本发明属于结冷胶提取技术领域，具体涉及一种非透明型低酰基结冷胶的提取方法。
背景技术：
结冷胶(Gellan gum)是近年来最有发展前景的微生物多糖之一，是继黄原胶之后又一能广泛应用于食品工业的微生物代谢胶。结冷胶有着用量低、透明度高、风味释放性好、耐酸、耐酶等优点。由于结冷胶优越的凝胶性能，在食品、制药、化工等领域有着广泛的应用前景，目前已逐步代替琼脂、卡拉胶使用。在食品工业中，结冷胶主要作为增稠剂、稳定剂，可用于饮料、面包、乳制品、肉制品、面条、糕点、饼干、起酥油、速溶咖啡、鱼制品、雪糕、冰淇淋等食品中。
目前，在食品工业等领域中，透明型低酰基结冷胶的应用更为常见，而非透明型低酰基结冷胶产品的应用未得到应有的认识，事实上非透明型低酰基结冷胶相对于透明型低酰基结冷胶具有低成本、工艺简单的优势，特别适合用于对透明度没有要求的产品中。
但是关于非透明型低酰基结冷胶生产工艺开发较少，如何开发出一种非透明型低酰基结冷胶的生产工艺是现在急待解决的技术问题。
技术实现要素：
为了克服现有技术的缺陷，本发明提供了一种非透明型低酰基结冷胶的提取方法，该方法减少了加工环节，降低了结冷胶的生产成成本，并且具备发酵产胶量和收率高的优点。
本发明是通过如下技术方案来实现的：
一种非透明型低酰基结冷胶的提取方法，其包括如下步骤：步骤1)发酵，步骤2)发酵液预处理，步骤3)脱水处理，步骤4)醇溶，步骤5)脱酰处理，步骤6)絮凝，步骤7)脱水和压榨，步骤8)粉碎，步骤9)干燥。
具体地，所述方法包括如下步骤：
步骤1)发酵：将少动鞘氨醇单孢菌CCTCCNo.M206058和少动鞘脂单胞菌液ATCC 31461分别培养至浓度均为1×108个/mL，然后按照2∶1的体积比混合得到混合菌液，将混合菌液按照8％的接种量接入发酵罐中培养，温度31℃，PH值7.2，培养时间56小时，得到发酵液；
步骤2)发酵液预处理：将发酵液中加入1.5wt％的氯化钠，搅拌均匀，用硫酸调节pH值至2.0，得到结冷胶絮凝物；
步骤3)脱水处理：将步骤2)絮凝物利用带式压滤脱水机脱水处理，得到结冷胶湿纤维料；
步骤4)醇溶：将步骤3)得到的纤维料用2.6倍的90％(v/v)的乙醇溶解，调节pH值至7.0，搅拌2h，利用带式压滤脱水机进行脱水处理，得到湿结冷胶纤维料；
步骤5)脱酰处理：将步骤4)所得湿结冷胶纤维料加入20倍体积的去离子水，加热到95℃溶解，待完全溶解后调节温度90℃，利用氢氧化钠调节pH至10.0，搅拌脱酰6min，得到低酰基结冷胶溶液；
步骤6)絮凝：将步骤5)得到的低酰基结冷胶溶液加入2.5倍体积的90％的乙醇搅拌絮凝30min，得到非透明型低酰基结冷胶絮凝物；
步骤7)脱水和压榨：将步骤6)得到的非透明型低酰基结冷胶絮凝物利用带式压滤脱水机脱水，脱水后用卧螺式压榨机压榨到水分含量为55wt％的湿品非透明型低酰基结冷胶纤维料；
步骤8)粉碎：将步骤7)得到纤维料粉碎成长度≤1cm的非透明型低酰基结冷胶破碎料；步骤9)干燥：将步骤8)得到的破碎料利用真空带式干燥机在温度63℃，真空度0.08Mpa，干燥2.5h后，进行粉碎、包装，得到非透明型低酰基结冷胶成品。
所述发酵罐培养基的组分为：葡萄糖30g，玉米浆12g，硫酸铵8g，豆粕2g，鱼骨粉3g，柠檬酸0.2g，磷酸二氢钾0.2g，硫酸镁0.1g，蒸馏水1000ml。
按照上述任其一所述方法制备的非透明型低酰基结冷胶。
本发明具有以下优点和有益效果：
