技术领域本发明属于生物医药领域，涉及多潘立酮的新用途，具体涉及多潘立酮的药物组合物及其在生物医药中的应用。
背景技术：
多潘立酮的化学名称为5-氯-1-[1-[3-(2,3-二氢-2-氧代-1H-苯并咪唑-1-基)丙基]哌啶-4-基]-1,3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮，为胃肠促动力药类非处方药药品。迄今为止，尚未见多潘立酮及其药物组合物与前列腺增生的相关性报道。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种多潘立酮的药物组合物，该药物组合物中含有多潘立酮和一种结构新颖的天然产物，多潘立酮和该天然产物可以协同治疗前列腺增生。本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：一种具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，一种多潘立酮的药物组合物，包括多潘立酮、如权利要求1所述的化合物(Ⅰ)和药学上可以接受的载体，制备成需要的剂型。进一步地，药学上可以接受的载体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体或润滑剂。进一步地，所述剂型包括片剂、胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、喷雾剂、滴剂或贴剂。上述化合物(Ⅰ)的制备方法，包含以下操作步骤：(a)将狗脊粉碎，用85～95％乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中正丁醇取物用大孔树脂除杂，先用35％乙醇洗脱8个柱体积，再用90％乙醇洗脱12个柱体积，收集90％洗脱液，减压浓缩得90％乙醇洗脱浓缩物；(c)步骤(b)中90％乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为120:1、60:1、30:1和15:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到4个组分；(d)步骤(c)中组分3用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为40:1、30:1和10:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；(e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为85％的甲醇水溶液等度洗脱，收集14～18个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到化合物(Ⅰ)。进一步地，化合物(Ⅰ)的制备方法中，步骤(a)用90％乙醇热回流提取，合并提取液。进一步地，化合物(Ⅰ)的制备方法中，所述大孔树脂为D101型大孔吸附树脂。进一步地，化合物(Ⅰ)的制备方法中，步骤(a)中用二氯甲烷代替乙酸乙酯进行萃取，得到二氯甲烷萃取物。上述化合物(Ⅰ)在制备治疗前列腺增生的药物中的应用。上述多潘立酮的药物组合物在制备治疗前列腺增生的药物中的应用。本发明的优点：本发明提供的多潘立酮的药物组合物中含有多潘立酮和一种结构新颖的天然产物，多潘立酮和该天然产物单独作用时，对前列腺增生具有治疗作用；二者联合作用时，对前列腺增生的治疗效果进一步提高，可以开发成治疗前列腺增生的药物。具体实施方式下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范围。实施例1：化合物(Ⅰ)分离制备及结构确证分离方法：(a)将狗脊(2kg)粉碎，用90％乙醇热回流提取(15L×3次)，合并提取液，浓缩至无醇味(3L)，依次用石油醚(3L×3次)、乙酸乙酯(3L×3次)和水饱和的正丁醇(3L×3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用D101型大孔树脂除杂，先用35％乙醇洗脱8个柱体积，再用90％乙醇洗脱12个柱体积，收集90％洗脱液，减压浓缩得90％乙醇洗脱浓缩物；(c)步骤(b)中90％乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为120:1(11个柱体积)、60:1(9个柱体积)、30:1(9个柱体积)和15:1(8个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到4个组分；(d)步骤(c)中组分3用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为40:1(6个柱体积)、30:1(8个柱体积)和10:1(6个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；(e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为85％的甲醇水溶液等度洗脱，收集14～18个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到化合物(Ⅰ)(HPLC归一化纯度大于98％)。