低、和操作繁琐的问题，本发明提供了一种新的合成布舍瑞林的方法。
[0008]本发明提供了一种固相合成布舍瑞林的方法，步骤包括:
[0009]步骤I,提供如结构式(I)乙胺基载体树脂EtNH-Supporting Resin ；
[0010]
【权利要求】
1.一种固相合成布舍瑞林的方法，其特征在于，步骤包括: 步骤I，提供如结构式(I)乙胺基载体树脂EtNH-Supporting Resin ；
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述乙胺基载体树脂EtNH-SupportingResin中的polymer为聚苯乙烯。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述乙胺基载体树脂EtNH-Supporting Res in制备方法为:将氨基钠NH2Na溶液加入到溶胀的载体树脂中，5-40°C反应2-12h，反应后的树脂洗涤后与碘乙烷5-30°C反应2_12h。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2中偶联Fmoc-PiO-OH反应，在缩合剂存在下进行，所述缩合剂选自碳二亚胺类缩合剂、鎗盐类缩合剂、有机磷类缩合剂、以及其它任意能够用于促进羧酸与胺缩合的缩合剂中的任意一种或几种的组合。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2中偶联Fmoc-Pro-OH反应中，反应温度为10-50°C。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2中偶联Fmoc-Pro-OH反应中，Fmoc-Pro-OH与乙胺基载体树脂摩尔比为(1-10): I。
7.根据权利要求1、4-6中任意一项所述的方法，其特征在于，步骤2得到的NH2-Pro-EtHN-Supporting Resin, Pro 取代度为 0.6-0.9mmol/g。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤6的氢化反应，步骤5中酸条件为三氟乙酸存在条件下。
9.一种用于固相合成布舍瑞林的载体树脂，其特征在于，所述载体树脂为结构式(I)所示的乙胺基载体树脂
10.根据权利要求9所述的用于固相合成布舍瑞林的载体树脂，其特征在于，所述载体树脂中，乙胺基取代度为0.8-`1.0mmol/go
【文档编号】C08F212/08GK103554229SQ201310557778
【公开日】2014年2月5日 申请日期:2013年11月11日 优先权日:2013年11月11日
【发明者】沙乐, 崔贞亮, 孙慕懿, 顾声隆, 胡成良 申请人:宁波市三生药业有限公司