本发明涉及一种牛乳酶解蛋白多肽的制作方法。
背景技术：
牛乳通常是指母牛正常分娩后分泌挤得的乳汁，因其营养齐全、蛋白质丰富而受到人们的青睐。然而牛乳蛋白理化特性又不同于人乳蛋白，服用后遇酸易凝固，不易被婴幼儿消化吸收。此外，部分牛乳蛋白会使人体产生过敏等不良后果。人们一般通过将牛乳蛋白彻底酶解为多肽和氨基酸以解决这一问题。
近年来,科学发现牛乳中的乳球蛋白、乳白蛋白和乳酪蛋白的某些肽链片段有重要的生物学功能，这说明牛乳的某些生物学作用是通过活性多肽体现的。因此，将牛乳中的蛋白质酶解为多肽，可使牛乳充分地被人体吸收，同时最大限度地保留牛乳的生物活性, 促进人体的生长、发育、免疫调节和新陈代谢。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种牛乳酶解蛋白多肽的制作方法，将牛乳中的蛋白质彻底酶解为多肽，同时最大限度地保留牛乳的生物活性。
为了实现本发明的目的，采用如下技术方案：
一种牛乳酶解蛋白多肽的制作方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）用乙醇或乙酸洗涤牛乳，脱去脂肪；
（2）配制牛乳液，调节溶液PH值至6-7；
（3）向牛乳液中加入木瓜蛋白酶进行第一次酶解,得到一次牛乳酶解液；
（4）将所述一次牛乳酶解液的PH值调到8.9-9.1后加入碱性蛋白酶进行第二次酶解，得到多肽生成液；
（5）将多肽生成液经中空纤维超滤膜分离后进行真空干燥，制成牛乳酶解蛋白多肽。
进一步地，所述步骤（1）脱去牛乳中的脂肪是向新鲜牛乳中加入一定量95%的乙醇，以2000r/min离心10-15min后静置，分离出的沉淀即为脱脂牛乳。
进一步地，所述步骤（2）中牛乳液的制作方法为：将脱脂牛乳溶解在0.05mol/L的三羟甲基氨基甲烷（Tris）缓冲液中。
进一步地，在所述牛乳液中加入少量的叠氮化钠。
进一步地，所述步骤（3）中木瓜蛋白酶的反应条件为：PH值为6-7，温度为55-65℃，反应时间90-120min。
进一步地，所述步骤（4）中碱性蛋白酶的反应条件为：PH值为8.9-9.1，温度为58-64℃，反应时间90-120min。
进一步地，所述步骤（5）中对多肽生成液做中空纤维超滤膜分离，超滤膜分子量≤4000。
本发明的有益效果为：采用木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶对牛乳蛋白进行酶解，可加快蛋白质的水解速度，并彻底将其酶解为N/P较小的多肽，利于人体吸收，而且木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶易得，成本较低。
具体实施方式
下面对本发明作进一步阐述：
一种牛乳酪蛋白酶解CPPs的制作方法，包括以下步骤：
（1）取新鲜牛乳，加入一定量95%的乙醇洗涤，以2000r/min离心10-15min后静置，分离出沉淀脱脂牛乳。
（2）将脱脂牛乳溶解在0.05mol/L的三羟甲基氨基甲烷（Tris）缓冲液中，调节溶液PH值至6-7，为了防止牛乳蛋白变质，可在溶液中加入少量的叠氮化钠。
（3）向步骤（2）得到的牛乳液中加入木瓜蛋白酶，将其置于55-65℃水浴中反应，反应90-120min后，将反应液置于110℃水浴中加热15min，使酶解反应终止。反应液冷却至室温后，在10000r/min的条件下离心20min，取上清液即一次牛乳酶解液。
（4）向步骤（3）得到的一次牛乳酶解液中加碱性蛋白酶，调节PH值为8.9-9.1，将其置于58-64℃水浴中反应，反应90-120min后，将反应液置于90℃水浴中加热15min，使酶解反应终止。反应液冷却至室温后，在10000r/min的条件下离心20min，取上清液即多肽生成液。
（5）将多肽生成液经中空纤维超滤膜分离后进行真空干燥，制成牛乳酶解蛋白多肽，其中超滤膜分子量≤4000。