结构确证：白色无定形粉末，HR-ESI-MS显示[M+Na]+为m/z285.1108，结合核磁特征可得分子式为C15H18O4，不饱和度为7。核磁共振氢谱数据δH(ppm，CDCl3，500MHz)：H-3(5.83，br，s)，H-5(2.87，br，d，J＝12.7Hz)，H-6(1.35，m)，H-6(2.11，m)，H-7(2.63，br，t，J＝12.1Hz)，H-8(1.62，m)，H-8(1.75，m)，H-9(1.75，m)，H-9(2.43，m)，H-13(6.38，br，s)，H-13(6.73，br，s)，H-14(1.19，s)，H-15(1.95，s)；核磁共振碳谱数据δC(ppm，CDCl3，125MHz)：181.6(C，1-C)，182.5(C，2-C)，124.9(CH，3-C)，176.5(C，4-C)，42.3(CH，5-C)，29.7(CH2，6-C)，39.6(CH，7-C)，26.1(CH2，8-C)，34.2(CH2，9-C)，47.5(C，10-C)144.3(C，11-C)，171.3(C，12-C)，125.6(CH2，13-C)，17.4(CH3，14-C)，23.3(CH3，15-C)。红外波谱表明该化合物含有羟基(3320cm-1)，羰基(1646cm-1)和烯烃键(1620cm-1)。13C-NMR、DEPT和HSQC谱中显示有15个碳信号，包括两个甲基δC17.4，23.3；四个亚甲基(一个烯烃碳)δC29.7，26.1，34.2，125.6；三个次甲基(一个烯烃碳)δC124.9，42.3，39.6；以及六个季碳(三个羰基碳，一个烯烃碳)δC181.6，182.5，176.5，47.5，144.3，171.3；以上功能结构再结合不饱和数表明该化合物为两环结构。1H-NMR谱显示两个甲基质子信号δH-141.19(3H，s)与δH-151.95(3H，s)，一个烯属亚甲基质子信号δH-136.38(1H，br，s)与δH-136.73(1H，br，s)，一个烯属次甲基质子信号δH-35.83(1H，br，s)。在HSQC谱中，所有质子信号皆归属到了相应的碳，据1H-1HCOSY谱中H2-6/H-7/H2-8/H2-9相关信号，结合HMBC谱中H-3与C-1、C-2、C-4和C-5，H-7与C-11，H2-13与C-11，H3-14与C-1、C-5和C-9，H3-15与C-4和C-5相关信号，可以构建该化合物的连接方式。H-5与H2-6的偶合常数JH-5＝12.7Hz以及H2-6与H-7的偶合常数JH-7＝12.1Hz说明H-5与H-7在该化合物椅式构象中皆为直立键。此外，进一步通过分析NOESY谱中H-5与H3-14不存在相关信号，可以确证H3-14为β构型。综合氢谱、碳谱、HMBC谱和NOESY谱，以及文献关于相关类型核磁数据，可基本确定该化合物如下所示，立体构型进一步通过ECD试验确定，理论值与实验值基本一致。该化合物化学式及碳原子编号如下：实施例2：药理作用本实施例采用昆明种小鼠去势，连续3周sc丙酸睾酮5mg·kg-1·d-1，造前列腺增生模型，观察药物对前列腺增生的治疗作用。1、材料与方法1.1动物小鼠，昆明种，雄性，20～23g，80只，由河北省实验动物中心提供。1.2试剂与样品多潘立酮购自中国药品生物制品检定所。化合物(Ⅰ)自制，制备方法见实施例1。戊巴比妥钠，中国医药集团上海化学试剂公司；注射用青霉素钠，华北制药股份有限公司；丙酸睾酮注射液，上海通用药业股份有限公司；癃闭舒胶囊，石家庄科迪药业有限公司；小鼠睾酮(T)ELISA检测试剂盒，北京科美东雅生物技术有限公司；小鼠雌二醇(E2)ELISA检测试剂盒，北京科美东雅生物技术有限公司。1.3仪器FA(N)/JA(N)系列电子天平，上海民桥精密仪器有限公司；TGL-16G高速冷冻离心机，上海安亭科学仪器厂；电动匀浆机，宁波新芝生物科技股份有限公司；Sn-895B型智能放免γ测量仪：上海原子核研究所四环仪器一厂。