本发明工艺通过加碱金属盐和酸使发酵液产生絮凝，利用带式压滤脱水机脱水处理，去除了发酵液中的水分和部分杂质；本发明非透明低酰基结冷胶在生产过程中不需经过澄清处理，减少了加工环节，降低了结冷胶的生产成；本发明采用低级醇提取结冷胶，操作简单，安全卫生，产品收率高；本发明将带式压滤脱水机应用于结冷胶絮凝物脱水，具有自动化程度高、脱水效果好、不跑料的优点；本发明将两种少动鞘脂单胞菌合理配伍，联合发酵，相互促进，大大提高了发酵效率。
具体实施方式
以下将采用具体的实施例来对本发明作进一步的解释，但是不应当看作是对本发明创新精神的限制。
实施例1
一种非透明型低酰基结冷胶的提取方法，其包括如下步骤：
步骤1)发酵：将少动鞘氨醇单孢菌CCTCCNo.M206058(CN1970738A)和少动鞘脂单胞菌液ATCC 31461分别培养至浓度均为1×108个/mL，然后按照2∶1的体积比混合得到混合菌液，将混合菌液按照8％(体积比)的接种量接入发酵罐中培养，温度31℃，PH值7.2，培养时间56小时，得到发酵液；其中，发酵罐培养基的组分为：葡萄糖30g，玉米浆12g，硫酸铵8g，豆粕2g，鱼骨粉3g，柠檬酸0.2g，磷酸二氢钾0.2g，硫酸镁0.1g，蒸馏水1000ml；
步骤2)发酵液预处理：将发酵液中加入1.5wt％的氯化钠，搅拌均匀，用硫酸调节pH值至2.0，得到结冷胶絮凝物；
步骤3)脱水处理：将步骤2)絮凝物利用带式压滤脱水机脱水处理，得到结冷胶湿纤维料；
步骤4)醇溶：将步骤3)得到的纤维料用2.6倍的90％(v/v)的乙醇溶解，调节pH值至7.0，搅拌2h，利用带式压滤脱水机进行脱水处理，得到湿结冷胶纤维料；
步骤5)脱酰处理：将步骤4)所得湿结冷胶纤维料加入20倍体积的去离子水，加热到95℃溶解，待完全溶解后调节温度90℃，利用氢氧化钠调节pH至10.0，搅拌脱酰6min，得到低酰基结冷胶溶液；
步骤6)絮凝：将步骤5)得到的低酰基结冷胶溶液加入2.5倍体积的90％的乙醇搅拌絮凝30min，得到非透明型低酰基结冷胶絮凝物；
步骤7)脱水和压榨：将步骤6)得到的非透明型低酰基结冷胶絮凝物利用带式压滤脱水机脱水，脱水后用卧螺式压榨机压榨到水分含量为55wt％的湿品非透明型低酰基结冷胶纤维料；
步骤8)粉碎：将步骤7)得到纤维料粉碎成长度≤1cm的非透明型低酰基结冷胶破碎料；步骤9)干燥：将步骤8)得到的破碎料利用真空带式干燥机在温度63℃，真空度0.08Mpa，干燥2.5h后，进行粉碎、包装，得到非透明型低酰基结冷胶成品。
实施例2
实施例1制备的非透明低酰基结冷胶的性能参数：以100L发酵液为例。
对照组：仅采用CCTCCNo.M206058单菌株发酵生产结冷胶，其他步骤同实施例1；实验组为实施例1制备的结冷胶。分子量测定(酸碱滴定法测定结冷胶中酰基的含量)：对照组低酰基结冷胶平均分子量均在：73.7万道尔顿，实验组的结冷胶的平均分子量均在：74.1万道尔顿。
凝胶强度的测定：用TA.TX21物性测试仪进行测定透光率的测定；
透光率的测定：称取0.5样品，加蒸馏水100ml，将烧杯置于80摄氏度水浴中，样品溶解后加入2.7％的氯化钙溶液2ml，补充蒸发水量至原体积，趁热将胶溶液倾入比色皿，立即放入20摄氏度的恒温箱中放置15分钟，用分光光度计在497nm处测定透光率，用蒸馏水对照。具体见表1：
表1
最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的若干具体实施例。显然，本发明不限于以上实施例，还可以有许多变形。能从本发明公开的内容直接导出或者联想到的所有变形均应认为是本发明的保护范围。