本发明属于天然色素的提取技术领域，具体涉及一种从西瓜表皮提取叶绿素的方法。
背景技术：
我国西瓜种植技术在近几年中发展很快，但多数以销售西瓜为主，产品附加值低，经济效益不明显。西瓜最外边的硬皮中含有大量的天然叶绿素，可广泛应用在食品、药品等行业中；叶绿素衍生物在医药上具有促进伤口愈合、抗溃疡、抗肿瘤、抗微生物、防癌、保肝、抗贫血等多方面生物活性。
西瓜表皮中含有丰富的叶绿素，是很好的叶绿素来源。
叶绿素的目前主要提取方式为溶剂法加热浸提。叶绿素是一种脂溶性物质，热不稳定，见光分解，用加热浸提方法，时间较长，溶剂损耗较大，且加热容易对叶绿素造成破坏，对叶绿素的提取效率较低。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是提供一种以西瓜表皮为原料制备叶绿素的方法，该方法无需加热，叶绿素损失小，提取时间很短，避免了溶剂的大量损失，提取效率高。
本发明提供的技术方案是：一种从西瓜表皮提取叶绿素的方法，其特征在于该方法包括如下步骤：
(1) 将西瓜表皮粉碎打浆，冻干得西瓜表皮冻干粉；
(2) 将西瓜表皮冻干粉与95wt％乙醇混合，室温下，高速预处理，均质提取，过滤；
(3) 将过滤后的滤渣与95wt％乙醇混合，室温下，均质提取，过滤；
(4) 将步骤(2) 和(3) 的滤液离心，收集上清液，真空浓缩得浓缩液，浓缩液中固形物含量达到30％以上；
(5) 纯化 用 4-8倍浓缩液体积浓度为 75%-95% 丙酮与浓缩液搅拌均匀， 在 0-4℃下放置 0.5-2d，过滤去除滤饼，滤液浓缩回收丙酮后即得到叶绿素精品。
其中，所述高速预处理为以5000-10000 转/ 分钟处理5 分钟以上；步骤(2) 或(3)中的均质提取为以1000-4000 转/ 分钟处理10 分钟以上。
步骤(2)中高速预处理的时间为5-20 分钟；步骤(2) 或(3) 中均质提取的时间为10-60 分钟。
步骤(2)中高速预处理为以9000-10000转/ 分钟处理5-10 分钟，步骤(2) 和步骤(3) 所述的均质提取为以3000 转/ 分钟处理10-30 分钟。
步骤(2) 中，所述西瓜表皮冻干粉与所述95wt％乙醇的质量体积比为1g/mL ～ 1g/10mL，优选为1g/5mL ～ 1g/10mL ；步骤(3) 中，所述滤渣与所述95wt％乙醇的质量体积比为1g/mL ～ 1g/10mL，优选为1g/5mL ～ 1g/10mL。
在本发明优选的实施方式中，所述的高速预处理为以9000-10000 转/ 分钟处理5-10 分钟，步骤(2) 和步骤(3) 所述的均质提取为以3000 转/ 分钟处理10-30 分钟。
本发明中，所述高速预处理和所述均质提取均可在均质机中进行。
步骤(4) 中，所述离心的转速优选为200-2000 转/ 分钟，优选为1000 转/分钟。所述离心的时间优选为为5-30 分钟。
本发明所述的室温为本领域对室温的常规理解，一般指5-40℃。
在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件可任意组合，即得本发明各优选实例。
本发明使用的试剂、原料和设备皆市售可得，且所用化学试剂纯度至少均为食品级。
本发明的积极进步效果在于：
(1) 本发明西瓜表皮叶绿素的提取是在高剪切均质机的辅助下分两阶段进行，第一阶段的高速预处理将竹叶的小颗粒变的更小，使其更容易均匀地分布于溶液中，达到提取效果比较均匀，提取比较彻底；而较低速率下的均质提取阶段，也较静置提取或其他提取方法具有更高的叶绿素提取率。