1.4小鼠分组及模型制备取体重20～23g雄性小鼠80只，随机取10只作为空白对照组，做假手术处理；其余小鼠造前列腺增生模型，小鼠称重后腹腔注射2％戊巴比妥钠(30mg·kg-1)麻醉，常规消毒皮肤，于无菌条件下经阴囊摘除双侧睾丸，残端处结扎，缝合皮肤，肌内注射青霉素20万u·kg-1；手术后第3天，取去势成功、状态良好的小鼠50只，随机分为5组用于造前列腺增生模型，分别为模型对照组、阳性对照组(癃闭舒胶囊混悬液450mg·kg-1)和多潘立酮组(80mg·kg-1)、化合物(Ⅰ)组(80mg·kg-1)、多潘立酮与化合物(Ⅰ)组合物组【40mg·kg-1多潘立酮+40mg·kg-1化合物(Ⅰ)】，连续3周每日sc丙酸睾酮5mg·kg-1(溶于大豆油)造模，空白组注射等量溶媒。于造模型第1天，模型对照组ig生理盐水；阳性对照组ig癃闭舒胶囊混悬液(450mg·kg-1)；多潘立酮组、化合物(Ⅰ)组、多潘立酮与化合物(Ⅰ)组合物组ig上述剂量的药物，给药体积均为20mL·kg-1；空白对照组灌服同体积的生理盐水；每日给药1次，连续给药3周。于末次给药后2h(禁食不禁水12h)，小鼠称重后眼眶取血，离心，分离血清，测血清中T，E2水平；然后脱颈椎处死小鼠，迅速取前列腺组织，对各组小鼠前列腺腺体进行立体计量学测定，测定腺体的体密度。1.5血清中T的测定用小鼠TELISA检测试剂盒测定血清中T的含量：试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)，往预先包被T抗体的包被微孔中，依次加入标本、对照品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的T呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(A)，计算样品浓度，即得到小鼠血清中T的含量。1.6血清中E2的测定用小鼠E2ELISA检测试剂盒测定血清中雌二醇的含量：试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)，往预先包被E2抗体的包被微孔中，依次加入标本、对照品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的E2呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定A，计算样品浓度，即得到小鼠血清中E2的含量。1.7前列腺腺体的体密度测定采用通用立体计量学测定方法，应用测试格点分析法，计算腺体上的交叉点数与参照系中的交叉点数的百分比，为该组织中腺体的体密度(Vv)。1.8统计学方法实验数据采用SPSS13.0统计软件处理。数据以表示，计量资料组间比较采用单因素方差分析。P＜0.05有统计学意义。2、实验结果2.1对小鼠前列腺增生模型血清T、E2水平的影响与空白对照组比，模型组小鼠血清中T水平显著升高(P＜0.01)，E2水平显著降低(P＜0.01)，说明造模成功。和模型对照组相比，多潘立酮与化合物(Ⅰ)组合物组及阳性对照组小鼠血清中T水平显著降低、E2水平显著升高(P＜0.01)；与模型对照组比，多潘立酮组、化合物(Ⅰ)组小鼠血清中T水平降低、E2水平升高(P＜0.05)。结果见表1。2.2对前列腺增生模型小鼠前列腺腺体的体密度的影响与空白对照组比，模型组前列腺腺体体密度显著升高(P＜0.01)，说明造前列腺增生模型成功。与模型对照组比，多潘立酮组、化合物(Ⅰ)组小鼠前列腺腺体的体密度降低(P＜0.05)；和模型对照组相比，多潘立酮与化合物(Ⅰ)组合物组、阳性对照组小鼠前列腺腺体的体密度显著降低(P＜0.01)。结果见表1。表1对小鼠前列腺增生模型血清睾酮、雌二醇水平及前列腺腺体密度的影响本实验采用小鼠去势后皮下注射丙酸睾酮成功建立前列腺增生模型，小鼠去势后，前列腺迅速萎缩，再给予外源性雄激素，可造成动物体内性激素水平紊乱，使前列腺发生增生。睾酮(T)是人体内主要的雄激素，在5α-还原酶作用下变为双氢睾酮(DHT)，前列腺内的DHT浓度增加可导致腺体增生。碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)通过DHT的作用增加释放，促前列腺间质增生，刺激前列腺上皮细胞生长的表皮细胞生长因子(EGF)与血浆中雄激素的含量呈正相关，导致前列腺的增生，造成前列腺增生模型。雌雄激素比例的变化是前列腺增生的关键诱因，血清中睾酮、雌二醇水平对反应前列腺增生状况有重要意义。前列腺湿重及前列腺指数是反映前列腺增生程度最客观的指标之一，前列腺组织形态是确定是否增生的关键；前列腺增生是慢性病，长期的病理变化可能会累及相关脏器。前列腺增生可能会累及机体免疫功能，胸腺的组织形态学变化及其淋巴细胞的个数可有效反应前列腺增生状况。上述结果表明，多潘立酮、化合物(Ⅰ)单独作用时，可以治疗前列腺增生；多潘立酮和化合物(Ⅰ)联合作用时，对前列腺增生的治疗效果进一步提高，可以开发成治疗前列腺增生的药物。上述实施例的作用在于说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和保护范围。