一种发状念珠藻胞外多糖的分离纯化方法与流程

文档序号:11803479阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种发状念珠藻胞外多糖的分离纯化方法,其特征在于以下步骤:

(1)发状念珠藻细胞经液体发酵培养后,发酵液经陶瓷膜过滤除菌;

(2)保温,在除菌后清液中加入一定量的活性炭和硅藻土处理脱色;

(3)板框过滤除去活性炭和硅藻土,清液经大孔吸附树脂进一步脱色除杂;

(4)收集吸附后清液经超滤膜浓缩,在浓缩液中加入无水乙醇沉淀制得粗多糖;

(5)粗多糖经水溶解后过阴离子离子交换树脂纯化,经洗脱剂解吸后,洗脱液进行真空低温浓缩;

(6)浓缩液加入无水乙醇再次进行沉淀,制得含量大于85%的发菜胞外多糖。

2.根据权利要求1中所述的发状念珠藻胞外多糖的分离纯化方法,其特征在于步骤(1)中过滤除菌所用陶瓷膜的孔径为500-1000nm,过滤温度≤35℃,过滤压力0.03~0.07MPa。

3.根据权利要求1中所述的发状念珠藻胞外多糖的分离纯化方法,其特征在于步骤(2)中所用活性炭为一种粉状竹炭,用量为0.5~2%(质量/体积);硅藻土目数为100~200目,用量为0.1~0.5%(质量/体积)。处理温度为40℃,时间为0.5h。

4.根据权利要求1中所述的发状念珠藻胞外多糖的分离纯化方法,其特征在于步骤(3)中所用大孔吸附树脂为一种苯乙烯骨架的芳香族大孔吸附树脂SD 300、LS 840、LS 850、LS 860中的任意一种。

5.根据权利要求1中所述的发状念珠藻胞外多糖的分离纯化方法,其特征在于步骤(4)中所用超滤膜截留分子量为10~50KD,操作压力0.3~0.6MPa,温度控制在35℃以下加入乙醇的终浓度为60~80%。

6.根据权利要求1中所述的发状念珠藻胞外多糖的分离纯化方法,其特征在于步骤(5)中所用阴离子交换树脂为DEAE-陶瓷/琼脂糖凝胶、Q-陶瓷/琼脂糖凝胶、DEAE 52中的任意一种。洗脱剂为0.5~2.0mol/L的NaCl溶液。

7.根据权利要求1中所述的发状念珠藻胞外多糖的分离纯化方法,其特征在于步骤(5)中洗脱液真空浓缩的温度为40~50℃,真空度为-0.08~-0.09MPa。

8.根据权利要求1中所述的发状念珠藻胞外多糖的分离纯化方法,其特征在于步骤(6)中浓缩液中加入无水乙醇的终浓度为70~90%。

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