一种黄褐牛肝菌中的抗氧化多糖及其制备方法及用途与流程

文档序号:12573326阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种黄褐牛肝菌中的抗氧化多糖,其特征在于:所述的抗氧化多糖提取自黄褐牛肝菌,命名为HNG2,HNG2为淡黄色粉末,是一种同时含有α-和β-两种糖苷键构型的多糖,分子量为177KDa,由岩藻糖、木糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖5种单糖组成,比例为0.36:0.8:30:2:1.6。

2.一种黄褐牛肝菌中的抗氧化多糖的制备方法,其特征在于包括如下步骤:

1)将黄褐牛肝菌子实体烘干,用高速粉碎机粉碎后,加入30倍体积蒸馏水,水浴震荡,8000r离心10min后取上清,重复浸提2-3次,合并离心上清液,用旋转蒸发仪进行旋蒸,浓缩到一定体积,加入无水乙醇静置过夜;离心后沉淀进行复溶,得到多糖溶液,经sevage法除蛋白,剧烈震荡,静置,等到水相和有机相之间的界面出现白色时,将分液漏斗打开,将下层有机相和中间白色絮状物去除,重复上述操作7-8次,取上层水相,透析后,经旋转蒸发除去残留的有机溶剂,经过冷冻干燥得到粗多糖;

2)将1)步中得到的黄褐牛肝菌粗多糖溶于Tris-HCl缓冲液,上样于DEAE Sepharose F.F.柱中,用0-2M NaCl溶液进行线性洗脱,蒽酮-硫酸法与分光光度计跟踪监测每管洗脱液,根据吸光值绘制曲线,收集洗脱峰,透析后冻干;

3)将2)步中得到的洗脱峰用蒸馏水溶解后上样于Sephadex G-75凝胶柱,并用蒸馏水洗脱,用分布收集器3mL/管收集洗脱液,蒽酮-硫酸法跟踪检测,绘出洗脱曲线并按峰收集,得到的组分旋蒸浓缩,冷冻干燥,产物即为HNG2抗氧化多糖。

3.根据权利要求2所述的黄褐牛肝菌中的抗氧化多糖的制备方法,其特征在于:步骤1)中的水浴震荡温度为80℃,震荡5h。

4.根据权利要求2所述的黄褐牛肝菌中的抗氧化多糖的制备方法,其特征在于:步骤1)所得离心上清液经旋蒸、浓缩后,加入4倍体积的无水乙醇于4℃静置过夜。

5.根据权利要求2所述的黄褐牛肝菌中的抗氧化多糖的制备方法,其特征在于:步骤1)的sevage法中,Sevage试剂按照三氯甲烷:正丁醇=4:1的比例进行配制,并按照粗品溶液:Sevage试剂=4:1的比例加入Sevage试剂,剧烈震荡8-10min静置。

6.根据权利要求2所述的黄褐牛肝菌中的抗氧化多糖的制备方法,其特征在于:步骤2)中所述的粗多糖溶于10mM Tris-HCl缓冲液,其pH值为7.4。

7.根据权利要求2所述的黄褐牛肝菌中的抗氧化多糖的制备方法,其特征在于:步骤3)中所述的洗脱流速为0.5mL/min。

8.一种黄褐牛肝菌中的抗氧化多糖的用途,其特征在于:用于生产因自由基等引起氧化应激水平升高导致疾病的药物。

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