基于金纳米颗粒探针检测DNA甲基化程度的试剂盒及其检测方法与应用与流程

文档序号:19431274发布日期:2019-12-17 16:50阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种基于金纳米颗粒探针检测dna甲基化程度的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括金纳米颗粒探针,所述金纳米颗粒探针包括金纳米颗粒和进行甲基化特异性聚合酶链反应的上游引物,所述上游引物的5’端修饰有巯基,所述上游引物通过所述巯基与所述金纳米颗粒偶联,所述金纳米颗粒的粒径为10~15nm;所述dna为pax1基因,所述上游引物对应于pax1基因启动子区;所述上游引物为sh-5’cggttagacgaattttttttaatcggatga-3’;所述试剂盒还包括下游引物,所述下游引物的序列为5’-cccgcgaccccaaac-3’;

所述金纳米颗粒探针的制备方法包括如下步骤:

1)将所述上游引物和金纳米颗粒在室温条件下孵育,得到第一混合物;其中,所述上游引物与所述金纳米颗粒的摩尔比为95~105:1,所述孵育时间为15~20h;

2)向所述第一混合物中加入tris-盐酸缓冲液和nacl溶液后在避光条件下孵育,得到第二混合物;其中,所述孵育时间为20~30h;

3)将所述第二混合物进行离心,得到金纳米颗粒探针。

2.权利要求1所述的试剂盒或权利要求1中所述的金纳米颗粒探针在制备检测dna甲基化程度的系统中的应用。

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