(2)本发明的提取工艺简单，对生产设备要求低，提取效率高，提取时间短，明显优于传统溶剂提取法。并且所述的提取工艺能够在室温下进行，不需要进行加热提取。
(3)本发明工艺提取的叶绿素水溶性好，产品外观色泽好，性状稳定，适于作为食品添加剂和保健食品原料。
(4)本发明实现了对西瓜的综合利用，大大提高了西瓜的经济价值，制备过程中产生的滤渣可用来发酵为肥料。
具体实施方式
下面用实施例来进一步说明本发明，但本发明并不受其限制，实施例中的原料均为常规市售产品。
实施例1
1) 将西瓜表皮粉碎打浆，冻干得西瓜表皮冻干粉，称取上述西瓜表皮冻干粉100 克，备用。
2) 加入95wt％乙醇( 西瓜表皮冻干粉∶ 95wt％乙醇＝ 1g ∶ 5mL)，于室温下，以10000 转/ 分钟高速预处理5 分钟，再以3000转/ 分钟均质提取30 分钟后过滤。
3) 收集滤液，在滤渣中加入95wt％乙醇( 滤渣∶ 95wt％乙醇＝ 1g ∶ 5mL)，于室温下，以3000 转/ 分钟均质提取30 分钟后过滤。
4) 合并两次滤液，在室温下，以1000 转/ 分钟离心10 分钟，去沉淀，收集上清后进行真空浓缩得浓缩液，浓缩液中固形物含量达到30％。
(5) 用 4倍浓缩液体积浓度为95% 丙酮与浓缩液搅拌均匀， 在 0-4℃下放置 2d，过滤去除滤饼，滤液浓缩回收丙酮后即得到叶绿素精品，干燥得到桑叶叶绿素3.6 克，颜色：绿色，色价22.8。
实施例2
1) 将西瓜表皮粉碎打浆，冻干得西瓜表皮冻干粉，称取上述西瓜表皮冻干粉100 克，备用。。
2) 加入95wt％乙醇( 西瓜表皮冻干粉∶ 95wt％乙醇＝ 1g ∶ 7mL)，于室温下，以10000 转/ 分钟高速预处理10 分钟，再以3000 转/ 分钟均质提取20 分钟后过滤。
3) 收集滤液，在滤渣中加入95wt％乙醇( 滤渣∶ 95wt％乙醇＝ 1g ∶ 7mL)，于室温下以3000 转/ 分钟均质提取20 分钟后过滤。
4) 合并两次滤液，在室温下，以1000 转/ 分钟离心15 分钟，去沉淀，收集上清后进行真空浓缩，浓缩液中固形物含量达到35％。
5) 用8倍浓缩液体积浓度为75% 丙酮与浓缩液搅拌均匀， 在 0-4℃下放置 0.5d，过滤去除滤饼，滤液浓缩回收丙酮后即得到叶绿素精品，干燥得到桑叶叶绿素3.7 克，颜色：绿色，色价25.4。
实施例3
1) 将西瓜表皮粉碎打浆，冻干得西瓜表皮冻干粉，称取上述西瓜表皮冻干粉100 克，备用。
2) 加入95wt％乙醇( 西瓜表皮冻干粉∶ 95wt％乙醇＝ 1g ∶ 10mL)，于室温下，以10000 转/ 分钟高速预处理10 分钟，再以3000 转/ 分钟均质提取10 分钟后过滤。
3) 收集滤液，在滤渣中加入95wt％乙醇( 滤渣∶ 95wt％乙醇＝ 1g ∶ 10mL)，于室温下以3000 转/ 分钟均质提取10分钟后过滤。
4) 合并两次滤液，在室温下，以1000 转/ 分钟离心15 分钟，去沉淀，收集上清后进行真空浓缩，浓缩液中固形物含量达到40％。
5) 用6倍浓缩液体积浓度为85% 丙酮与浓缩液搅拌均匀， 在 0-4℃下放置 0.5d，过滤去除滤饼，滤液浓缩回收丙酮后即得到叶绿素精品，干燥得到桑叶叶绿素3.9 克，颜色：绿色，色价24.6。